( Lipoxygenase (LOX) activityLOX ac

( Lipoxygenase (LOX) activity
LOX activity was measured using a continuous spectrophotometric method based on that modified by Li and others (2008).

Hot water–ground soymilk was centrifuged at 16000 × g at 4 ◦C for 15 min; the supernatant was crude enzyme extracts. A portion of the crude enzyme extracts was inactivated in water bath at 100 ◦C for 20 min, followed by full dissolution of 1 μL substrate linoleic acid solution (99% purified, Tianjin, China) with 1 mL absolute alcohol by stirring.

Subsequently, linoleic acid/ethyl alcohol solution was diluted to 100 mL with borate buffer (pH 9, 0.2M).

Then 2 mL substrate linoleic acid solution and 0.96 mL 0.2 M borate buffer were transferred to quartz cuvettes (Unic Instruments Inc., Shanghai, China),mixed by inversion, and equilibrated at 25 ◦C.

Subsequently, 0.04 mL diluted enzyme extract was added to the quartz cuvettes and immediately mixed by inversion.

After mixing for 3 min, absorbance was measured immediately at 234 nm by a spectrophotometer (UV-2800, Unic Instruments Inc.).

A blank was prepared with 2 mL substrate solution, 0.96 mL borate buffer, and 0.04 mL inactivated crude enzyme extracts.

One unit of LOX activity was defined as a change in 0.001 units of absorbance per minute enzyme extract. All samples were measured in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

(กิจกรรม Lipoxygenase (LOX)กิจกรรม LOX ถูกวัดโดยใช้วิธี spectrophotometric เนื่องจากบนที่ของ Li และอื่น ๆ (2008) เครื่องทำน้ำอุ่น – ดินกระดาษป้องกันเชื้อราถูก centrifuged ที่ 16000 × g ที่ ◦C 4 สำหรับ 15 นาที สารสกัดจากเอนไซม์ดิบ supernatant ได้ ส่วนสารสกัดจากเอนไซม์ดิบถูกยกเลิกในอ่างน้ำที่ 100 ◦C สำหรับ 20 นาที ตาม ด้วยยุบเต็มของ 1 μL พื้นผิวกรด linoleic (99% บริสุทธิ์ เทียนจิน จีน) กับแอลกอฮอล์สัมบูรณ์ 1 mL โดยกวน ในเวลาต่อมา กรด linoleic/เอทิล แอลกอฮอล์โซลูชันถูกผสมกับ 100 มลกับ borate บัฟเฟอร์ (pH 9, 0.2M)แล้ว มล 2 พื้นผิวกรด linoleic โซลูชันและมล 0.96 0.2 M borate บัฟเฟอร์ได้แล้วกับควอตซ์ cuvettes (Unic มือ Inc. เซี่ยงไฮ้ จีน), ผสม โดยกลับ และ equilibrated ที่ 25 ◦C ต่อมา 0.04 mL ผสมสารสกัดเอนไซม์ถูกเพิ่ม cuvettes ควอตซ์ และผสมกลับโดยทันที หลังจากผสมใน 3 นาที absorbance ที่วัดทันทีที่ 234 nm โดยเครื่องทดสอบกรดด่าง (UV-2800, Unic มือ Inc.) ช่องว่างที่พร้อมแก้ไขปัญหาพื้นผิว 2 mL, 0.96 mL borate บัฟเฟอร์ และ 0.04 mL สารสกัดจากเอนไซม์ดิบที่ยกเลิกกิจกรรม LOX หน่วยหนึ่งถูกกำหนดเป็นการเปลี่ยนแปลง absorbance ต่อนาทีเอนไซม์แยกหน่วย 0.001 มีวัดตัวอย่างทั้งหมดใน triplicate

