Fluorescence microscopy. Roots and

Fluorescence microscopy. Roots and aerial fresh tissues were cut and
immediately observed with visible light and fluorescence microscopy
(Axiophot II; Zeiss, Germany) under a green (fluorescein isothiocyanate
[FITC], 510 nm) fluorescence filter. Both images were combined, using
the overlay module in the MetaVue program (Universal Imaging Corporation),
to identify the bacterial cells.
SEM. Plant tissues were cut (approximately 2 cm2), fixed in buffered
Karnovsky solution (2% glutaraldehyde, 0.001 M CaCl2, 2.5% paraformaldehyde)
at 4°C, and rinsed three times (10 min for each rinsing)
with a 0.05 M cacodylate buffer at pH 7.2. The samples were infiltrated
with a 30% glycerol solution for 30 min and treated with an osmium
tetroxide solution in a1%cacodylate buffer for 2 h. The samples were then
washed three times in distilled water, dehydrated with acetone (in a series
of 30, 50, 70, 90, and 100% acetone dilutions), dried to the critical point
using a dryer (CPD 030; Balzers), mounted on aluminum stubs, and
coated with gold (MED 010; Balzers). The metal-coated samples were
examined using SEM (Leo; Zeiss).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Fluorescence microscopy การ ตัดรากและเนื้อเยื่อสดทางอากาศ และสังเกตทันที ด้วยมองเห็นแสงและ fluorescence microscopy(Axiophot II Zeiss เยอรมนี) ภายใต้สีเขียว (fluorescein isothiocyanate[FITC], 510 nm) fluorescence กรอง ภาพทั้งสองถูกรวมเข้าด้วยกัน ใช้โมซ้อนทับในโปรแกรม MetaVue (สากลภาพ บริษัท),เมื่อต้องการระบุเซลล์แบคทีเรียเนื้อเยื่อพืช SEM. ถูกตัด (ประมาณ 2 cm2), ถาวรใน bufferedKarnovsky โซลูชั่น (2% glutaraldehyde, 0.001 M CaCl2, paraformaldehyde 2.5%)ที่ 4° C และ rinsed สามครั้ง (10 นาทีสำหรับการล้างแต่ละ)ด้วยเป็น 0.05 M cacodylate บัฟเฟอร์ที่ pH 7.2 ตัวอย่างที่ถูกแทรกซึมด้วยโซลูชั่นกลีเซอร 30% ใน 30 นาที และรับการออสเมียมโซลูชั่นเทโตรไซด์ในบัฟเฟอร์ cacodylate % a1 สำหรับ 2 h ตัวอย่างดีแล้วล้างสามครั้งในน้ำกลั่น อบแห้ง ด้วยอะซีโตน (ในชุดของ 30, 50, 70, 90 และ 100% อะซิโตน dilutions), แห้งไปยังจุดสำคัญใช้เครื่องเป่า (CPD 030 Balzers), ติดตั้งบนสตับอลูมิเนียม และเคลือบ ด้วยทอง (MED 010 Balzers) ตัวอย่างโลหะเคลือบได้ตรวจสอบการใช้ SEM (ลีโอ Zeiss)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง รากและเนื้อเยื่อสดทางอากาศถูกตัดและ
สังเกตได้ทันทีด้วยแสงที่มองเห็นและใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง
(Axiophot II; Zeiss, เยอรมนี) ภายใต้สีเขียว (fluorescein isothiocyanate
[FITC], 510 นาโนเมตร) กรองเรืองแสง ภาพทั้งสองมารวมกันโดยใช้
โมดูลซ้อนทับในโปรแกรม MetaVue (ยูนิเวอร์แซ Imaging คอร์ปอเรชั่น)
เพื่อระบุเซลล์แบคทีเรีย.
SEM เนื้อเยื่อพืชถูกตัด (ประมาณ 2 cm2), การแก้ไขในบัฟเฟอร์
แก้ปัญหา Karnovsky (glutaraldehyde 2%, 0.001 M CaCl2 2.5% paraformaldehyde)
ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสและล้างสามครั้ง (10 นาทีสำหรับการล้างแต่ละครั้ง)
กับ 0.05 M บัฟเฟอร์ cacodylate ที่พีเอช 7.2 ตัวอย่างที่ถูกแทรกซึม
ด้วยโซลูชั่นกลีเซอรีน 30% เป็นเวลา 30 นาทีและรับการรักษาด้วยออสเมียม
tetroxide วิธีการแก้ปัญหาในบัฟเฟอร์ a1% cacodylate เป็นเวลา 2 ชั่วโมง ตัวอย่างแล้ว
ล้างสามครั้งในน้ำกลั่นแห้งด้วยอะซิโตน (ในชุด
ที่ 30, 50, 70, 90, และ 100% เจือจางอะซิโตน) แห้งไปยังจุดที่สำคัญ
โดยใช้เครื่องเป่า (CPD 030; Balzers) ติดตั้ง บนต้นขั้วอลูมิเนียมและ
เคลือบด้วยทอง (MED 010; Balzers) ตัวอย่างโลหะเคลือบได้รับ
การตรวจสอบโดยใช้ SEM (สิงห์; Zeiss)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงด้วย รากและเนื้อเยื่อสดทางอากาศที่ถูกตัดและ
ทันทีสังเกตด้วยแสงที่มองเห็นและกล้องจุลทรรศน์
( axiophot 2 Zeiss เยอรมนี ) ภายใต้สีเขียว ( ี่ไอโซไธโอไซยาเนต
[ ] fitc 510 nm ) กรองเรืองแสงด้วย ภาพที่ทั้งสองร่วมโดยใช้
ซ้อนทับ โมดูลในโปรแกรม metavue ( Universal Imaging บริษัท ) เพื่อระบุเซลล์แบคทีเรีย
.
SEMเนื้อเยื่อพืชถูกตัด ( ประมาณ 2 ตร. ซม. ) , การแก้ไขในนี้
karnovsky โซลูชั่น ( 2 % glutaraldehyde 0.001 m CaCl2 2.5 % พาราฟอร์มาลดิไฮด์ )
4 ° C และล้าง 3 ครั้ง ( 10 นาทีสำหรับแต่ละล้าง )
กับ 0.05 M จากนั้นนำ buffer pH 7.2 . จำนวนแทรกซึม
ด้วยสารละลายกลีเซอรอล 30 % เป็นเวลา 30 นาที และปฏิบัติกับออสเมียม tetroxide ทางออก A1
% จากนั้นนำเฟอร์เป็นเวลา 2 ชั่วโมงจำนวนครั้งที่สามแล้ว
ล้างในน้ำกลั่นแห้งด้วยอะซีโตน ( ในชุด
30 , 50 , 70 , 90 และ 100 % วิธีการอะซิโตน ) แห้งถึงจุดวิกฤติ
ใช้เครื่องเป่า ( CPD 030 ; บัลเซอร์ ) , ติดบนตออลูมิเนียม และเคลือบด้วยทอง ( Med
010 ; บัลเซอร์ ) โลหะเคลือบจำนวน
ตรวจสอบการใช้ SEM ( สิงห์ ; Zeiss )