The positive control for the mPCR a

The positive control for the mPCR assay consisted of a
mixture of crude template DNA, prepared as described
above, from strains 431 (K99+, F41+, and STaP+), 1477
(K88+, 987P+, LT+, STaP+, and STb+), and 2456 (F18+, LT+,
STaP+, STb+, and Stx2e+). Batches of PCR tubes for
positive controls that contained template DNA from
strains 431, 1477, and 2456, were prepared in advance,
dehydrated, and stored at 220uC as described above.
Reaction products from the positive control PCR reactions
also served as molecular size standards following separation
by agarose gel electrophoresis. Polymerase chain
reaction products were separated by electrophoresis using
4% precast agarose gels containing ethidium bromide with
Tris-borate buffer (4% NuSieve 3:1 Plus Agare). Gels were
electrophoresed at 75–100 V for 1.5–2 hr, photographed,
and analyzed using an AlphaImager imaging system

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ควบคุมค่าบวกสำหรับทดสอบ mPCR ประกอบด้วยการเตรียมส่วนผสมของน้ำมันแบบดีเอ็นเอ ตามที่อธิบายไว้เหนือ จากสายพันธุ์ 431 (K99 + F41 + และ STaP +), 1477(K88 + 987 P + LT + STaP + และ STb +), และ 2456 (F18 + LT +STaP+, STb + และ Stx2e +) ชุดหลอด PCR สำหรับเพิ่มการควบคุมที่ประกอบด้วยดีเอ็นเอต้นแบบจากมีเตรียมสายพันธุ์ 431, 1477 และ 2456 ล่วงหน้าอบแห้ง และเก็บไว้ที่ 220uC อธิบายไว้ข้างต้นปฏิกิริยาผลิตภัณฑ์จากปฏิกิริยา PCR ควบคุมบวกนอกจากนี้ยัง ทำหน้าที่เป็นมาตรฐานขนาดโมเลกุลต่อแยกโดย agarose เจ electrophoresis โซ่พอลิเมอเรสผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาถูกแยก โดยใช้ electrophoresisเจสำเร็จ 4% agarose ประกอบด้วยโบรไมด์ ethidium ด้วยทริสเรทติ้ง borate บัฟเฟอร์ (4% NuSieve 3:1 บวก Agare) เจได้electrophoresed ที่ 75 – 100 V 1.5 – 2 ชม ถ่ายภาพและวิเคราะห์โดยใช้การ AlphaImager ภาพระบบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การควบคุมในเชิงบวกสำหรับการทดสอบ mPCR ประกอบด้วย
ส่วนผสมของดีเอ็นเอแม่แบบดิบที่เตรียมไว้ตามที่อธิบายไว้
ข้างต้นจากสายพันธุ์ 431 (K99 + F41 + และŠtap +), 1477
(K88 + 987P +, LT + Štap + และ STB +) และ 2456 ( F18 +, LT +
Štap + STB + และ Stx2e +) กระบวนการของหลอด PCR สำหรับ
การควบคุมในเชิงบวกที่มีดีเอ็นเอแม่แบบจาก
สายพันธุ์ 431, 1477 และ 2456 ถูกจัดเตรียมไว้ล่วงหน้า
แห้งและเก็บไว้ที่ 220uC ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น.
ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาจากปฏิกิริยา PCR ควบคุมบวก
ยังทำหน้าที่เป็นโมเลกุลขนาดมาตรฐานดังต่อไปนี้ การแยก
ด้วยวิธี gel electrophoresis agarose โพลีเมอห่วงโซ่
ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาถูกแยกจากกันโดยใช้อิเล็ก
4% agarose เจลสำเร็จรูปที่มีโบรไมด์ ethidium กับ
บัฟเฟอร์ Tris-borate (4% NuSieve 3: 1 พลัส Agare) เจลถูก
electrophoresed ที่ 75-100 V สำหรับ 1.5-2 ชั่วโมง, ถ่ายภาพ
และวิเคราะห์โดยใช้ระบบการถ่ายภาพ AlphaImager

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การควบคุมในเชิงบวกสำหรับ mpcr ) ประกอบด้วยส่วนผสมของดีเอ็นเอแม่แบบดิบ

เตรียมตามที่อธิบายไว้ข้างต้น จากสายพันธุ์ ( k99 f41 431 , และขั้นตอน ) เพราะ
( k88 987p , LT , ขั้นตอน , ฯลฯ ) , และ 2456 ( F18 LT ,
stap , ฯลฯ และ stx2e ) ชุดของ PCR หลอด
บวกการควบคุมที่มีแม่แบบดีเอ็นเอจาก
สายพันธุ์ 431 , เพราะ , 2456 ถูกเตรียมมาล่วงหน้า
แห้งและเก็บไว้ที่ 220uc ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น .
ปฏิกิริยาผลิตภัณฑ์จากปฏิกิริยา PCR ควบคุมบวก
ยังทำหน้าที่เป็นมาตรฐานขนาดโมเลกุลต่อไปนี้โดยแยก
, เจล ปฏิกิริยาลูกโซ่ปฏิกิริยาผลิตภัณฑ์แยกโดยวิธี

4 % ( ใช้คู่กับเจลสำเร็จรูปที่มีโบรไมด์โดยบอเรตบัฟเฟอร์ ( 4
% nusieve 3 พลัส agare )
เจลคือelectrophoresed ที่ 75 และ 100 V 1.5 – 2 ชั่วโมงถ่ายภาพ
และวิเคราะห์โดยใช้ alphaimager ภาพระบบ