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(lipoxygenase (LOX)
กิจกรรมกิจกรรมแซลมอนรมควันได้รับการวัดโดยใช้วิธีสเปกอย่างต่อเนื่องขึ้นอยู่กับว่าการแก้ไขโดยหลี่และคนอื่นๆ (2008). ร้อนนมถั่วเหลืองน้ำพื้นดินได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 16,000 ×กรัม 4 ◦Cเป็นเวลา 15 นาที; ใสเป็นน้ำมันดิบ สารสกัดจากเอนไซม์. ส่วนหนึ่งของสารสกัดจากเอนไซม์ถูกยกเลิกในอ่างน้ำที่ 100 ◦Cเป็นเวลา 20 นาทีตามด้วยการสลายตัวเต็มรูปแบบของ 1 ไมโครลิตรพื้นผิวสารละลายกรดไลโนเลอิก (99% บริสุทธิ์, เทียนจิน, จีน) 1 มิลลิลิตรเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ที่แน่นอนโดยกวน . ต่อจากนั้นกรด linoleic / แก้ปัญหาแอลกอฮอล์ถูกเจือจาง 100 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์ borate (pH 9 0.2M). แล้ว 2 มิลลิลิตรพื้นผิวสารละลายกรดไลโนเลอิกและ 0.96 มิลลิลิตร 0.2 M บัฟเฟอร์ borate ถูกย้ายไป cuvettes ควอทซ์ (Unic เครื่องมืออิงค์ เซี่ยงไฮ้, จีน) ผสมโดยผกผันและ equilibrated ที่ 25 ◦C. ต่อมา 0.04 มิลลิลิตรเจือจางสารสกัดเอนไซม์เพิ่มขึ้น cuvettes ผลึกและผสมทันทีโดยผกผัน. หลังจากการผสมเป็นเวลา 3 นาที, วัดการดูดกลืนแสงได้ทันทีที่ 234 นาโนเมตรโดย spectrophotometer (UV-2800 Unic Instruments Inc). เปล่าถูกจัดทำขึ้นมี 2 วิธีการแก้ปัญหาพื้นผิวมิลลิลิตร 0.96 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์ borate และ 0.04 มิลลิลิตรยกเลิกสารสกัดเอนไซม์. หนึ่งหน่วยของกิจกรรมแซลมอนรมควันถูกกำหนดเป็นการเปลี่ยนแปลงใน 0.001 หน่วยของการดูดกลืนแสง ต่อนาทีสารสกัดเอนไซม์ ตัวอย่างทั้งหมดอยู่ในวัดเพิ่มขึ้นสามเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( ภาค ( LOX ) กิจกรรม LOX กิจกรรม
วัดโดยใช้วิธีสอนที่ใช้ต่อเนื่อง ) ดัดแปลงโดย Li และผู้อื่น ( 2008 )

น้ำร้อน–พื้นดินนมถั่วเหลืองคือระดับที่ 16000 × g 4 ◦เป็นเวลา 15 นาที ; นำเอนไซม์ที่เป็นสารสกัด เป็นส่วนของเอนไซม์ที่สกัดได้ซึ่งในน้ำร้อน 100 ◦ C เป็นเวลา 20 นาทีตามมาด้วยการละลายเต็ม 1 μ L ( กรดไลโนเลอิ โซลูชั่น ( 99% บริสุทธิ์ , เทียนจิน , จีน ) กับ 1 มิลลิลิตรแอลกอฮอล์สัมบูรณ์โดยการกวน

ต่อมา , กรดไลโนเลอิเอธิลแอลกอฮอล์เจือจางสารละลาย / 100 ml กับบอเรตบัฟเฟอร์ pH 9 , 0.2m )

แล้ว 2 ml ( กรดไลโนเลอิและโซลูชั่นบอเรตบัฟเฟอร์ 0.2M 0.96 มลโอนคิวเวททควอทซ์ ( UNIC อุปกรณ์สำหรับ เซี่ยงไฮ้จีน ) , ผสมโดยการผกผันและ equilibrated 25 ◦ C .

ต่อมา 0.04 มล. เจือจางสารสกัดเอนไซม์ถูกเพิ่มไปยังคิวเวททควอตซ์และผสมได้ทันทีโดยการกลับกัน

หลังจากผสมนาน 3 นาที ค่าวัดทันทีที่ 234 nm โดย Spectrophotometer ( uv-2800 UNIC อุปกรณ์ , Inc . )

ว่างเตรียม 2 ml ( มิลลิลิตรบอเรตบัฟเฟอร์ โซลูชั่น , 0.96 และ 004 ml สารสกัดยับยั้งเอนไซม์ LOX

หนึ่งหน่วยของกิจกรรมเช่นการเปลี่ยนแปลงในระดับหน่วยของค่าต่อนาทีเอนไซม์สกัดเข้มข้น ตัวอย่างทั้งหมดจะถูกวัดทั้งสามใบ