Introduction: Erythropoietin is a g

Introduction: Erythropoietin is a glycoprotein hormone that is responsible for regulating the synthesis of red blood cells. Unfortunately, the ability of recombinant human EPO (rhEPO) to enhance haematopoiesis which increases the tissue oxygenation has led to its abuse in sports. The identification of rhEPO is very challenging due to its high similarity with endogenous EPO. EPO and rhEPO have high diversity of glycoforms that have different but overlapped pI. Currently, the standard procedure to detect EPO abuse in urine and blood samples is still utilising gel-based tools which have consistency and sensitivity issues. Glycoproteomic mass spectrometry on the other hand is the new approach in the search for biomarkers to differentiate recombinant EPO from the endogenous one. However, there is still a big gap of knowledge on the glycosylations of EPO that requires extensive profiling. Objective: To perform glycoproteomic profiling of endogenous and recombinant EPO. Methods: NanoLC-Orbitrap-MS/MS was performed on endogenous (uEPO) and several rhEPO (BRP, Mircera, NESP, and Epoetin Delta). The liquid chromatogram was used to illustrate the variations between the molecules in their glycopeptides/peptide retention patterns. Mass spectral data was submitted to a bioinformatic platform for peptide and glycosylation de novo sequencing.MALDI-qTOF-MS/MS was also employed in parallel for glycosylation profiling. Results & Discussion: BRP showed a similar chromatographic pattern as uEPO except for a few distinct peaks. PEGlylated EPO Mircera showed two different regions of chromatographic peaks because the hydrophobic PEGylated peptides were retained longer than the non-PEGlyated peptides. Epoetin Delta and NESP showed even greater variation in the chromatographic pattern compared to uEPO believed to be due to differences in glycosylations and peptide sequence, respectively. Meanwhile, MALDI mass spectrum differential analysis enables the determination of sugar residues attachment to BRP. Conclusion: Glycoproteomic mass spectrometric profiling holds the key to better discrimination between endogenous and recombinant EPO for anti-doping purposes. © 2014 Asian Pacific Tropical Medicine Press.