Preparation of cell free extract Ly

Preparation of cell free extract Lysinibacillus sp.
RGS cells were grown in the nutrient broth, pH 6.6 incubated at 30
C for 24 h and harvested by centrifuged at
3000 g for 15 min.
These cells (ca. 9.8 g/l) were suspended in potassium phosphate buffer (50 mM, pH 7.4) for sonication (Sonics-vibracell ultrasonic processor), keeping sonifier output at 40 amp and giving 8 strokes each of 40 s with a 2 min
interval at 4
C.
After centrifugation of this crude extract at 3000 g for 15 min the supernatant was used as a source of an enzyme. Similar procedures were followed to the cells obtained after complete decolorization (6 h). Protein content was estimated
by the Biuret method.
Protein concentration of cell free extract was kept constant (2.0 mg/ml) for the enzymatic studies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเตรียมสารสกัดจากโทรศัพท์มือถือฟรี Lysinibacillus Sp.
เซลล์ RGS ปลูกในน้ำซุปสารอาหารที่มีค่า pH 6.6 บ่มที่ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงและเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่
3000? กรัมเป็นเวลา 15 นาที.
เซลล์เหล่านี้ (แคลิฟอร์เนีย 9.8 g / l) เป็น ที่ลอยอยู่ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์โพแทสเซียม (50 มิลลิค่า pH 7.4) สำหรับ sonication (หน่วยประมวลผลล้ำ Sonics-vibracell) ทำให้การส่งออก sonifier ที่ 40 แอมป์และให้ 8 จังหวะแต่ละ 40 s กับต่ำสุด 2
ช่วงที่ 4 องศาเซลเซียส.
หลังจากการหมุนเหวี่ยงนี้ สารสกัดที่ 3000? กรัมเป็นเวลา 15 นาทีสารละลายที่ใช้เป็นแหล่งที่มาของเอนไซม์ วิธีการที่คล้ายกันตามไปยังเซลล์ที่ได้รับหลังจากการลดสีสมบูรณ์ (6 ชั่วโมง) ปริมาณโปรตีนที่ประมาณโดยวิธี Biuret. ความเข้มข้นของโปรตีนของเซลล์สารสกัดจากฟรีคง (2.0 mg / ml) สำหรับการศึกษาเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมสารสกัดเซลล์ฟรี lysinibacillus sp .
rgs เซลล์ปลูกในน้ำซุปสารอาหารที่ pH 6.6 บ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง
และเก็บเกี่ยว โดยระดับที่ 3 , 000  G 15 นาที

เซลล์เหล่านี้ ( ประมาณ 9.8 กรัม / ลิตร ) ถูกระงับในโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 50 มม. sonication pH 7.4 ) ( sonics vibracell เครื่องประมวลผล )การรักษา sonifier ผลผลิตที่ 40 แอมป์ และให้ 8 จังหวะแต่ละ 40 s กับ 2 นาทีที่ 4
C .

ช่วงหลังการปั่นเหวี่ยงของสารสกัดนี้ที่ 3 , 000  G 15 นาทีนำถูกใช้เป็นแหล่งของเอนไซม์ ตามขั้นตอนที่คล้ายคลึงกันกับเซลล์ที่ได้รับหลังจากการเสร็จสมบูรณ์ ( 6 ชั่วโมง ) ปริมาณโปรตีนประมาณ
โดยไบยูเร็ตวิธี
โปรตีนสกัดเข้มข้นจากเซลล์ฟรีคงที่ ( 2.0 มก. / มล. ) สำหรับการศึกษาเอนไซม์ .