For example, in this รูปลักษณะ, the treated water F that is
discharged from the concentration apparatus 24 does not necessarily have a
30 lower TOC concentration than the ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น, due to the
อาหารเพาะเลี้ยง containing the sugar or the various ingredients other than the
ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น. The วิธีเพาะเลี้ยงไมโครแอลจี of the การประดิษฐ์นี้ is intended to include the case where the treated water F has a higher TOC concentration than the ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น.
[0071]
5 Further, in this รูปลักษณะ, specific examples of the algal biomass D
are shown. The cases of using the grown ไมโครแอลจี for applications other than the aforementioned examples also fall within the range intended by the การประดิษฐ์นี้.
Further, a technical matter that is conventionally known in ไมโครแอลจี 10 culture methods and wastewater treatment methods can be employed, even if
the matter is not specifically described above, as long as the effects of the
การประดิษฐ์นี้ are not impaired.
That is, the การประดิษฐ์นี้ is not limited to the above described
รูปลักษณะs, and the design can be appropriately modified within the scope 15 intended by the การประดิษฐ์นี้. The operational advantage of the present
การประดิษฐ์ is also not limited to the foregoing รูปลักษณะs.
The รูปลักษณะs disclosed herein should be construed in all respects
as illustrative but not limiting. The scope of the การประดิษฐ์นี้ is not
indicated by the foregoing description but by the scope of the ข้อถือสิทธิ. The 20 scope of the การประดิษฐ์นี้ is intended to include all the modifications
equivalent in the sense and the scope to the scope of the ข้อถือสิทธิ.
EXAMPLES
[0072]
25 Next, the การประดิษฐ์นี้ is described further in detail by way of
examples. However, the การประดิษฐ์นี้ is not limited to these examples. [0073]
Experimental Example 1 Seed algae
30 Using the following อาหารเพาะเลี้ยง, ไมโครแอลจี ("organisms belonging
to the จีนัส Euglena (Euglena gracilis strain EOD-1, which was
25
internationally deposited to Patent Organism Depositary, National Institute of Technology and Evaluation (NITE-IPOD at Kazusakamatari 2-5-8-120,
Kisarazu, Chiba 292-0818 Japan) as Accession No. FERM BP-11530 on March 25, 2013 under the provisions of the Budapest Treaty) were cultured for four
5 days by การเพาะเลี้ยง แบบเฮเทอโรโทรฟิก.
อาหารเพาะเลี้ยง: A อาหารเพาะเลี้ยง obtained by adding 25 g/L of glucose to a modified Hutner อาหารเพาะเลี้ยง (hereinafter, referred to also as "Modified Hutner") was used. Specifically, the อาหารเพาะเลี้ยง is shown in Table 1. The component contained in the liquid other than nutrients is water.
10 [0074]
Table 1
Modified Hutner medium excluding asparagine: With addition of glucose
glucose 25g/L
glutamic acid 5g/L
malic acid 5g/L
ygcine 2.5g/L
urea 0.4g/L
succinic acid 0.1g/L
KH2PO4 0.4g/L
MgSO4 • 71420 0.14g/L
MgCO3 0.4g/L
CaCO3 0.1g/L
(NH4)2Fe(SO4)2 • 6H20 0.021g/L
Vitamin 131 0.6mg/L
Vitamin B12 0 05mg/L
trace metal-containing solution 10 mL/L
[0075]
15 As the trace metal-containing solution in Table 1, a trace
metal-containing solution having the composition shown in Table 2 below was used.
The component other than the trace metal is water. [0076]
20 Table 2
26
ZnSO4 • 7H20 1.1g/L
MgSO4 • H2O 0,58g/ L
(NH4)6Mo7024 • 4H20 0.18g/L
CoSO4 • 7H20 02024g/ L
CuSO4 • 5H20 0.077g/ L
H3B03 0.029g/ L
NaNO3 • 4H20 0.074g/ L
[0077]
Culture method
In order to culture seed algae, the following อาหารเพาะเลี้ยง was 5 prepared, and culture was performed under the following conditions.
Composition of อาหารเพาะเลี้ยง:
Four types of culture media obtained by diluting a residuum
(ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น), after ethanol was distilled off from a fermentation
liquid obtained by alcoholic fermentation of biomass, 5-fold, 10-fold, 20-fold, 10 and 40-fold, respectively, with pure water were prepared.
