InstrumentationLiquid chromatograph

Instrumentation
Liquid chromatography (LC)
Liquid chromatography (LC) was performed using an Agilent 1200 Series LC system equipped with binary pumps, degasser, and a thermostated autosampler maintained at 4°C. The antidepressants were separated on a Kinetex® XB-C18 column (100 mm × 2.10 mm, 1.7 μm) using a binary gradient made of (A) ammonium bicarbonate (5 mM) pH 7.8, and (B) acetonitrile at a flow rate of 400 μL/min. The volume of injection was 15 μL for influent, effluent, and sludge extracts. The gradient used was (%B): 0 min (10%), 6 min (80%), 10 min (80%), 12 min (90%), 14 min (10%), and 16 min (10%). An equilibration time of 4 min was used resulting in a total run time of 20 min. The column temperature was maintained at 40°C.

Tandem-mass spectrometry (QqQMS, QqToFMS)
For quantitative analysis, the LC system was coupled to a 6410 triple quadrupole mass spectrometer (QqQMS) manufactured by Agilent Technologies (Santa Clara, CA, USA) equipped with an electrospray ionization (ESI) source. The capillary was maintained at 4000 V, and the cone voltage was optimized for each compound in the positive-ion mode (ESI+). Additional detector parameters were held constant for all antidepressants: gas temperature 325°C; gas flow 10 L/min; nebulizer 35 psi and dwell time 50 ms. For qualitative by-products analysis, a 6530 quadrupole time-of-flight mass spectrometer (QqToFMS) also manufactured by Agilent Technologies, was utilized. The QqToFMS was equipped with a thermal gradient focusing ESI source (Jet Stream technology). Source parameters consisted of the following: gas temperature 325°C; sheath gas temperature 350°C; sheath gas flow 11 L/min; drying gas flow 5 L/min; nebulizer 35 psig, fragmentor 100 V and capillary voltage 4000 V. The QqToFMS was operated in the 4 GHz High Resolution mode with a low mass range (1700 m/z). Purine (121.050873 m/z) and Hexakis (922.009798 m/z) were used as internal reference masses to improve mass accuracy. Initial tests were performed on treated effluent extracts in high resolution tandem MS mode using a mass range of m/z 100–400 (specific collision energy: 0 V) at a rate of 5 spectra/s to screen the exact [M+H]+ masses of the precursor ions. Identified compounds were then fragmented with different specific collision energies varying between 0 and 10 V. For both detection systems, the MassHunter software from Agilent Technologies was used for data acquisition and processing. Optimized parameters for QqQMS are listed in a table (Additional file 1).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใช้เครื่องมือ
เหลว chromatography (LC)
