to increase the substitution degree and potentially enhance drug,
peptide or protein grafting (“CMTMC 2”) (Fig. 2).
2.2.2. Conventional synthesis method – TMC 1
For the conventional synthesis, TMC was synthesized through
nucleophilic substitution with CH3I as a reagent, sodium iodide as
catalyst and sodium hydroxide (NaOH) as base with NMP as solvent,
modifying the protocol described by Hansson et al. (2012b).
We evaluated the effects of reaction time and solvent used for precipitation
on quaternization.
Briefly, 4.0 g of chitosan and 9.6 g of NaI (molar ratio 4:1) were
added to 160 mL pre-warmed NMP at 60 ◦C. After 30 min of reaction,
the pH of the solution was adjusted to a value of 10 using
15% (w/v) NaOH and left to react for 15 min. Later, 24 mL of CH3I
(chitosan:CH3I molar ratio of 1:2) were added and left to react for
the desired time (varying, see below). The solution was filtered
through a P3 glass filter under vacuum in order to remove any
insoluble residues. Then, the solution was precipitated by adding
5 volumes of ethanol and diethylether at different ratios (varying,
see below). Subsequently, TMC was separated fromthe supernatant
by centrifugation (Beckmann Avanti TM 30, UK) at 3220 × g for
15 min. The precipitate was dissolved in 10% NaCl and then stirred
overnight at room temperature. Furthermore, dialysis (Spectra/Por
4, cut-off 12–14 kDa, Spectra, USA) was performed for 3 days with
water changes twice daily. Samples were lyophilized (Christ Alpha
2–4 LD Plus, Switzerland), which was followed by analysis.
In order to study the effect of reaction time, we left reactions
for 20, 40, 60, 100, 140 min or overnight. After filtration, TMC was
precipitated in a 1:1 mixture of ethanol and diethylether. We also
investigated the effect of ethanol:diethylether ratio (1:0; 1:1; 2:1;
3:1; 4:1; 5:1; 1:2; 1:3; 1:4 or 1:5) used for precipitation, for a given
reaction time of 140 min.
เพื่อเพิ่มระดับทดแทนและอาจเพิ่มการยาเสพติดเปปไทด์หรือโปรตีนการปลูกถ่ายอวัยวะ ("CMTMC 2") (รูป. 2). 2.2.2 วิธีการสังเคราะห์ธรรมดา - TMC 1 สำหรับการสังเคราะห์ธรรมดา TMC สังเคราะห์ผ่านทดแทนnucleophilic กับ CH3I เป็นสารที่มีโซเดียมไอโอไดด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาและโซดาไฟ(NaOH) เป็นฐานกับ NMP เป็นตัวทำละลาย, การปรับเปลี่ยนโปรโตคอลอธิบายโดย Hansson et al, . (2012b) เราประเมินผลกระทบของเวลาปฏิกิริยาและตัวทำละลายที่ใช้ในการตกตะกอนใน quaternization. สั้น ๆ , 4.0 กรัมของไคโตซานและ 9.6 กรัม NaI (อัตราส่วน 4: 1) ได้รับเพิ่มถึง 160 มิลลิลิตรก่อนอุ่น NMP ที่ 60 ◦C . หลังจาก 30 นาทีของการเกิดปฏิกิริยา, ค่า pH ของการแก้ปัญหาการปรับมูลค่าของ 10 ใช้15% (w / v) NaOH และซ้ายที่จะตอบสนองเป็นเวลา 15 นาที ต่อมา 24 มิลลิลิตร CH3I (ไคโตซาน: CH3I อัตราส่วน 1: 2) มีการเพิ่มและซ้ายที่จะตอบสนองสำหรับเวลาที่ต้องการ(ที่แตกต่างกันดูด้านล่าง) วิธีการแก้ปัญหาถูกกรองผ่านตัวกรองแก้ว P3 ภายใต้สุญญากาศเพื่อลบใด ๆ ตกค้างที่ไม่ละลายน้ำ แล้ววิธีการแก้ปัญหาที่ถูกเร่งโดยการเพิ่ม5 ปริมาณเอทานอลและไดเอทิลอีเทอร์อัตราส่วนที่แตกต่างกัน (ที่แตกต่างกันดูด้านล่าง) ต่อมา TMC ถูกแยกออก fromthe ใสโดยการหมุนเหวี่ยง(Beckmann Avanti TM 30 สหราชอาณาจักร) ที่ 3220 ×กรัมสำหรับ15 นาที ตะกอนถูกละลายใน 10% โซเดียมคลอไรด์และขยับแล้วค้างคืนที่อุณหภูมิห้อง นอกจากนี้การล้างไต (Spectra / ป4 ตัด 12-14 กิโลดาลตัน, Spectra สหรัฐอเมริกา) ได้ดำเนินการเป็นเวลา 3 วันที่มีการเปลี่ยนแปลงทุกวันน้ำสองครั้ง ตัวอย่างแห้ง (คริสอัลฟา2-4 LD พลัสวิตเซอร์แลนด์) ซึ่งตามมาด้วยการวิเคราะห์. เพื่อที่จะศึกษาผลของปฏิกิริยาเวลาที่เราเหลือปฏิกิริยา20, 40, 60, 100, 140 นาทีหรือข้ามคืน หลังจากการกรอง TMC ได้รับการตกตะกอนใน1: 1 ผสมเอทานอลและไดเอทิลอีเทอร์ นอกจากนี้เรายังตรวจสอบผลกระทบของเอทานอล: อัตราการไดเอทิลอีเทอร์ (1: 0; 1: 1 2: 1; 3: 1 4: 1; 5: 1 1: 2; 1: 3 1: 4 หรือ 1: 5 ) ใช้สำหรับการเร่งรัดเพื่อให้เวลาปฏิกิริยา140 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..

