Aconitase Activity
Heart tissue aconitase activity was evaluated by measuring the amount of cis-aconitate produced from citrate and isocitrate [40]. Briefly, frozen tissues were homogenized 1 in 10 (w/v) in 200 μl lysis buffer containing 50 mM Tris-HCl, pH 7.6, 1% Triton X-100, 1 mM cysteine, 1 mM citrate, 0.5 mM MnCl
, and 1 mM PMSF, incubated for 15 min at room temperature, and centrifuged at 15,000 g for 10 min at 4 ฐC. The activity of aconitase in the supernatant was measured as described by Takemoto et al. [40].
Aconitase กิจกรรม
หัวใจกิจกรรม aconitase เนื้อเยื่อถูกประเมินโดยการวัดปริมาณของซิส aconitate ผลิตจากซิเตรตและ isocitrate [40] สั้น ๆ , เนื้อเยื่อแช่แข็งได้หดหาย 1 ใน 10 (w / v) ในบัฟเฟอร์สลาย 200 ไมโครลิตรที่มี 50 mM Tris-HCl, pH 7.6, 1% Triton X-100, 1 มิลลิ cysteine, 1 มิลลิซิเตรต 0.5 มิลลิ MnCl
และ 1 มิลลิ PMSF, บ่มเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้องและหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 ฐ C. กิจกรรมของ aconitase ในสารละลายวัดตามที่อธิบาย Takemoto และคณะ [40]
การแปล กรุณารอสักครู่..