ทำเหลว chromatography (LC) โดยใช้เป็นระบบ LC Agilent 1200 ชุดพร้อมปั๊มไบนารี degasser และ autosampler thermostated ที่เก็บที่ 4 องศาเซลเซียส Antidepressants ที่ถูกแยกจากกันในคอลัมน์ Kinetex ® XB-C18 (μm 100 มม. × 2.10 mm, 1.7) ใช้การไล่ระดับสีแบบไบนารีของแอมโมเนียมไบคาร์บอเนต (5 mM) (ก) ค่า pH 7.8 และ (B) acetonitrile ที่อัตราการไหล μL 400 นาที ปริมาณการฉีด μL 15 influent น้ำ และสารสกัดจากตะกอนได้ ระดับสีที่ใช้ได้ (%B): 0 นาที (10%), 6 นาที (80%), 10 นาที (80%), 12 นาที (90%), 14 นาที (10%), และ 16 นาที (10%) มีเวลา equilibration 4 นาทีใช้ในทั้งหมดใช้เวลา 20 นาที อุณหภูมิคอลัมน์ถูกรักษาไว้ที่ 40° C

Spectrometry มวลตัวตามกันไป (QqQMS, QqToFMS)
สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณ ระบบ LC ถูกควบคู่ไปเป็นทริ quadrupole 6410 โดยรวมสเปกโตรมิเตอร์ (QqQMS) ผลิต โดยเทคโนโลยี Agilent (ซานตาคลารา CA, USA) พร้อมกับแหล่ง ionization (ESI) วิธีพ่นละอองไฟฟ้า แรงถูกรักษาไว้ที่ 4000 V และแรงดันไฟฟ้ากรวยถูกทำให้เหมาะสำหรับแต่ละสารประกอบในโหมดไอออนบวก (ESI) พารามิเตอร์เพิ่มเติมจับถือได้ว่าค่าคงที่สำหรับทั้งหมด antidepressants: แก๊สอุณหภูมิ 325 องศา C แก๊สไหล 10 L/min ฝอยละออง 35 psi และอาศัยอยู่เวลา 50 นางสาวสำหรับการวิเคราะห์เชิงคุณภาพสินค้าพลอย 6530 quadrupole เวลาของเที่ยวบินโดยรวมสเปกโตรมิเตอร์ (QqToFMS) นอกจากนี้ยัง ผลิต โดยเทคโนโลยี Agilent มีใช้ QqToFMS มีพร้อมกับไล่ความร้อนเน้นแหล่ง ESI (Jet กระแสเทคโนโลยี) พารามิเตอร์แหล่งประกอบด้วยต่อไปนี้: แก๊สอุณหภูมิ 325 องศา C sheath แก๊สอุณหภูมิ 350° C sheath แก๊สไหล 11 L/min การอบแก๊สไหล 5 L/min ฝอยละออง 35 psig, fragmentor 100 V และแรงดันรูพรุน 4000 V QqToFMS ได้ดำเนินการในโหมดความละเอียดสูง GHz 4 ช่วงโดยรวมต่ำสุด (1700 m/z) Purine (121.050873 m/z) และ Hexakis (922.009798 m/z) ใช้เป็นการอ้างอิงภายในฝูงปรับปรุงความแม่นยำโดยรวม ได้ดำเนินการทดสอบเริ่มต้นบนแยกบำบัดน้ำทิ้งในโหมด MS ตัวตามกันไปความละเอียดสูงโดยใช้ช่วงมวล m/z 100 – 400 (ชนเฉพาะพลังงาน: 0 V) ในอัตราแรมสเป็คตรา 5 s เพื่อมวลชน [M H] แน่นอนของประจุสารตั้งต้นของหน้าจอ ระบุสารถูกแล้วกระจัดกระจาย ด้วยพลังงานชนแตกต่างกันเฉพาะที่แตกต่างกันระหว่าง 0 ถึง 10 V สำหรับทั้งสองระบบ ซอฟต์แวร์ MassHunter จาก Agilent เทคโนโลยีถูกใช้สำหรับข้อมูลการประมวลผล พารามิเตอร์ให้เหมาะสำหรับ QqQMS อยู่ในตาราง (เพิ่มเติมแฟ้ม 1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัด
โคเหลว (LC)
โคเหลว (LC) ได้รับการดำเนินการโดยใช้ระบบชุด LC Agilent 1200 การติดตั้งเครื่องสูบน้ำไบนารี degasser และอัตโนมัติสามารถ thermostated ไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส ซึมเศร้าถูกแยกออกในคอลัมน์Kinetex® XB-C18 (100 มม× 2.10 มม, 1.7 ไมครอน) โดยใช้การไล่ระดับสีที่ทำจากไบนารี (A) ไบคาร์บอเนตแอมโมเนียม (5 มิลลิ) ค่า pH 7.8 และ (B) acetonitrile ที่อัตราการไหลของ 400 ไมโครลิตร / นาที ปริมาณการฉีด 15 ไมโครลิตรสำหรับสารสกัดจากอิทธิพลน้ำทิ้งและกากตะกอน การไล่ระดับสีที่ใช้เป็น (% B): 0 นาที (10%), 6 นาที (80%), 10 นาที (80%), 