For the อาหารเพาะเลี้ยง diluted 5-fold of these culture media, two types
of culture media were prepared by letting the อาหารเพาะเลี้ยง contain 0 g/L and
15 g/L of glucose, respectively.
Further, five types of culture media were prepared for each of the
15 culture media diluted 10-fold, 20-fold, and 40-fold by letting the culture media
contain 0 g/L, 10 g/L, 15 g/L, 20 g/L, and 25 g/L of glucose, respectively.
Each อาหารเพาะเลี้ยง was prepared so as to have a pH of 3.5 using hydrochloric acid, and was sterilized.
Culture container: 500 mL Sakaguchi flask
20 Culture conditions:
Preparation: 200 mL of the อาหารเพาะเลี้ยง and 20 mL of seed algae were contained in the Sakaguchi flask.
Culture temperature: 28°C
Light-สภาวะที่มืด: สภาวะที่มืด (in a thermostatic bath without
25 external incident light)
Aerobic conditions: The Sakaguchi flask was set on a shaker, and air
was fed into the อาหารเพาะเลี้ยง by operation by reciprocal shaking at 130 rpm.
27
[0078]
Confirmed results
Using the culture media diluted 5-fold, algae were cultured under the aforementioned conditions for 8 days. A liquid in each flask was sampled
5 everyday.
The volume V (mL) of the sampled liquid and the mass (dry mass) M
(mg) of ไมโครแอลจี contained in the liquid were determined. The algal content
MAT (g/L) was calculated by dividing the mass (M) by the volume (V).
Further, the TOC concentration of each อาหารเพาะเลี้ยง alone obtained 10 by removing the ไมโครแอลจี from the liquids sampled at the start of culture and
the end of culture after 8 days was measured.
The results are shown in รูป 2A and รูป 2B.
Likewise, using the culture media diluted 10-fold, diluted 20-fold, and
diluted 40-fold, algae were cultured under the aforementioned conditions for 5 15 days. A liquid in each flask was sampled everyday.
Further, the TOC concentration of each อาหารเพาะเลี้ยง alone obtained by removing the ไมโครแอลจี from the liquids sampled at the start of culture, the 2nd day of culture, and the end of culture after 5 days was measured.
The results are shown in Figs. 3 to 5.
20 [0079]
It can be seen from the aforementioned results that the อาหารเพาะเลี้ยง
is made effective for the growth of ไมโครแอลจี by letting the อาหารเพาะเลี้ยง
contain the ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น together with the carbon source.
Further, it also can be seen from the aforementioned results that a
25 significant advantage can be given by performing the ไมโครแอลจี culture
method for the purpose of treating wastewater containing the ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น.
Further, it can be seen from the aforementioned results that the
ไมโครแอลจี still have more ability to grow by consuming sugar when the glucose
30 content is 10 g/L.
That is, it can be seen from the aforementioned results that the
28
ไมโครแอลจี can be grown more efficiently by using the อาหารเพาะเลี้ยง having a glucose content of 10 g/L or more.
On the other hand, focusing on the TOC concentration, it can be seen
that the TOC concentration in the อาหารเพาะเลี้ยง can be significantly reduced 5 by using the อาหารเพาะเลี้ยง having a glucose content of less than 20 g/L.
[0080]
Experimental Example 2 Culture method
The following อาหารเพาะเลี้ยง was prepared for culturing ไมโครแอลจี in 10 the same manner as in Experimental Example 1.
However, the algae were cultured under the culture conditions changed as follows.
Composition of อาหารเพาะเลี้ยง:
Three types of culture media obtained by diluting a residuum
15 (ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น), after ethanol was distilled off from a fermentation
liquid obtained by alcoholic fermentation of biomass, 5-fold, 10-fold, and 20-fold, respectively, with pure water were prepared, and three types of culture media obtained by letting the culture media prepared above contain 15 g/L of glucose were prepared.
20 Each อาหารเพาะเลี้ยง was prepared so as to have a pH of 3.5 using
hydrochloric acid, and was sterilized.
Culture container: 300 mL Erlenmeyer flask Culture conditions:
Preparation: 100 mL of the อาหารเพาะเลี้ยง and 5 mL of seed algae were 25 contained in the Erlenmeyer flask.
