4. Discussion
Organic acids frequently represent unique chromato-
graphic separation challenges, with strategies for increased
resolution limited to optimising column length, tem-
perature, organic modi®er content, ionic strength or pH
adjustment of eluent in order to suppress both analyte
dissociation and silanol ionisation. Retention under
reversed-phase conditions is generally the result of several
interaction mechanisms between polar solute, eluent, sta-
tionary phase and underlying silica, with the consequence
that column selection and optimisation are rarely facile
(Bruzzoniti, Mentasti & Sarzanini, 1998; Claessens, van
Straten, Cramers, Jerzierska & Buszewski, 1998; Vai-
laya & Horvath, 1998).
Recent HPLC methods for the determination of pan-
tothenic acid in infant formulas have advocated reversed-
phase separation at both low pHand low organicmodi®er
concentration (Endo et al., 1991; Romera et al., 1996;
Zuo & Zhang, 1988). It is recognised that both of these
requirements, while essential for successful retention of
a polar and ionisable analyte, represent potential lim-
itations to e€ective reversed-phase performance, espe-
cially with the older type A silica column chemistries.
Thus, both conventional end-capping protection of
residual silanols and bonded-phase integrity are vulner-
able to low pH, with variable selectivity commonly
reported under such conditions (Dolan, 1998; Kirkland,
1996). Further, the predominantly aqueous eluents
(>95%) required to e€ect retention of such polar ana-
lytes, can initiate collapse of the hydrophobic bonded
phase, with potential variability, or loss of retention.
This problem has previously been described during
pharmaceutical analysis (Woollard, 1986).
The six columns selected during column evaluation
represent di€erent solutions to the above considerations.
The Resolve C18 cartridge column is representative of a
®rst generation, non-endcapped type A silica chemistry,
Table 1
Pantothenic acid content in milk and infant formula powders (mg/100
g)a
4 การอภิปราย
กรดอินทรีย์ที่เป็นตัวแทนของความท้าทายที่พบบ่อยที่ไม่ซ้ำกัน chromato-
แยกกราฟิกที่มีกลยุทธ์สำหรับการเพิ่มขึ้น
ความละเอียด จำกัด ระยะเวลาในการเพิ่มประสิทธิภาพของคอลัมน์ Tem-
ที่อุณหภูมิ, Modi อินทรีย์®เนื้อหาเอ้อแรงอิออนหรือ ph
การปรับตัวของตัวชะเพื่อที่จะปราบปรามทั้ง
วิเคราะห์แยกออกจากกันและไซลานอลบ Ionisation ภายใต้การเก็บรักษา
เงื่อนไขเฟสตรงกันข้ามโดยทั่วไปผลของกลไกหลาย
ปฏิสัมพันธ์ระหว่างตัวถูกละลายขั้วโลกตัวชะ, STA-
ระยะ tionary และซิลิกาพื้นฐานที่มีผล
เลือกคอลัมน์ที่และการเพิ่มประสิทธิภาพจะไม่ค่อยสะดวก
(bruzzoniti, Mentasti & sarzanini, 1998; Claessens, รถตู้
Straten, Cramers, jerzierska & buszewski, 1998;. Vai-
laya Horvath &, 1998)
วิธี HPLC ที่ผ่านมาสำหรับการกำหนดของกระทะ-
กรด tothenic ในสูตรทารกมีการสนับสนุนกลับ-
การแยกเฟสทั้งต่ำภันฑ์ต่ำ organicmodi ®
เอ้อความเข้มข้น (Endo, et al, 1991;.. Romera et al, 1996;
Zuo & zhang, 1988) มันได้รับการยอมรับว่าทั้งสองคนนี้
ความต้องการในขณะที่จำเป็นสำหรับการประสบความสำเร็จของการเก็บรักษา
วิเคราะห์ขั้วโลกและ ionisable เป็นตัวแทนที่มีศักยภาพลิ้ม-
itations ไปยัง e € ective ประสิทธิภาพเฟสกลับ Espe-
cially ชนิดเก่าเคมีคอลัมน์ซิลิกา
. ดังนั้นทั้งการป้องกันการชุมนุมสิ้นการ capping ของ
ไซลานอลที่เหลือและความสมบูรณ์เฟสผูกมัดที่มั่นคง
สามารถ ph ต่ำ ด้วยการเลือกตัวแปรทั่วไป
รายงานภายใต้เงื่อนไขดังกล่าว (dolan, 1998; เคิร์กแลนด์
1996) เพิ่มเติมตัวชะน้ำส่วนใหญ่
(> 95%) ที่จำเป็นในการส่งการเก็บรักษา€ ect เช่นขั้วโลก ana-
lytes สามารถเริ่มต้นการล่มสลายของน้ำผูกมัด
ขั้นตอนที่มีความแปรปรวนที่อาจเกิดขึ้นหรือการสูญเสียของการเก็บรักษา.
