The 16S rRNA genes were amplified w

The 16S rRNA genes were amplified with bacterial universal primers specific for eubacterial
16S rRNA gene (Forward, AGTTTGATCATGGCTCAG) and (Reverse,TTACCGCGGCTGGCA). The PCR (25l) contained 0.5l of each forward and reverse primer, 1.5mM of 10X Taq buffer (stock 20mM), 0.2mM (2.0l) of each deoxynucleotide (ddATP, ddGTP, ddCTP and ddTTP), 1unit of Taq DNA polymerase (5units/l) and 1.5l DNA. PCR conditions were as follows: initial denaturation at 95ºC for 5 min, followed by 30 cycles, each with 1 min denaturation at 95ºC, 1 min annealing at 55ºC and extension at 72ºC for 1 min, before a final extension at 72ºC for 5 min. The PCR products obtained from DNA extracted from the samples were first analyzed by electrophoresis in 1.5% agarose gel and
were stained with ethidium bromide and visualized under short-wavelength UV light.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีขยายยีน 16S rRNA กับแบคทีเรียสากลไพรเมอร์เฉพาะสำหรับ eubacterial16S rRNA ยีน (ไปข้างหน้า AGTTTGATCATGGCTCAG) และ (ย้อนกลับ TTACCGCGGCTGGCA) PCR (25l) อยู่ 0.5l ละไปข้างหน้า และย้อนกลับพื้น 1.5 มม. 10 X Taq บัฟเฟอร์ (หุ้น 20 มม.), 0.2 mM (2.0l) deoxynucleotide (ddATP, ddGTP, ddCTP และ ddTTP) 1unit Taq DNA พอลิเมอเรส (5units l) และ 1.5l ดีเอ็นเอแต่ละ เงื่อนไข PCR มีดังนี้: denaturation เริ่มต้นที่ 95ºC สำหรับ 5 นาที ตาม ด้วยรอบ 30 ละ denaturation 1 นาทีที่ 95ºC, 1 นาทีการอบเหนียวที่ 55ºC และ 72ºC ใน 1 นาที ก่อนขยายสุดท้ายที่ 72ºC ใน 5 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR ที่ได้รับจากดีเอ็นเอที่สกัดจากตัวอย่างแรกถูกวิเคราะห์ โดย electrophoresis ใน 1.5% agarose เจล และสีกับโบรไมด์ ethidium และ visualized ภายใต้แสง UV ความยาวคลื่นสั้นนั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยีน 16S rRNA ถูกขยายด้วยไพรเมอร์สากลแบคทีเรียที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ eubacterial
rRNA ยีน 16S (ไปข้างหน้า AGTTTGATCATGGCTCAG) และ (ย้อนกลับ TTACCGCGGCTGGCA) PCR (25l) ที่มี0.5lของแต่ละข้างหน้าและย้อนกลับไพรเมอร์, 1.5mm ของบัฟเฟอร์ 10X Taq (หุ้น 20mm) 0.2mm (2.0l) ของแต่ละ deoxynucleotide (ddATP, ddGTP, ddCTP และ ddTTP) 1unit ของดีเอ็นเอโพลิเมอร์ Taq (5units / l) และ DNA 1.5l เงื่อนไข PCR มีดังนี้ denaturation เริ่มต้นที่95ºCเป็นเวลา 5 นาทีตามด้วย 30 รอบแต่ละคนมี 1 denaturation นาทีที่95ºC, 1 นาทีที่หลอม55ºCและ72ºCที่ขยายเวลา 1 นาทีก่อนที่จะขยายสุดท้าย72ºCเป็นเวลา 5 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR ดีเอ็นเอที่ได้จากการสกัดจากตัวอย่างที่ได้มาวิเคราะห์เป็นครั้งแรกโดย electrophoresis 1.5% agarose
เจลและถูกย้อมด้วยethidium bromide และมองเห็นภายใต้แสงยูวีความยาวคลื่นสั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ส่วนเบส 16S rRNA ยีนของแบคทีเรียสากลโดยเฉพาะ eubacterial
เบส 16S rRNA ยีน ( ไปข้างหน้า agtttgatcatggctcag ) และ ( ย้อนกลับ ttaccgcggctggca ) pcr ( 25  L ) อยู่ 0.5  L แต่ละไปข้างหน้าและย้อนกลับไพรเมอร์ , 1.5 เท่า ทัค บัฟเฟอร์ ( หุ้น 20mm ) 0.2mm ( 2.0  L ) ของแต่ละขอขมาลาโทษ ( ddatp ddgtp ddctp , และ , ddttp ) 1unit ของดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ทัค ( 5units /  L ) และ 15 ชั้น DNA โดยเงื่อนไขดังนี้ ( เริ่มต้นที่ 95 ºองศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ตามด้วย 30 รอบละ 1 นาที ( 95 º C , 1 นาที อบอ่อนที่อุณหภูมิ 55 º C และส่วนขยายที่ 72 ºองศาเซลเซียสนาน 1 นาที ก่อนขยาย สุดท้ายที่º 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีโดยผลิตภัณฑ์ที่ได้จาก ดีเอ็นเอที่สกัดได้จากตัวอย่างที่วิเคราะห์โดยวิธีแรกใช้ 1.5 %
,ใช้ย้อมทิเดียมโบรไมด์และมองเห็นแสงยูวีที่ความยาวคลื่นสั้น