Vitamin B1 and B2 analyses of breads were performed according to the method outlined by Arella et al. (1996) with minor modifications. The chromatographic unit consisted of an Agilent HPLC series 1200 (Agilent, Waldbronn, Germany) equipped with ChemStation software, a model G1322A degasser, a model G1311A quaternary pump, a model G1329 autosampler, a model G1316 column oven and a model G1321A fluorescence detector. For vitamin B1 analysis, 1 mL of sample extract was mixed with an alkaline solution of potassium ferricyanide (1 mL of 1% potassium ferricyanide solution and 24 mL of 3.75 M sodium hydroxide) to form fluorescent thiochrome. The content was vigorously shaken by hand, filtered through a 0.45 μm membrane filter into amber HPLC vials, and immediately injected. For naturally fluorescent vitamin B2 analysis, the sample extract was used directly after filtering through a 0.45 μm membrane filter. The same mobile and stationary phases were used for B1 and B2 analysis, while separate chromatographic runs were carried out for the determination of each vitamin. The mobile phase consisted of methanol and 0.05 M sodium acetate (30:70, v/v) and the separation was carried out with a Zorbax Eclipse C18 column (250 mm, 4.6 mm i.d. and 5 μm particle size) (Agilent, Waldbronn, Germany). An isocratic elution was performed with a flow rate of 1 mL/min. Column temperature was set at 40 °C and the injection volume was 20 μL for both B1 and B2 analysis. The fluorometric detector was operated at an excitation wavelength of 366 nm and at an emission wavelength of 435 nm for thiochrome and at an excitation wavelength of 422 nm and at an emission wavelength of 522 nm for B2.
วิตามิน B1 B2 และการวิเคราะห์ของขนมปังได้ดำเนินการตามวิธีการที่ระบุไว้โดย Arella et al, (1996) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย หน่วยโครมาประกอบไปด้วย Agilent HPLC ชุด 1200 (Agilent, Waldbronn, เยอรมนี) พร้อมกับซอฟแวร์ ChemStation ที่ดีแก๊สเซอร์รุ่น G1322A ปั๊มสี่รุ่น G1311A เป็น autosampler รุ่น G1329, เตาคอลัมน์รุ่น G1316 และรุ่น G1321A ตรวจจับการเรืองแสง สำหรับวิตามินวิเคราะห์ B1, 1 มิลลิลิตรของสารสกัดจากตัวอย่างผสมกับสารละลายด่างของโพแทสเซียม ferricyanide (1 มิลลิลิตรของสารละลาย 1% โพแทสเซียม ferricyanide และ 24 มล 3.75 M โซดาไฟ) ในรูปแบบ thiochrome เรืองแสง เนื้อหาเขย่าแรง ๆ ด้วยมือกรองผ่านตัวกรองเมมเบรน 0.45 ไมครอนลงในขวดสีเหลืองอำพัน HPLC และฉีดทันที สำหรับการวิเคราะห์วิตามินบี 2 เรืองแสงตามธรรมชาติ, สารสกัดจากกลุ่มตัวอย่างที่ใช้โดยตรงหลังจากที่กรองผ่านเยื่อกรอง 0.45 ไมโครเมตร เช่นเดียวกับขั้นตอนการเคลื่อนที่และถูกนำมาใช้สำหรับ B1 และ B2 วิเคราะห์ในขณะที่แยกต่างหากโครมาวิ่งได้ดำเนินการสำหรับการกำหนดของแต่ละวิตามิน เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยเมทานอลและ 0.05 M โซเดียมอะซิเตท (30:70, v / v) และการแยกได้ดำเนินการกับคอลัมน์ Zorbax คราส C18 (250 มิลลิเมตร 4.6 มิลลิเมตร ID และ 5 ไมครอนขนาดอนุภาค) (Agilent, Waldbronn, เยอรมนี) ชะ isocratic ได้ดำเนินการกับอัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที อุณหภูมิคอลัมน์ถูกกำหนดไว้ที่ 40 องศาเซลเซียสและปริมาณการฉีดเป็น 20 ไมโครลิตรสำหรับทั้งบี 1 บี 2 และการวิเคราะห์ เครื่องตรวจจับฟลูออโรเป็นผู้ดำเนินการในการกระตุ้นความยาวคลื่น 366 นาโนเมตรของและที่ความยาวคลื่นปล่อย 435 นาโนเมตรสำหรับ thiochrome และที่ความยาวคลื่นกระตุ้น 422 นาโนเมตรและที่ความยาวคลื่นปล่อย 522 นาโนเมตรสำหรับ B2
การแปล กรุณารอสักครู่..
วิตามิน B1 และ B2 และขนมปังมีการปฏิบัติตามวิธีการที่ระบุไว้โดย arella et al . ( 1996 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย หน่วย และประกอบด้วยด้าน HPLC ชุด 1200 ( Agilent , waldbronn , เยอรมนี ) พร้อมกับซอฟต์แวร์ chemstation , รูปแบบ g1322a degasser , รูปแบบ g1311a Quaternary ปั๊ม แบบ g1329 autosampler , เตาอบคอลัมน์รูปแบบและรูปแบบการ g1316 g1321a เครื่องตรวจจับ วิตามิน B1 สำหรับการวิเคราะห์ตัวอย่าง 1 มิลลิลิตร สารสกัดผสมกับสารละลายด่างของโพแทสเซียมเฟอร์ริกไซนาไนด์ ( 1 มิลลิลิตรของสารละลาย 1% โพแทสเซียมเฟอร์ริกไซนาไนด์และ 24 ml 3.75 M โซเดียมไฮดรอกไซด์ ) ในรูปแบบ thiochrome เรืองแสง . เนื้อหาแรงเขย่าด้วยมือ , กรองผ่านเยื่อกรองเป็น 0.45 μ M อำพัน 2 ขวด , และทันทีที่ฉีด เรืองแสงตามธรรมชาติวิตามิน B2 การวิเคราะห์ตัวอย่างสารสกัดถูกนำมาใช้โดยตรงหลังจากการกรองผ่านเยื่อกรองμ 0.45 เมตร . เหมือนมือถือและเครื่องเขียน ขั้นตอน สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ B1 และ B2 ขณะที่แยกโครมวิ่งทดลองสำหรับการกำหนดของแต่ละวิตามิน เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยเมทานอลและ 0.05 M โซเดียมอะซิเตต ( 30 : 70 , v / v ) และแยกข้อมูลกับ zorbax คราสคอลัมน์ C18 250 มม. 4.6 มม. และขนาดอนุภาคμบัตร 5 M ) ( Agilent , waldbronn , เยอรมัน ) การใช้ Isocratic แสดงด้วยอัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที อุณหภูมิตั้งไว้ที่ 40 องศา C คอลัมน์และปริมาณการฉีด 20 μ L ทั้ง B1 และ B2 . เครื่องตรวจจับ fluorometric ดำเนินการที่ความยาวคลื่น 340 nm และความตื่นเต้นในการปล่อยความยาวคลื่น 435 nm สำหรับ thiochrome ที่กระตุ้นและความยาวคลื่น 422 nm และในการปล่อยความยาวคลื่น 522 nm สำหรับ B2 .
การแปล กรุณารอสักครู่..