ปัญหานี้ได้รับการอธิบายก่อนหน้านี้ในระหว่างการวิเคราะห์ยา
( Woollard, 1986).
คอลัมน์หกเลือกระหว่างการประเมินคอลัมน์
แสดง di €โซลูชั่น erent การพิจารณาดังกล่าวข้างต้น.
คอลัมน์ตลับ c18 แก้ไขเป็นตัวแทนของ
®รุ่น RST พิมพ์ไม่ endcapped เคมีซิลิกา,
ตาราง 1 ปริมาณกรด pantothenic ในนมและผงนมผงดัดแปลงสำหรับทารก (มิลลิกรัมต่อ 100 กรัม
)
การแปล กรุณารอสักครู่..
4. สนทนา
กรดอินทรีย์มักแสดงเฉพาะ chromato-
กราฟิกแยกท้าทาย กับกลยุทธ์สำหรับเพิ่ม
จำกัด optimising ความยาวของคอลัมน์ ยการ - ความละเอียด
perature, modi อินทรีย์ ® เอ้อ เนื้อหา ความแรงของ ionic หรือ pH
ปรับปรุงของ eluent การระงับ analyte ทั้ง
ionisation dissociation และ silanol เก็บรักษาภายใต้
เงื่อนไขขั้นตอนย้อนกลับการคิดผลของหลาย
กลไกการโต้ตอบระหว่างตัวถูกละลายขั้วโลก eluent สตา-
ระยะ tionary และต้นซิลิก้า มีสัจจะ
เลือกคอลัมน์และคุณภาพไม่ค่อยร่ม
(Bruzzoniti, Mentasti & Sarzanini, 1998 Claessens, van
Straten, Cramers, Jerzierska & Buszewski, 1998 Vai-
laya & Horvath, 1998) .
วิธี HPLC ล่าสุดความมุ่งมั่นของแพน-
tothenic กรดในทารกสูตรมี advocated กลับ-
ระยะที่แยกที่สองภัณฑ์ต่ำต่ำ organicmodi ® เอ้อ
สมาธิ (Endo et al., 1991 Romera et al., 1996;
ซูยูเกธีม&เตียว 1988) มันเป็นยังที่ทั้งเหล่านี้
ความต้องการ ในขณะที่จำเป็นสำหรับการรักษาประสบความสำเร็จ
analyte โพลาร์ และ ionisable แสดงถึงศักยภาพริม-
itations กับอี €ective เฟสกลับประสิทธิภาพ espe-
cially กับเก่าซิลิก้าเป็นแบบคอลัมน์ chemistries.
จึง ทั้งธรรมดาสิ้น capping ป้องกัน
silanols เหลือและถูกผูกมัดระยะความเป็น vulner-
pH ต่ำ ด้วยวิธีตัวแปรโดยทั่วไปสามารถ
รายงานภายใต้เงื่อนไขดังกล่าว (Dolan, 1998 เคิร์คแลนด์,
1996) เพิ่มเติม eluents เป็นอควี
(> 95%) ต้องรักษา ect € e เช่นขั้วอานา-
lytes สามารถเริ่มต้นของการ hydrophobic ถูกผูกมัด
ระยะ สำหรับความผันผวนที่อาจเกิดขึ้น หรือสูญเสียของเงินประกันผลงานสำหรับ
อธิบายปัญหานี้ในช่วงก่อนหน้านี้
วิเคราะห์ยา (Woollard, 1986) .
หกคอลัมน์ที่เลือกในระหว่างการประเมินคอลัมน์
แทน di€ erent โซลูชั่นเพื่อการพิจารณาข้างต้นได้
คอลัมน์ C18 แก้ไขตลับหมึกเป็นตัวแทนของการ
® rst รุ่น endcapped ไม่มีซิลิก้าเป็นแบบเคมี,
ตาราง 1
กรดแพนโทธีนิคเนื้อหาในทารกและนมผงสูตร (มิลลิกรัม/100
g) การ
การแปล กรุณารอสักครู่..
