To address the suppression issue fu

To address the suppression issue further, we made retroviral
HIF1α expression vectors in which the amount of
HIF1α produced can be regulated by the addition of doxycycline.
VHL–/– renal carcinoma cells were then infected with
the viruses and maintained in pools. Immunoblot analysis
of these cells grown in the presence or absence of 1 μg/mL of
doxycycline confirmed that HIF1α expression was induced
by doxycycline and that the HIF1α levels achieved were
similar to those observed after treating HK2 immortalized
renal epithelial cells with the prolyl hydroxylase inhibitor
dimethyloxalylglycine (DMOG) or the proteasomal inhibitor
MG132 (Fig. 3A; Supplementary Fig. S5). Re-expression of
HIF1α in the VHL–/– renal carcinoma cell lines A498, 769-P,
UOK101, and SLR24—all of which produce HIF2α, but not
wild-type HIF1α—impaired proliferation in vitro (Fig. 3B).
This effect was specific because induction of HIF1α did not
diminish the proliferation of RCC4 and UMRC-2 VHL–/– renal
carcinoma cells, which express both HIF1α and HIF2α
(Fig. 3B; Supplementary Fig. S5). Therefore, HIF1α can suppress
the proliferation of VHL–/– renal carcinoma cells when
expressed at levels approximating those achieved after VHL
inactivation

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การแก้ปัญหาปราบปราม ต่อไป เราทำ retroviralHIF1α เวกเตอร์นิพจน์ซึ่งจำนวนHIF1α ผลิตสามารถควบคุมได้ โดยการเพิ่มของไก่VHL – / – เซลล์มะเร็งไตได้แล้วติดเชื้อไวรัสและเก็บไว้ในสระว่ายน้ำ วิเคราะห์ Immunoblotเซลล์เหล่านี้ปลูกในมีหรือไม่ 1 ไมโครกรัม/มล.ไก่ได้รับการยืนยันว่า มีการเหนี่ยวนำ HIF1α นิพจน์โดยไก่และที่ ระดับ HIF1α ที่ได้ถูกคล้ายกับที่สังเกตหลังจากรักษา HK2 อันเป็นอมตะ เซลล์เยื่อบุผิวไตกับยับยั้ง hydroxylase prolyldimethyloxalylglycine (DMOG) หรือยับยั้ง proteasomalMG132 (รูป 3A รูปเสริม S5) การแสดงออกของHIF1α ใน VHL – / – เซลล์มะเร็งไตเส้น A498, 769-PUOK101 และ SLR24 — ซึ่งผลิต HIF2α แต่ไม่ชนิดป่า HIF1α — บกพร่องแพร่กระจายในหลอดทดลอง (รูปที่ 3B)ผลกระทบนี้ก็เฉพาะเนื่องจากการเหนี่ยวนำของ HIF1α ไม่ได้ลดการแพร่กระจายของ RCC4 และ UMRC-2 VHL – / – ไตเซลล์มะเร็ง ซึ่ง HIF1α และ HIF2α(รูปที่ 3B รูปเสริม S5) ดังนั้น สามารถระงับ HIF1αการแพร่กระจายของ VHL – / – ไตมะเร็งเซลล์เมื่อแสดงในระดับที่ใกล้เคียงที่ได้รับหลังจาก VHLยกเลิกการเรียก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อแก้ไขปัญหาการปราบปรามต่อไปเราทำไวรัส
HIF1αเวกเตอร์การแสดงออกซึ่งในจำนวน
HIF1αผลิตสามารถควบคุมได้โดยการเพิ่มของโรคเกาต์ได้.
VHL - / - เซลล์มะเร็งไตมีการติดเชื้อแล้วกับ
ไวรัสและการบำรุงรักษาในสระว่ายน้ำ วิเคราะห์ Immunoblot
ของเซลล์เหล่านี้เติบโตขึ้นในการมีหรือไม่มีของ 1 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร
doxycycline ได้รับการยืนยันว่าการแสดงออกHIF1αถูกชักนำ
โดย doxycycline และว่าระดับHIF1αประสบความสำเร็จเป็น
ที่คล้ายกันกับที่พบหลังจากการรักษา HK2 immortalized
เซลล์เยื่อบุผิวไตกับ prolyl hydroxylase ยับยั้ง
dimethyloxalylglycine (DMOG) หรือยับยั้ง proteasomal
MG132 (รูปที่ 3A.. เสริมรูป S5) Re-การแสดงออกของ
HIF1αใน VHL - / - ไตมะเร็งเซลล์สาย A498, 769-P,
UOK101 และ SLR24-ทั้งหมดที่ผลิตHIF2α แต่ไม่
งอกในหลอดทดลอง (รูปที่ 3B.) ชนิดป่าHIF1αบกพร่อง.
นี้ ผลที่ได้คือที่เฉพาะเจาะจงเพราะการชักนำของHIF1αไม่ได้
ลดการแพร่กระจายของ RCC4 และ UMRC-2 VHL - / - ไต
เซลล์มะเร็งซึ่งแสดงทั้งHIF1αและHIF2α
(รูปที่ 3B.. เสริมรูป S5) ดังนั้นHIF1αสามารถปราบปราม
การแพร่กระจายของ VHL - / - เซลล์มะเร็งไตเมื่อ
แสดงในระดับที่ใกล้เคียงกับผู้ที่ประสบความสำเร็จหลังจาก VHL
การใช้งาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่อยู่ในการปราบปรามปัญหาเพิ่มเติม เราทำ retroviralhif1 αการแสดงออกซึ่งปริมาณเวกเตอร์hif1 αผลิตสามารถถูกควบคุมโดยการเพิ่มของยาฆ่าเชื้อที–เซลล์มะเร็งไตต่อการ / แล้วติดเชื้อไวรัสและการรักษาในสระว่ายน้ำ การวิเคราะห์มมูโนบล็เหล่านี้เซลล์ที่ปลูกในการแสดงตนหรือขาด 1 μกรัม / มิลลิลิตรด็อกซี่ไซคลิน ยืนยันว่าα hif1 นำการแสดงออกโดยคอนสแตนติน และที่ระดับความมี hif1 αคล้ายกับที่พบหลังการรักษา hk2 immortalizedไตเซลล์เยื่อกับ prolyl hydroxylase ยับยั้งdimethyloxalylglycine ( dmog ) หรือ proteasomal ยับยั้งmg132 ( รูปเพิ่มเติมรูป 3A ; S5 ) Re : การแสดงออกของhif1 αใน–– โรคมะเร็งเซลล์ไตต่อการ / สาย a498 769-p , ,uok101 และ slr24 ซึ่งทั้งหมดผลิต hif2 α , แต่ไม่การบกพร่องของ hif1 แอลฟาในหลอดทดลอง ( รูปที่ 3B )ผลนี้เฉพาะเนื่องจากการ hif1 αไม่ได้ลดการแพร่กระจายของ rcc4 umrc-2 – / ไตและต่อการจำกัดเซลล์มะเร็ง ซึ่งบริการทั้ง hif1 α hif2 αและ( รูปที่ 3B ; เสริมรูป S5 ) ดังนั้น hif1 αสามารถยับยั้งการแพร่กระจายของ VHL – / –เซลล์มะเร็งไต เมื่อแสดงในระดับประมาณหลังได้รับต่อการเหล่านั้นการยับยั้ง