2.3. Enzyme hydrolysis.
Cellic CTec 2 cellulase blend was used for all enzymatic hydrolysis
studies and loads are quoted as FPU (Filter Paper Units)/g dry
material (DM). Generally, enzymatic hydrolysis of solid substrates
was performed in 50 mM citrate buffer pH 5.0 containing 0.02%
sodium azide with a substrate loading of 10% (w/v) and incubated
for up to 96 h at 50 C. To identity significant pretreatment variables
and interactive effects, enzymatic hydrolysis of pretreated
fibres were conducted under controlled isodosing conditions using
a fixed Cellic CTec 2 cellulase loading of 20 FPU/g DM. This cellulase
loading was selected based on results from preliminary experiments
in which CGT fibres pretreated under midpoint conditions
for temperature, time and acid concentration (as described in
Table 1) were subjected to an enzyme dose response using cellulase
loadings of 5.0, 12.5, 20 and 30 FPU/g DM. To evaluate maximum
glucose release, pretreated materials were subject to higher
enzyme dose response condition using Cellic CTec 2 cellulase
loading of 30, 40, 60 and 80 FPU/g DM. For enzymatic hydrolysis
of whole pretreated slurries (including both insoluble fibre and soluble
fractions), the entire slurry was adjusted to pH 5.0 with NaOH
prior to addition of 0.02% sodium azide and appropriately diluted
enzyme. No buffering agents were used in enzymatic hydrolysis
of whole pretreated slurries. Hydrolysates were sampled at time
points specified in the text, boiled for 10 min and centrifuged at
8000g for 5 min, syringe filtered with a 0.45 lm Minisart (Sartorius,
Germany) and stored at 20 C for further HPLC analysis.
2.3. เอนไซม์ไฮโตรไลซ์ผสม cellulase CTec 2 cellic ใช้สำหรับไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบทั้งหมดศึกษาและโหลดเสนอราคาเป็นแห้ง /g FPU (กระดาษกรองหน่วย)วัสดุ (DM) ทั่วไป ไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของพื้นผิวของแข็งมีดำเนินการใน 50 มม.ซิเตรตบัฟเฟอร์ pH 5.0 ประกอบด้วย 0.02%azide โซเดียมกับพื้นผิวโหลด 10% (w/v) และ incubatedสำหรับที่ราว 50 ถึง 96 h การระบุตัวแปร pretreatment สำคัญและลักษณะพิเศษแบบโต้ตอบ ไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของ pretreatedได้ดำเนินการอยู่ภายใต้เงื่อนไขการควบคุม isodosing ที่ใช้แบบถาวร Cellic CTec 2 cellulase โหลดของ FPU 20 g DM Cellulase นี้เลือกโหลดตามผลลัพธ์จากการทดลองเบื้องต้นCGT ใย pretreated ภายใต้เงื่อนไขที่จุดกึ่งกลางสำหรับอุณหภูมิ เวลา และกรดเข้มข้น (ตามที่อธิบายไว้ในตารางที่ 1) การตอบสนองยาเอนไซม์ cellulase ใช้ถูกต้องloadings ของ 5.0, 12.5, 20 และ 30 FPU/g DM การประเมินสูงสุดปล่อยกลูโคส pretreated วัสดุได้ขึ้นสูงเงื่อนไขการตอบสนองยาเอนไซม์ cellulase Cellic CTec 2 ใช้โหลด 30, 40, 60 และ 80 FPU/g DM สำหรับไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของทั้งหมด pretreated slurries (รวมทั้งเส้นใยที่ไม่ละลายน้ำ และละลายน้ำได้เศษส่วน), สารละลายทั้งหมดถูกปรับปรุงค่า pH 5.0 กับ NaOHก่อนเพิ่ม 0.02% โซเดียม azide และแตกออกอย่างเหมาะสมเอนไซม์ ตัวแทนไม่มีบัฟเฟอร์ที่ใช้ในไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของทั้งหมด pretreated slurries Hydrolysates มีตัวอย่างในเวลาpoints specified in the text, boiled for 10 min and centrifuged at8000g for 5 min, syringe filtered with a 0.45 lm Minisart (Sartorius,Germany) and stored at 20 C for further HPLC analysis.
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3. Enzyme hydrolysis.