Culture temperature: 25°C
Aerobic conditions: The Erlenmeyer flask was set on a shaker, and air
was fed into the อาหารเพาะเลี้ยง by operation at a rotational speed of 120 rpm.
Light-สภาวะที่มืด: Light/สภาวะที่มืด (Culture was performed 30 while a light irradiation environment for 12 hours and a dark environment for
12 hours were repeated. The photosynthetic photon flux density (PPFD) in
29
the light irradiation environment was set to about 100 p.mol/m2•s.)
The culture results are shown in รูป 6.
[0081]
It can be seen, for example, from the aforementioned results by the
5 comparison of รูป 6 with Figs. 2 to 4 that it is more advantageous to perform
the algae culture method of this รูปลักษณะ under สภาวะที่มืด in order to culture the algae more efficiently.
INDUSTRIAL APPLICABILITY
10 [0082]
The method for culturing ไมโครแอลจี of the การประดิษฐ์นี้ can be used suitably for using ไมโครแอลจี storing organic compounds such as
hydrocarbons
ตัวอย่าง ในนี้รูปลักษณะ น้ำบำบัด F ที่ออกจากสมาธิเครื่อง 24 ไม่จำเป็นต้องมีการ30 ลดความเข้มข้นของ TOC กว่าของเหลวที่เหลือจากการกลั่น เนื่องในอาหารเพาะเลี้ยงที่ประกอบด้วยน้ำตาลหรือส่วนผสมต่าง ๆ เป็นของเหลวที่เหลือจากการกลั่น วิธีเพาะเลี้ยงไมโครแอลจีของการประดิษฐ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อรวมกรณีที่น้ำเสียที่บำบัด F มี TOC เข้มข้นสูงกว่าของเหลวที่เหลือจากการกลั่น [0071]ต่อ 5 ในนี้รูปลักษณะ ระบุตัวอย่างของชีวมวล algal Dมีแสดง กรณีใช้ไมโครแอลจีปลูกสำหรับการใช้งานนอกเหนือจากตัวอย่างดังกล่าวยังอยู่ในช่วงไว้ โดยการประดิษฐ์นี้เพิ่มเติม เรื่องทางเทคนิคที่เป็นดีที่รู้จักกันในไมโครแอลจี 10 วิธีวัฒนธรรมและวิธีการบำบัดน้ำเสีย สามารถสามารถจ้าง แม้ว่า เรื่องไม่เฉพาะอธิบายไว้ข้างต้น เป็นเวลานานผลกระทบของการ การประดิษฐ์นี้ไม่พิการนั่นคือ การประดิษฐ์นี้ไม่จำกัดด้านบนอธิบายรูปลักษณะs และการออกแบบสามารถอย่างเหมาะสมปรับเปลี่ยนภายในขอบเขตวัตถุประสงค์ โดยการการประดิษฐ์นี้ 15 ประโยชน์ในการดำเนินงานปัจจุบัน การประดิษฐ์ไม่จำกัด รูปลักษณะs เหล่านี้รูปลักษณะs ที่เปิดเผยนี้ควรตีความทุกประการ ที่แสดงแต่ไม่มีการจำกัดการ ไม่มีขอบเขตของการการประดิษฐ์นี้ ระบุคำอธิบายเหล่านี้ แต่ ตามขอบเขตของการข้อถือสิทธิ ขอบเขตของการประดิษฐ์นี้ 20 มีวัตถุประสงค์เพื่อรวมแก้ไขทั้งหมด เทียบเท่ากับความรู้สึกและขอบเขตการขอบเขตของการข้อถือสิทธิตัวอย่าง[0072]25 ถัดไป การประดิษฐ์นี้จะอธิบายเพิ่มเติมในรายละเอียดตามขวางของตัวอย่างการ อย่างไรก็ตาม การประดิษฐ์นี้ไม่จำกัดตัวอย่างเหล่านี้ [0073]ทดลองตัวอย่าง 1 เมล็ดสาหร่ายใช้ต่อไปนี้อาหารเพาะเลี้ยง ไมโครแอลจี ("ชีวิตของ 30การจีนัสยูกลีนา (ยูกลีนาจระเข้ต้องใช้ EOD-1 ซึ่ง 25ต่างประเทศฝากไปจดสิทธิบัตรสิ่งมีชีวิต Depositary สถาบันเทคโนโลยีและประเมินผล (ไนท์-IPOD ที่ Kazusakamatari 2-5-8-120 Kisarazu ชิบะ 292-0818 ญี่ปุ่น) เป็นหมายเลขทะเบียน 11530 BP FERM บน 25 มีนาคม 2013 ภายใต้บทบัญญัติของสนธิสัญญาบูดาเปส) มีอ่างสำหรับสี่5 วัน โดยการเพาะเลี้ยงแบบเฮเทอโรโทรฟิกอาหารเพาะเลี้ยง: อาหารเพาะเลี้ยงเป็นได้ โดยการเพิ่ม 25 g/L ของกลูโคส Hutner แก้ไขอาหารเพาะเลี้ยง (ซึ่งต่อไปนี้ เรียกว่ายังเป็น "แก้ไข Hutner") ถูกใช้ โดยเฉพาะ อาหารเพาะเลี้ยงที่แสดงในตารางที่ 1 ส่วนประกอบที่อยู่ในของเหลวนอกจากสารอาหารที่เป็นน้ำ10 [0074]ตารางที่ 1แก้ไข Hutner กลางรวม asparagine: บวกของกลูโคสน้ำตาลกลูโคส 25g/Lกลูตาเมต 5g/Lmalic กรด 5g/Lygcine 2.5 g/Lurea 0.4 g/Lกรด 0.1 g/LKH2PO4 0.4 g/LMgSO4 • 71420 0.14 g/LMgCO3 0.4 g/LCaCO3 0.1 g/L(NH4) 2Fe (SO4) 2 • 6H 20 0.021 g/Lวิตามิน 131 0.6 mg/Lวิตามินบี 12 0 05mg/Lติดตามการแก้ปัญหาที่ประกอบด้วยโลหะ 10 mL/L[0075]15 เป็นโซลูชันประกอบด้วยโลหะติดตามในตารางที่ 1 การติดตามใช้โซลูชันที่ประกอบด้วยโลหะมีองค์ประกอบที่แสดงในตารางที่ 2 ด้านล่างส่วนประกอบอื่นที่ไม่ใช่โลหะติดตามเป็นน้ำ [0076]ตาราง 20 2 26ZnSO4 • 7H 20 1.1 g/LMgSO4 • H2O 0, 58g/L(NH4) 6Mo7024 • 4H 20 0.18 g/LCoSO4 • 7H 20 02024g/LCuSO4 • 5H 20 0.077 g / LH3B03 0.029 g / LNaNO3 • 4H 0.074 20 g / L[0077]วิธีวัฒนธรรมในสั่งสาหร่ายเมล็ดวัฒนธรรม อาหารเพาะเลี้ยงต่อไปนี้คือ 5 เตรียมพร้อม และวัฒนธรรมได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้ ส่วนประกอบของอาหารเพาะเลี้ยง:สื่อวัฒนธรรมรับ โดย diluting residuum เป็นสี่ชนิด(ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น), หลังจากมีกลั่นเอทานอลออกจากการหมัก ของเหลวได้ โดยการหมักแอลกอฮอล์ของชีวมวล 5-fold, 10-fold, 20-fold, 10 และ 40-fold ตามลำดับ น้ำบริสุทธิ์เตรียมไว้ สำหรับอาหารเพาะเลี้ยง 5-fold ยกเว้นเหล่านี้วัฒนธรรมสื่อ ชนิดที่สองวัฒนธรรมสื่อเตรียมไว้ โดยให้อาหารเพาะเลี้ยงประกอบด้วย 0 g/L และ15 g/L ของกลูโคส ตามลำดับเพิ่มเติม ห้าชนิดของสื่อเตรียมไว้สำหรับแต่ละสื่อวัฒนธรรม 15 ยกเว้น 10-fold, 20-fold และ 40-fold โดยให้สื่อวัฒนธรรมประกอบด้วย 0 g/L, 10 g/L, 15 g/L, 20 g/L และ 25 g/L ของกลูโคส ตามลำดับอาหารเพาะเลี้ยงแต่ละถูกเตรียมไว้เพื่อมี pH 3.5 โดยใช้กรดไฮโดรคลอริก และถูก sterilizedภาชนะวัฒนธรรม: หนาว Sakaguchi ขนาด 500 มล.20 วัฒนธรรมเงื่อนไข:เตรียมสอบ: 20 mL ของสาหร่ายเมล็ดและ 200 มลของอาหารเพาะเลี้ยงมีอยู่ในหนาว Sakaguchiวัฒนธรรมอุณหภูมิ: 28° Cแสง-สภาวะที่มืด: สภาวะที่มืด (ในน้ำ thermostatic โดยแสงภายนอกเหตุการณ์ 25)สภาพแอโรบิก: หนาว Sakaguchi ถูกตั้งค่าในเชคเกอร์ และอากาศได้รับอาหารเพาะเลี้ยงที่การดำเนินการ โดยสั่นที่ 130 rpm ซึ่งกันและกัน 27[0078]ผลที่ได้รับการยืนยันใช้สื่อวัฒนธรรมผสม 5-fold สาหร่ายมีอ่างภายใต้เงื่อนไขดังกล่าว 8 วัน ของเหลวในแต่ละหนาวเป็นตัวอย่าง5 ทุกวันปริมาตร V (mL) ของของเหลวตัวอย่างและมวล (มวลแห้ง) M(mg) ของไมโครแอลจีที่มีอยู่ในของเหลวที่กำหนด