The retention of intact proteins un

The retention of intact proteins under gradient elution in hydrophobic interaction chromatography (HIC) was found to be governed by two variables, the steady region (SR) and the migration region (MR). In the SR, the proteins are immobilized by the strong interactions with the stationary phase such that the retention time is independent of the column length. In the MR, the proteins also interact with the stationary phase, but they move normally, thus the retention time depends on their partition coefficients and the column length. The SR can be used as an operation space (OP) for high-throughput protein analysis by 1D-LC using short columns at high flow rates to maintain a high resolution. The OP can also be employed for all assisted operations in online 2D-LC. Based on the steady region/migration region optimization strategy developed in this study, five successive complete separations of seven intact proteins were performed in a HIC cake in less than 5 min, and a crude extract of ribonuclease A from bovine pancreas was purified using online 2D-LC to 95.8% purity with 93.2% mass recovery in 45 min. This approach can be used to expedite the purification of drug-target proteins and should therefore be of interest to the pharmaceutical industry.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พบรักษาโปรตีนเหมือนเดิมภายใต้ elution ไล่ระดับสีในโต้ตอบ hydrophobic chromatography (ชไอ) จะถูกควบคุม โดยสองตัวแปร ภูมิภาค steady (SR) และภูมิภาคโยกย้าย (MR) ใน SR โปรตีนจะหา โดยการโต้ตอบที่แข็งแกร่งด้วยระยะเครื่องเขียนเช่นให้เวลารักษาขึ้นอยู่กับความยาวของคอลัมน์ ในนาย โปรตีนที่สามารถโต้ตอบกับระยะเครื่องเขียน แต่พวกเขาย้ายปกติ ดังนั้นเวลารักษาขึ้นอยู่กับสัมประสิทธิ์ของพาร์ติชันและความยาวของคอลัมน์ SR สามารถใช้เป็นพื้นที่ดำเนินการ (OP) สำหรับการวิเคราะห์โปรตีนสูงสามารถประมวลผลได้ โดยใช้คอลัมน์สั้น ๆ ที่อัตราไหลสูงเพื่อรักษาความละเอียดสูง LC 1D OP สามารถยังทำงานสำหรับการดำเนินการความช่วยเหลือทั้งหมดในออนไลน์ 2D-LC ตามกลยุทธ์การเพิ่มประสิทธิภาพภูมิภาคภูมิภาคโยกย้าย steady ที่พัฒนาในการศึกษานี้ 5 ประโยชน์สมบูรณ์ต่อเนื่องของโปรตีนเจ็ดเหมือนเดิมได้ทำเค้กชไอในน้อยกว่า 5 นาที และสารสกัดหยาบ ribonuclease A จากตับอ่อนของวัวที่บริสุทธิ์ด้วย 2D LC ออนไลน์เพื่อความบริสุทธิ์ 95.8% 93.2% กู้มวลใน 45 นาที วิธีการนี้สามารถใช้เพื่อเร่งการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนเป้าหมายยาเสพติด และดังนั้นจึงควรสนใจอุตสาหกรรมเภสัชกรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเก็บรักษาของโปรตีนเหมือนเดิมภายใต้ชะลาดในโคปฏิสัมพันธ์ชอบน้ำ ในอาร์โปรตีนที่มีการตรึงโดยการมีปฏิสัมพันธ์ที่ดีกับเฟสดังกล่าวว่าเวลาการเก็บรักษาความเป็นอิสระของความยาวคอลัมน์ ใน อาร์สามารถใช้เป็นพื้นที่ดำเนินการ สหกรณ์นอกจากนี้ยังสามารถใช้ในการดำเนินงานทั้งหมดในการช่วยเหลือออนไลน์ ขึ้นอยู่กับภูมิภาคท วิธีการนี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การคงอยู่ของโปรตีนที่ใช้ในการสมบูรณ์ภายใต้ ) ปฏิสัมพันธ์ chromatography ( HIC ) พบว่าถูกควบคุมโดยสองตัวแปรภูมิภาคคงที่ ( SR ) และการย้ายถิ่นในภูมิภาค ( MR ) ใน ส่วนโปรตีนจะถูกตรึงโดยปฏิสัมพันธ์ที่ดีกับเครื่องเขียน เช่น การเก็บรักษา ระยะเวลาเป็นอิสระของความยาวคอลัมน์ ในคุณโปรตีนมีปฏิกิริยากับเฟสอยู่กับที่ แต่พวกเขาย้ายปกติ ดังนั้นในเวลาขึ้นอยู่กับค่าสัมประสิทธิ์พาร์ทิชันและความยาวคอลัมน์ ส่วน SR สามารถใช้เป็นปฏิบัติการอวกาศ ( OP ) สำหรับการวิเคราะห์โปรตีนโดยการช่วย 1d-lc เสาสั้นที่อัตราการไหลสูงเพื่อรักษาความละเอียดสูงOP ยังสามารถใช้เพื่อช่วยในการ 2d-lc ออนไลน์ ตามภูมิภาค / การย้ายถิ่นฐานมั่นคงกลยุทธ์เพิ่มประสิทธิภาพเขตพัฒนาขึ้นในการศึกษานี้ ต่อเนื่องแยกเจ็ดโปรตีนครบถ้วนสมบูรณ์ได้ในเค้ก HIC ในเวลาน้อยกว่า 5 นาที และสารสกัดจากตับอ่อนของวัวไรโบนิวคลีเเป็นบริสุทธิ์ใช้ 2d-lc ออนไลน์เพื่อความบริสุทธิ์ คุณภาพ % 93การกู้คืนมวล 2% ใน 45 นาที วิธีการนี้สามารถใช้ในการเร่งผลิตของโปรตีนเป้าหมายยาจึงควรเป็นที่สนใจของอุตสาหกรรมยา