12 นาที (90%), 14 นาที (10%), และ 16 นาที (10% ) เวลาสมดุล 4 นาทีถูกนำมาใช้มีผลในเวลาทำงานรวม 20 นาที อุณหภูมิคอลัมน์นี้ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 40 ° C spectrometry ตีคู่มวล (QqQMS, QqToFMS) สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณระบบ LC เป็นคู่ที่สาม 6410 สเปกโตรมิเตอร์มวล quadrupole (QqQMS) ผลิตโดย Agilent Technologies (Santa Clara, CA, USA) พร้อมกับ electrospray ไอออนไนซ์ (ESI) แหล่งที่มา เส้นเลือดฝอยที่ได้รับการเก็บรักษาไว้ที่ 4000 V และแรงดันไฟฟ้ารูปกรวยที่ถูกปรับให้เหมาะสมกับสารประกอบในโหมดบวกไอออนแต่ละ (ESI +) พารามิเตอร์เครื่องตรวจจับเพิ่มเติมได้จัดขึ้นอย่างต่อเนื่องสำหรับอาการซึมเศร้าทุกอุณหภูมิก๊าซ 325 ° C; การไหลของก๊าซ 10 ลิตร / นาที; nebulizer 35 psi และอาศัยเวลา 50 มิลลิวินาที สำหรับการวิเคราะห์เชิงคุณภาพโดยผลิตภัณฑ์มวลสเปกโตรมิเตอร์ 6530 quadrupole เวลาของเที่ยวบิน (QqToFMS) นอกจากนี้ยังผลิตโดย Agilent Technologies, ถูกนำมาใช้ QqToFMS พร้อมกับการไล่ระดับความร้อนที่เน้นแหล่งที่มาของ ESI (เจ็ทสตรีมเทคโนโลยี) พารามิเตอร์ที่มาประกอบด้วยอุณหภูมิก๊าซ 325 ° C; อุณหภูมิก๊าซฝัก 350 ° C; การไหลของก๊าซฝัก 11 ลิตร / นาที; การไหลของก๊าซแห้ง 5 ลิตร / นาที; nebulizer 35 psig, fragmentor 100 V และแรงดันเส้นเลือดฝอย 4000 V. QqToFMS ได้รับการดำเนินการใน 4 GHz โหมดความละเอียดสูงที่มีช่วงมวลต่ำ (1,700 เมตร / Z) พิวรีน (121.050873 เมตร / Z) และ Hexakis (922.009798 เมตร / Z) ถูกนำมาใช้เป็นฝูงอ้างอิงภายในเพื่อปรับปรุงความแม่นยำมวล การทดสอบครั้งแรกได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับสารสกัดจากน้ำทิ้งได้รับการรักษาควบคู่ความละเอียดสูงโหมด MS ใช้ช่วงมวลของม / ซี 100-400 (พลังงานชนที่เฉพาะเจาะจง: 0 V) ในอัตรา 5 สเปกตรัม / วินาทีไปยังหน้าจอ [M + H] ที่แน่นอน + มวลของไอออนปูชนียบุคคล สารประกอบระบุถูกซีกแล้วด้วยพลังงานที่แตกต่างกันการปะทะกันที่เฉพาะเจาะจงแตกต่างกันระหว่าง 0 และ 10 V. ทั้งระบบการตรวจสอบซอฟแวร์ MassHunter จาก Agilent Technologies ถูกนำมาใช้สำหรับการเก็บข้อมูลและการประมวลผล พารามิเตอร์เหมาะสำหรับ QqQMS มีการระบุไว้ในตาราง (ไฟล์เพิ่มเติม 1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เครื่องมือวัด ( LC )

วิธีโครมาโทกราฟีของเหลว Liquid Chromatography ( LC ) คือการใช้เลนต์ 1200 ชุด lc ระบบติดตั้งปั๊ม degasser ไบนารี และ thermostated autosampler รักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา antidepressants แยกกันใน kinetex ® xb-c18 คอลัมน์ ( 100 มม. × 2.10 มิลลิเมตร , 1.7 μ M ) ใช้ไบนารี ลาดา ( ก ) แอมโมเนียมไบคาร์บอเนต ( 5 มม. ) pH 7.8 ,และ ( ข ) ไนที่อัตราการไหลของμ 400 ลิตร / นาที ปริมาณที่ฉีด 15 μลิตร สำหรับระบบน้ำทิ้งและตะกอน , สารสกัด การไล่ระดับสีใช้เป็น ( % B ) : 0 นาที ( 10% ) , 6 นาที ( 80% ) 10 นาที ( 80% ) , 12 นาที ( 90% ) , 14 นาที ( 10% ) , และ 16 นาที ( 10 % ) การ equilibration เวลา 4 นาที ใช้ผลในเวลาเรียกใช้ทั้งหมด 20 นาที คอลัมน์อุณหภูมิไว้ที่ 40 ° C .