4 . การประชุม
กรดอินทรีย์ที่เป็นตัวแทนที่โดดเด่น chromato -
ภาพ กราฟิกการแยกความท้าทายด้วยกลยุทธ์เพื่อเพิ่มความละเอียด
ซึ่งจะช่วยจำกัด(มหาชน)เพื่อการรักษาคอลัมน์ความยาว,(ประธาน)ชั่วคราว -
perature ,อินทรีย์ละเอียดถี่ถ้วนในที่สุด Modi ก็® ER เนื้อหา,ฟังก์ชั่น Ionic ความแรงของหรือ pH
ซึ่งจะช่วยในการปรับตัวของ eluent เพื่อระงับทั้ง analyte
ไม่ลงเนื้อเห็นด้วยและ silanol ionisation . ยึดตาม
ตามมาตรฐานเปลี่ยนแปลงขั้นตอนเงื่อนไขโดยทั่วไปแล้วจะส่งผลให้หลาย
ซึ่งจะช่วยการโต้ตอบกลไกระหว่างขั้ว solute , eluent , STA -
tionary ขั้นตอนพื้นฐานและซิลิกา,ด้วย
ซึ่งจะช่วยให้ผลการเลือกคอลัมน์และการใช้ประโยชน์สูงสุดแทบจะไม่ง่าย
( bruzzoniti , mentasti & sarzanini , 1998 ; claessens ,รถตู้
straten , cramers , jerzierska & buszewski , 1998 ; vai -
laya & horvath , 1998 )..
เมื่อไม่นานมานี้ hplc วิธีใดวิธีหนึ่งในการกำหนดแพน -
tothenic กรดในทารกสูตรได้เห็นพ้องกันพลิกกลับ -
ช่วงที่ทั้งสองโดยเว้นระยะห่างต่ำ phand ต่ำ organicmodi ® ER
สมาธิ( Endo et al ., 1991 ; romera et al ., 1996 ;
zuo &จาง, 1988 ) ได้รับการยอมรับว่า
ซึ่งจะช่วยความต้องการของทั้งสองนี้ในขณะที่ที่จำเป็นสำหรับการยึดประสบความสำเร็จของ
ที่รับสัญญาณเสียงและ ionisable analyte แสดง ศักยภาพ บขส. -
itations อี€™ ective พลิกกลับ - ขั้นตอนการทำงาน espe -
cially พร้อมด้วยที่เก่ากว่าพิมพ์ที่ซิลิกาคอลัมน์ดังกล่าวเป็นกิจการ.
ดังนั้นทั้งสองแบบ End - แต่ยังคงตรึงการคุ้มครอง
ส่วนที่เหลือ silanols และเย็บ - ขั้นตอนความสมบูรณ์ของข้อมูลเป็น vulner -
สามารถต่ำ pH ,ปรับเปลี่ยนตัวเลือกทั่วไปด้วย
รายงานตามเงื่อนไข( dolan , 1998 ; Kirkland , Wash ,
1996 ) โดดเด่นไปด้วยที่เกิดจากน้ำเพิ่มเติม eluents
ตามมาตรฐานได้(> 95% )ต้องอี€™หรือการใช้งานการเก็บข้อมูลเช่นทิศทาง ANA -
lytes ,สามารถเริ่มต้นการล่มสลายของที่ถูกขับเย็บ
ช่วงที่มี ศักยภาพ ได้,หรือความสูญเสียของการยึด.
ปัญหานี้ได้เคยถูกตามที่อธิบายไว้ในระหว่าง
ทางด้าน เภสัช กรรมการวิเคราะห์( woollard , 1986 )..
ที่หกคอลัมน์ที่เลือกในระหว่างการประเมินผลคอลัมน์
ซึ่งจะช่วยเป็นตัวแทน di €™ erent โซลูชันการนี้ทางข้อควรพิจารณาเกี่ยวกับ.
ที่แก้ไข C 18 ตลับคอลัมน์เป็นตัวแทนของ
® RST ,รุ่น,ไม่ endcapped พิมพ์ที่ซิลิกาเคมี,
ตารางที่ 1 ตินจัดอยู่ในนมและนมผงดัดแปลงสำหรับทารกปนเปื้อน(มก./ 100
G )
การแปล กรุณารอสักครู่..