Cellic CTec 2 cellulase blend was used for all enzymatic hydrolysis
studies and loads are quoted as FPU (Filter Paper Units)/g dry
material (DM). Generally, enzymatic hydrolysis of solid substrates
was performed in 50 mM citrate buffer pH 5.0 containing 0.02%
sodium azide with a substrate loading of 10% (w/v) and incubated
for up to 96 h at 50 C. To identity significant pretreatment variables
and interactive effects, enzymatic hydrolysis of pretreated
fibres were conducted under controlled isodosing conditions using
a fixed Cellic CTec 2 cellulase loading of 20 FPU/g DM. This cellulase
loading was selected based on results from preliminary experiments
in which CGT fibres pretreated under midpoint conditions
for temperature, time and acid concentration (as described in
Table 1) were subjected to an enzyme dose response using cellulase
loadings of 5.0, 12.5, 20 and 30 FPU/g DM. To evaluate maximum
glucose release, pretreated materials were subject to higher
enzyme dose response condition using Cellic CTec 2 cellulase
loading of 30, 40, 60 and 80 FPU/g DM. For enzymatic hydrolysis
of whole pretreated slurries (including both insoluble fibre and soluble
fractions), the entire slurry was adjusted to pH 5.0 with NaOH
prior to addition of 0.02% sodium azide and appropriately diluted
enzyme. No buffering agents were used in enzymatic hydrolysis
of whole pretreated slurries. Hydrolysates were sampled at time
points specified in the text, boiled for 10 min and centrifuged at
8000g for 5 min, syringe filtered with a 0.45 lm Minisart (Sartorius,
Germany) and stored at 20 C for further HPLC analysis.
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3 การย่อยสลายด้วยเอนไซม์เซลลูเลส ctec 2
cellic ผสมใช้สำหรับเอนไซม์
ศึกษาและโหลดจะยกมาเป็น FPU ( หน่วยกรองกระดาษ ) / g
วัสดุแห้ง ( DM ) โดยทั่วไปการย่อยเอนไซม์พื้นผิวแข็งของ
แสดงใน 50 มิลลิซิเตรทบัฟเฟอร์ pH 5.0 ที่มี 0.02 %
โซเดียมไซด์กับพื้นผิวโหลด 10% ( w / v ) และบ่ม
ถึง 96 ชั่วโมง 50 Cการระบุตัวแปรสําคัญ
และผลแบบโต้ตอบ , เอนไซม์ที่ผ่านการย่อยสลายของเส้นใยในการควบคุม isodosing
แก้ไขเงื่อนไขการใช้ cellic ctec 2 เซลลูเลส โหลด 20 FPU / g DM . นี้เป็นเอนไซม์
โหลดเลือกตามผลที่ได้จากการทดลองเบื้องต้นที่ CGT
สำหรับเส้นใยผ่านจุดกึ่งกลางเงื่อนไขภายใต้อุณหภูมิความเข้มข้นของกรดและเวลา ( ตามที่อธิบายไว้ใน
ตาราง 1 ) ภายใต้การใช้ปริมาณเอนไซม์เซลลูเลส
ภาระของ 5.0 , 15 , 20 และ 30 FPU / g DM . เพื่อประเมินการปล่อยกลูโคสสูงสุด
เรื่องผ่านวัสดุสูงกว่าปริมาณการตอบสนองเงื่อนไขการใช้เอนไซม์ cellic ctec 2 เซลลูเลส
โหลด 30 , 40 , 60 และ 80 FPU / g DM . สำหรับเอนไซม์
ของทั้งหมดที่ได้รับ slurries ( รวมทั้งเส้นใยที่ไม่ละลายน้ำและเศษส่วนละลาย
) , เสียทั้งค่า pH 5.0 กับ NaOH
ก่อนเพิ่ม 0.02% โซเดียมไซด์และเหมาะสมเจือจาง
เอนไซม์ ไม่มีสารบัฟเฟอร์ถูกใช้ในการย่อยด้วยเอนไซม์ของทั้งหมดที่ได้รับ slurries
. จำนวนของเวลาที่
จุดที่ระบุไว้ในข้อความ ต้มนาน 10 นาที และระดับที่
8000g เป็นเวลา 5 นาที เข็มกรองด้วย 0.45 LM minisart ( Sartorius ,
เยอรมนี ) และเก็บรักษาที่ 20 C สำหรับการวิเคราะห์ HPLC ต่อไป
การแปล กรุณารอสักครู่..