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทนำ: Erythropoietin จะเป็นไกลโคโปรตีนฮอร์โมนที่รับผิดชอบควบคุมการสังเคราะห์เม็ดเลือดแดง อับ ความสามารถของมนุษย์ recombinant EPO (rhEPO) เพื่อเพิ่ม haematopoiesis ซึ่งเพิ่ม oxygenation เนื้อเยื่อได้นำไปละเมิดของกีฬา รหัสของ rhEPO เป็นความท้าทายมากเนื่องจากความคล้ายคลึงกันของสูงกับ endogenous EPO EPO และ rhEPO มีความหลากหลายสูงของ glycoforms ที่มีปี่ แต่เหตุการณ์แตกต่างกัน ปัจจุบัน ขั้นตอนมาตรฐานการละเมิด EPO ในตัวอย่างปัสสาวะและเลือดจะยังคงโดยเครื่องมือที่ใช้เจลซึ่งมีความสอดคล้องและประเด็นความไว Glycoproteomic รเมทคงเป็นวิธีใหม่ในการค้นหาสำหรับ biomarkers เพื่อแบ่งแยก recombinant EPO จาก endogenous อย่างไรก็ตาม ยังมีช่องว่างขนาดใหญ่ความรู้เกี่ยวกับ glycosylations ของ EPO ที่ต้องการสร้างโพรไฟล์ข้อมูลอย่างละเอียด วัตถุประสงค์: การ glycoproteomic สร้างโพรไฟล์ของ recombinant และ endogenous EPO วิธีการ: NanoLC-Orbitrap-MS/MS ทำ endogenous (uEPO) และ rhEPO หลาย (BRP, Mircera, NESP และ Epoetin Delta) Chromatogram ของเหลวถูกใช้เพื่อแสดงให้เห็นถึงความแตกต่างระหว่างโมเลกุลในรูปแบบของพวกเขาคง glycopeptides/เพ ปไทด์ ข้อมูลสเปกตรัมจำนวนมากถูกส่งไปยังแพลตฟอร์มผลเชิงวิวัฒนาการสำหรับเพปไทด์และ glycosylation de novo ลำดับMALDI-qTOF-MS/MS ได้ยังทำงานควบคู่กันสำหรับการรวบรวม glycosylation ผล&สนทนา: BRP พบแบบ chromatographic คล้ายเป็น uEPO ยกเว้นยอดหมดกี่ PEGlylated EPO Mircera พบยอด chromatographic สองภูมิภาคเนื่องจากเปปไทด์ PEGylated hydrophobic ที่สะสมนานกว่าเปปไทด์ไม่ใช่ PEGlyated Epoetin Delta และ NESP พบความผันแปรยิ่งในรูปแบบ chromatographic เมื่อเทียบกับ uEPO ที่เชื่อว่าเป็น เพราะความแตกต่างใน glycosylations และเพปไทด์ลำดับ ตามลำดับ ในขณะเดียวกัน MALDI สเปกตรัมโดยรวมวิเคราะห์ส่วนที่แตกต่างทำให้กำหนดการที่แนบตกน้ำตาลไป BRP สรุป: Glycoproteomic spectrometric โดยรวมการสร้างโพรไฟล์เก็บคีย์การแบ่งแยกดีระหว่าง recombinant และ endogenous EPO สำหรับวัตถุประสงค์ในการต่อต้านโดปปิงค์ © 2014 เอเชียแปซิฟิกเขตร้อนยากดการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทนำ: Erythropoietin เป็นฮอร์โมนไกลโคโปรตีนที่มีหน้าที่รับผิดชอบในการควบคุมการสังเคราะห์ของเซลล์เม็ดเลือดแดง แต่น่าเสียดายที่ความสามารถของมนุษย์ recombinant EPO (rhEPO) เพื่อเพิ่ม haematopoiesis ซึ่งเพิ่มออกซิเจนเนื้อเยื่อได้นำไปสู่​​การล่วงละเมิดในการเล่นกีฬา บัตรประจำตัวของ rhEPO เป็นอย่างมากที่ท้าทายเนื่องจากความคล้ายคลึงกันสูงกับภายนอก EPO EPO และมีความหลากหลาย rhEPO สูงของ glycoforms ที่มีแตกต่างกัน แต่ซ้อนทับ pI ขณะนี้ขั้นตอนมาตรฐานในการตรวจสอบ EPO ละเมิดในปัสสาวะและเลือดกลุ่มตัวอย่างยังคงใช้เครื่องมือเจลตามที่มีปัญหาเกี่ยวกับความมั่นคงและความไว มวลสาร Glycoproteomic ในมืออื่น ๆ ที่เป็นวิธีการใหม่ในการค้นหาความแตกต่าง biomarkers recombinant EPO จากภายนอกอย่างใดอย่างหนึ่ง แต่ยังคงมีช่องว่างขนาดใหญ่ของความรู้เกี่ยวกับ glycosylations ของ EPO ที่ต้องใช้โปรไฟล์กว้างขวาง มีวัตถุประสงค์เพื่อดำเนินการ glycoproteomic โปรไฟล์ของภายนอกและ recombinant EPO วิธีการ: NanoLC-Orbitrap-MS/MS ได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับภายนอก (uEPO) และอีกหลาย rhEPO (BRP, mircera, NESP และ Epoetin Delta) โครมาโทของเหลวถูกใช้ในการแสดงให้เห็นถึงรูปแบบระหว่างโมเลกุลในรูปแบบไกลโค / เปปไทด์การเก็บรักษาของพวกเขา ข้อมูลสเปกตรัมมวลถูกส่งไปยังแพลตฟอร์มชีวสารสนเทศเพื่อเปปไทด์และไกลโคซิเลโนโว sequencing.MALDI-qTOF-MS/MS ก็ยังทำงานในแบบขนานสำหรับ glycosylation โปรไฟล์ ผลและการอภิปราย: BRP แสดงให้เห็นว่ารูปแบบโครมาเช่นเดียวกับ uEPO ยกเว้นยอดเขาที่แตกต่างกันไม่กี่ PEGlylated EPO mircera แสดงให้เห็นว่าทั้งสองภูมิภาคท​​ี่แตกต่างกันของยอดเขาโครเพราะเปปไทด์ PEGylated น้ำถูกเก็บรักษาไว้นานกว่าเปปไทด์ที่ไม่ PEGlyated epoetin เดลต้าและแสดงให้เห็นว่าการเปลี่ยนแปลง NESP ยิ่งใหญ่กว่าในรูปแบบโครมาเมื่อเทียบกับ uEPO เชื่อว่าเป็นเพราะความแตกต่างใน glycosylations เปปไทด์และลำดับตามลำดับ ในขณะที่การวิเคราะห์ความแตกต่างสเปกตรัมมวล MALDI ช่วยให้การกำหนดสิ่งที่แนบน้ำตาลตกค้​​างเพื่อ BRP สรุป: Glycoproteomic spectrometric มวลโปรไฟล์ถือกุญแจสำคัญในการเลือกปฏิบัติที่ดีระหว่างภายนอกและ recombinant EPO เพื่อวัตถุประสงค์ในการป้องกันยาสลบ © 2014 เอเชียแปซิฟิกเวชศาสต​​ร์เขตร้อนกด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บทนำ : ริโธรพ ตินเป็นโปรตีนฮอร์โมนที่รับผิดชอบในการควบคุมการสังเคราะห์เซลล์เม็ดเลือดแดง แต่ความสามารถของ recombinant มนุษย์ EPO ( rhepo ) เพื่อเพิ่มการสร้างเม็ดเลือดซึ่งเพิ่มเนื้อเยื่อออกซิเจนทำให้การละเมิดในกีฬา กำหนด rhepo เป็นเรื่องที่ท้าทายมากเนื่องจากมีความคล้ายคลึงกันสูงภายใน EPO .รายงาน rhepo และมีความหลากหลายมากของ glycoforms ที่แตกต่างกัน แต่ร่วมกัน pi ในปัจจุบัน ขั้นตอนมาตรฐานในการตรวจสอบรายงานการละเมิดในปัสสาวะและเลือดยังใช้เจลที่ใช้เครื่องมือซึ่งมีความสอดคล้องและประเด็นความไวมวลสาร glycoproteomic บนมืออื่น ๆเป็นวิธีการใหม่ในการค้นหาใหม่เพื่อแยกความแตกต่างจากรีคอมบิแนนท์ EPO ในหนึ่ง อย่างไรก็ตาม ยังคงมีช่องว่างของความรู้ใน glycosylations ไอออนที่ต้องการอย่างละเอียดโปรไฟล์ วัตถุประสงค์ : เพื่อแสดง glycoproteomic โปรไฟล์ของโครงสร้างของเซลล์และรายงาน . วิธีการ :nanolc orbitrap MS / MS คือใช้ภายนอก ( uepo ) และหลาย rhepo ( mircera brp , , nesp และโพ ติน Delta ) ของเหลวที่ chromatogram ใช้แสดงให้เห็นถึงการเปลี่ยนแปลงระหว่างโมเลกุลของไกลโคเปปไตด์ / เปปไทด์ในรูปแบบ มวลสเปกตรัมข้อมูลถูกส่งไปยังแพลตฟอร์มไบโอ นฟ ์เมติกสำหรับเปปไทด์และ glycosylation อีกครั้งของมา ดิ qtof MS / MS ยังใช้ในแบบขนานสำหรับ glycosylation โปรไฟล์ ผล&อภิปราย : brp มีรูปแบบคล้ายกัน และเป็น uepo ยกเว้นยอดที่แตกต่างกันไม่กี่ peglylated EPO mircera พบสองภูมิภาคต่าง ๆของยอดเขา และเนื่องจาก เปป pegylated ) ถูกเก็บไว้ได้นานกว่า ไม่ peglyated เปปไทด์เดลต้าและมีการเปลี่ยนแปลง nesp โพ ตินมากขึ้นในรูปแบบ เมื่อเทียบกับ uepo เชื่อว่าเกิดจากความแตกต่างใน glycosylations และลำดับ , เปปไทด์ ตามลำดับ โดยการวิเคราะห์ค่ามา ดิแมสสเปกตรัมให้ปริมาณน้ำตาลที่ตกค้างแนบกับ brp . สรุป :glycoproteomic มวลความผู้ถือกุญแจดีกว่า และจำแนกระหว่างโครงสร้างโปรตีนต้านการรายงานวัตถุประสงค์ สงวนลิขสิทธิ์ 2014 เอเชียเวชศาสตร์เขตร้อนแปซิฟิกสื่อ