2.7.3.1. Alternative complement act

2.7.3.1. Alternative complement activity. Alternative
complement activity was assayed following the
procedure of Yano (1992) based on the hemolysis of
rabbit red blood cells (RaRBC) as described earlier
(Amar et al., 2000) and briefly mentioned below. The
RaRBC were washed three times in ethylene glycol
tetraacetic acid–magnesium–gelatin veronal buffer
(0.01 M EGTA–Mg–GVB, pH 7, prepared as
described by Yano, 1992) and the cell numbers were
adjusted to 2108 cells in the same buffer. At first, the
100% lysis value was obtained by exposing 100 Al of
the above RaRBC stock to 3.4-ml distilled water. The
hemolysate was centrifuged and the optical density
(O.D.) of the supernatant was determined at 414 nm
using a spectrophotometer (DU 640, Beckmann
Instruments, CA, USA). Following this, the test sera
were diluted (100), different volumes ranging from
100 to 250 Al (total volume was adjusted to 250 Al
with the buffer) was allowed to react with 100 Al of
RaRBC in small test tubes. This mixture was
incubated at 20 8C for 90 min with intermittent
mixing, following which 3.15 ml of 0.85% NaCl
solution was added and the tubes were centrifuged
and the O.D. of the supernatant was measured as
mentioned above. A lysis curve was obtained by
plotting the percentage of haemolysis against the
volume of serum added on a log–log graph. The
volume yielding 50% haemolysis was used for
determining the complement activity of the sample
as follows:

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7.3.1. กิจกรรมเสริมอื่น ทางเลือกกิจกรรมเสริมที่ assayed ต่อขั้นตอนของ Yano (1992) ตาม hemolysis ของเซลล์เม็ดเลือดแดงของกระต่าย (RaRBC) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(อมาร์ et al., 2000) และกล่าวถึงโดยย่อข้างล่าง ที่RaRBC ถูกล้างสามครั้งในเอทิลีนเอทิtetraacetic บัฟเฟอร์กรด – แมกนีเซียม – ตุ๋น veronal(0.01 M EGTA – มก. – GVB, pH 7 เตรียมไว้เป็นอธิบาย โดย Yano, 1992) และหมายเลขของเซลล์ปรับปรุงเซลล์ 2 108 ในบัฟเฟอร์ที่เดียวกัน ครั้งแรก การค่า lysis 100% ได้รับ โดยเปิดเผยอัล 100 ของหุ้น RaRBC ข้างต้นไป 3.4 ml กลั่นน้ำ ที่hemolysate ถูก centrifuged และความหนาแน่นออปติคอล(O.D.) ของ supernatant ที่กำหนดที่ 414 nmโดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่าง (ดู 640, Beckmannเครื่องมือ CA สหรัฐอเมริกา) นี้ จะทดสอบต่อไปนี้ได้แตกออก (100), ปริมาณที่แตกต่างกันตั้งแต่(ปริมาตรรวมถูกปรับ 250 อัลอัล 100-250มีบัฟเฟอร์) ได้รับอนุญาตให้ตอบสนองกับอัล 100 ของRaRBC ในหลอดทดสอบขนาดเล็ก ส่วนผสมนี้ได้incubated ที่ 20 8C ใน 90 นาทีกับไม่ต่อเนื่องผสม ต่อ ml ที่ 3.15 0.85% NaClเข้ามาแก้ปัญหา และมี centrifuged หลอดและ O.D. ของ supernatant ถูกวัดเป็นดังกล่าวข้างต้น เส้นโค้ง lysis กล่าวโดยเปอร์เซ็นต์ของ haemolysis กับพล็อตปริมาณของเซรั่มเพิ่มบนกราฟล็อกล็อก ที่ใช้สำหรับปริมาณผลผลิต 50% haemolysisกำหนดกิจกรรมเสริมของตัวอย่างดังนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7.3.1 กิจกรรมเสริมทางเลือก ทางเลือกกิจกรรมที่สมบูรณ์ได้รับการวิเคราะห์ต่อไปนี้ขั้นตอนของการYano (1992) ตามภาวะเม็ดเลือดแดงแตกของกระต่ายเซลล์เม็ดเลือดแดง(RaRBC) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(Amar et al., 2000) และพูดสั้น ๆ ด้านล่าง RaRBC ถูกล้างสามครั้งในเอทิลีนไกลคอลtetraacetic กรดแมกนีเซียมเจลาตินบัฟเฟอร์ veronal (0.01 M EGTA-Mg-GVB ค่า pH 7 เตรียมเป็นอธิบายโดยYano, 1992) และหมายเลขโทรศัพท์เป็นกลุ่มปรับให้2? 108 เซลล์ใน บัฟเฟอร์เดียวกัน ตอนแรกมูลค่าสลาย 100% ที่ได้รับการเปิดเผยโดยอัล 100 ของหุ้นดังกล่าวข้างต้นจะRaRBC 3.4 มล. น้ำกลั่น hemolysate ถูกหมุนเหวี่ยงและความหนาแน่นของแสง(OD) ของสารละลายถูกกำหนดที่ 414 นาโนเมตรโดยใช้สเปก(DU 640 Beckmann เครื่องมือ, CA, USA) ต่อไปนี้การทดสอบซีรั่มถูกเจือจาง (100) ปริมาณที่แตกต่างกันตั้งแต่ 100 ถึง 250 อัล (ปริมาณรวมมีการปรับถึง 250 อัลมีบัฟเฟอร์) ได้รับอนุญาตให้ทำปฏิกิริยากับอัล 100 ของRaRBC ในหลอดทดลองขนาดเล็ก ส่วนผสมนี้ได้รับการบ่มที่ 20 8C 90 นาทีต่อเนื่องผสมตามที่3.15 มล. ของโซเดียมคลอไรด์ 0.85% วิธีการแก้ปัญหาถูกบันทึกและท่อที่ถูกปั่นและ OD ของสารละลายที่ถูกวัดดังกล่าวข้างต้น เส้นโค้งสลายได้มาจากการพล็อตร้อยละของเม็ดเลือดแตกเทียบกับปริมาณของซีรั่มเพิ่มเป็นกราฟเข้าสู่ระบบเข้าสู่ระบบ ปริมาณผลผลิต 50% เม็ดเลือดแตกที่ใช้สำหรับการกำหนดกิจกรรมเสริมของตัวอย่างดังต่อไปนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7.3.1 . กิจกรรมเสริมทางเลือก กิจกรรมเสริมทางเลือก
ซีรั่มต่อไปนี้
ขั้นตอนของยาโนะ ( 1992 ) ขึ้นอยู่กับระดับของ
กระต่ายเซลล์เม็ดเลือดแดง ( rarbc ) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
( Amar et al . , 2000 ) และสั้น ๆที่กล่าวถึงด้านล่าง
rarbc ได้ซักสามครั้งใน tetraacetic แมกนีเซียมเอทิลีนไกลคอล
กรด––เจลาติน veronal บัฟเฟอร์ 0.01 m )
( หน่วยมิลลิกรัม ) gvb pH 7 เตรียมเป็น
บรรยายโดย ยาโนะ , 1992 ) และเซลล์ตัวเลขถูก
ปรับ 2  108 เซลล์ในบัฟเฟอร์เดียวกัน ตอนแรก
100% ค่าเสื่อมได้เปิดเผย 100 ล ของหุ้น rarbc
ข้างบน 3.4-ml น้ำกลั่น
ินเป็นระดับและความหนาแน่นของแสง
( OD ) และน่านตั้งใจที่ 414 nm
โดยใช้ Spectrophotometer ( ดู 640 , เบ็คมันน์
เครื่องมือ , CA , USA ) ตามนี้วัดเซรา
ลด (  100 ) , ปริมาณที่แตกต่างกันตั้งแต่
100 250 ล ( ปริมาณรวมปรับ 250 ล
กับบัฟเฟอร์ ) ได้รับอนุญาตให้ตอบสนองกับ 100 ล ของ
rarbc ในหลอดทดลองขนาดเล็ก ส่วนผสมนี้
บ่มที่อุณหภูมิ 20 8C 90 นาที
ผสมเป็นพักๆ ต่อไปนี้ที่ 3.15 มิลลิลิตรของสารละลาย NaCl
0.85 % เพิ่มและท่อ คือที่ระดับ
และ ODและน่านวัดเป็น
ดังกล่าวข้างต้น เป็นเส้นโค้งได้ โดยการสลาย
วางแผนร้อยละของ haemolysis กับ
ปริมาณเซรั่มเพิ่มในบันทึกและบันทึกกราฟ
ปริมาณผลผลิต 50 % haemolysis ใช้
กำหนดกว่ากิจกรรมของตัวอย่าง
ดังนี้