เพื่อเพิ่มระดับ และอาจเพิ่มการใช้ยาเปปไทด์หรือโปรตีนต่อกิ่ง (
" cmtmc 2 " ) ( รูปที่ 2 ) .
2.2.2 . ปกติวิธีการสังเคราะห์– TMC 1
สำหรับการสังเคราะห์แบบ TMC สังเคราะห์ผ่าน
nucleophilic ทดแทนกับ ch3i กระทำเป็นสารประกอบไอโอไดด์โซเดียมเป็น
ตัวเร่งปฏิกิริยาโซเดียมไฮดรอกไซด์ ( NaOH ) เป็นฐานด้วย
nmp เป็นตัวทำละลายการปรับเปลี่ยนขั้นตอนการอธิบายโดย แฮนสัน et al . ( 2012b ) .
เราประเมินผลของเวลาปฏิกิริยาและตัวทำละลายที่ใช้ในการ quaternization
.
สั้น 4.0 กรัมของไคโตซานและ 9.6 กรัม ( ในอัตราส่วน 4 : 1 ) จำนวน 160 ml
เพิ่มก่อนเปิด nmp ที่ 60 ◦ C หลังจาก 30 นาทีของปฏิกิริยา
pH ของสารละลายปรับใช้ค่า 10
15 % ( w / v ) NaOH และซ้ายเพื่อตอบสนองสำหรับ 15 นาทีต่อมา 24 ml ch3i
( ไคโตซาน : ch3i อัตราส่วนโมล 1 : 2 ) มีการเพิ่มและซ้ายเพื่อตอบสนองสำหรับ
เวลาที่ต้องการ ( ละคร ดูด้านล่าง ) สารละลายที่ผ่านการกรอง
P3 แก้วกรองสุญญากาศ เพื่อลบใด ๆที่
ไม่ตกค้าง จากนั้นสารละลายตกตะกอนโดยการเพิ่ม
5 เล่ม และเอทานอลไดเ ธิลอีเธอร์ในอัตราส่วนที่แตกต่างกัน ( แตกต่างกัน
ดูด้านล่าง ) ต่อมาโดยแยกจากน่าน
โดยการเหวี่ยงแยก ( เบ็คมันน์ AVANTI TM 30 , UK ) ที่ 3 , 220 × g
15 นาที ที่ถูกละลายใน 10 โซเดียมคลอไรด์แล้วกวน
ค้างคืนที่อุณหภูมิห้อง นอกจากนี้ ฟอกเลือด ( Spectra / ปอ
4 ตัด 12 – 14 กิโลดาลตัน , Spectra , USA ) กำหนด 3 วันกับการเปลี่ยนแปลง
น้ำวันละสองครั้ง จำนวนโปรตีน ( พระคริสต์อัลฟา
2 – 4 LD และสวิตเซอร์แลนด์ )ซึ่งตามการวิเคราะห์ .
เพื่อศึกษาผลของเวลา เราออกจากปฏิกิริยา
20 , 40 , 60 , 100 , 140 นาที หรือทั้งคืน หลังจากการกรอง TMC คือ
ตกตะกอนใน 1 : 1 ผสมของเอทานอลและไดเ ธิลอีเธอร์ . เรายัง
ศึกษาผลของเอทานอลต่อไดเ ธิลอีเธอร์ ( 1 : 0 ; 1 ; 2 : 1 ;
3 : 1 ; 4 : 1 ; 5 : 1 ; 2 ; 1 : 3 ; 1 : 4 หรือ 1 : 5 ) ที่ใช้ในการตกตะกอนให้
,ปฏิกิริยาเวลา 140 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