ตีคู่มวลสาร ( qqqms qqtofms
, ) สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณ , ระบบ LC อยู่คู่กับ 6410 สามสี่ขั้วแมสสเปกโตรมิเตอร์ ( qqqms ) ผลิตโดย Agilent Technologies ( Santa Clara , CA , USA ) พร้อมกับวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ( ESI ) อิออนแหล่งที่มา เส้นเลือดฝอยไว้ที่ 4 , 000 V และกรวยแรงดันก็เหมาะสำหรับแต่ละสารประกอบในโหมดอิออนบวก ( ESI )พารามิเตอร์เครื่องเพิ่มเติมได้ถูกจัดขึ้นอย่างต่อเนื่องสำหรับ antidepressants : ก๊าซอุณหภูมิ 325 องศา C ; อัตราการไหลของแก๊สลิตร / นาที 10 ; nebulizer 35 PSI และอาศัยเวลา 50 คุณวิเคราะห์คุณภาพผลิตภัณฑ์ , 6530 คำครั้ง - ของ - เครื่องแมสสเปกโทรมิเตอร์ ( qqtofms ) ผลิตโดย Agilent เทคโนโลยี คือใช้การ qqtofms เป็นพร้อมกับร้อนไล่ระดับเน้นแหล่ง ESI ( เทคโนโลยีสตรีมเจ็ท ) พารามิเตอร์แหล่งประกอบด้วยต่อไปนี้ : ก๊าซอุณหภูมิ 325 องศา C ; ปลอกแก๊สอุณหภูมิ 350 องศา C ; ปลอกแก๊สไหล 11 ลิตร / นาที ; อัตราการไหลของแก๊ส 5 ลิตร / นาที การอบแห้ง ; nebulizer 35 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว fragmentor 100 V และหลอดเลือดฝอยแรงดัน 4000 โวลต์การ qqtofms ดำเนินการใน 4 GHz ความละเอียดสูงโหมดกับช่วงมวลสารน้อย ( 1700   M / Z ) พิวรีน ( 121.050873   M / Z ) และ hexakis ( 922.009798   M / Z ) ถูกใช้เป็นมวลมวลอ้างอิงภายในเพื่อปรับปรุงความถูกต้อง การทดสอบเริ่มต้นการรักษาน้ำสารสกัดในโหมดความละเอียดสูงตีคู่นางสาวใช้ช่วงมวลของ M / Z 100 – 400 ( พลังงานการชนที่เฉพาะเจาะจง :0 V ) ในอัตรา 5 Spectra / S หน้าจอแน่นอน [ M ] มวลของสารไอออน ระบุสารประกอบแล้วแยกส่วนที่มีเฉพาะการชนพลังงานแตกต่างกันระหว่าง 0 และ 10 โวลต์ ทั้งการตรวจสอบระบบ masshunter ซอฟต์แวร์จาก Agilent เทคโนโลยีที่ใช้สำหรับการเก็บข้อมูลและการประมวลผล ปรับพารามิเตอร์สำหรับ qqqms อยู่ในตารางแฟ้ม ( เพิ่มเติม 1 )