เนื้อหา algal พรม (g/L) ถูกคำนวณ โดยการหารมวล (M) โดยปริมาตร (V) เพิ่มเติม สารบัญความเข้มข้นของอาหารเพาะเลี้ยงแต่ละคนเดียวรับ 10 โดยไมโครแอลจีเอาออกจากของเหลวตัวอย่างที่จุดเริ่มต้นของวัฒนธรรม และจุดสิ้นสุดของวัฒนธรรมหลังวันที่ 8 ที่วัดผลลัพธ์จะแสดงในรูปที่ 2A และรูป 2Bในทำนองเดียวกัน ใช้สื่อวัฒนธรรมผสม 10-fold ผสม 20-fold และ ยกเว้น 40-fold สาหร่ายมีอ่างภายใต้เงื่อนไขดังกล่าว 5 15 วัน ของเหลวในแต่ละหนาวขึ้นทุกวันตัวอย่างเพิ่มเติม สารบัญความเข้มข้นของอาหารเพาะเลี้ยงแต่ละคนเดียวได้ โดยการเอาไมโครแอลจีที่จากของเหลวตัวอย่างที่จุดเริ่มต้นของวัฒนธรรม วัฒนธรรม และสิ้นสุดของวัฒนธรรมวัน 2 หลังจาก 5 วันที่วัดผลลัพธ์จะแสดงใน Figs. 3-520 [0079]จะเห็นได้จากดังกล่าวผลที่อาหารเพาะเลี้ยง is made effective for the growth of ไมโครแอลจี by letting the อาหารเพาะเลี้ยง contain the ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น together with the carbon source. Further, it also can be seen from the aforementioned results that a 25 significant advantage can be given by performing the ไมโครแอลจี culturemethod for the purpose of treating wastewater containing the ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น.Further, it can be seen from the aforementioned results that theไมโครแอลจี still have more ability to grow by consuming sugar when the glucose30 content is 10 g/L.That is, it can be seen from the aforementioned results that the 28ไมโครแอลจี can be grown more efficiently by using the อาหารเพาะเลี้ยง having a glucose content of 10 g/L or more.On the other hand, focusing on the TOC concentration, it can be seenthat the TOC concentration in the อาหารเพาะเลี้ยง can be significantly reduced 5 by using the อาหารเพาะเลี้ยง having a glucose content of less than 20 g/L. [0080]Experimental Example 2 Culture methodThe following อาหารเพาะเลี้ยง was prepared for culturing ไมโครแอลจี in 10 the same manner as in Experimental Example 1.However, the algae were cultured under the culture conditions changed as follows.Composition of อาหารเพาะเลี้ยง:Three types of culture media obtained by diluting a residuum15 (ของเหลวที่เหลือจากการกลั่น), after ethanol was distilled off from a fermentationliquid obtained by alcoholic fermentation of biomass, 5-fold, 10-fold, and 20-fold, respectively, with pure water were prepared, and three types of culture media obtained by letting the culture media prepared above contain 15 g/L of glucose were prepared.20 Each อาหารเพาะเลี้ยง was prepared so as to have a pH of 3.5 usinghydrochloric acid, and was sterilized.Culture container: 300 mL Erlenmeyer flask Culture conditions:Preparation: 100 mL of the อาหารเพาะเลี้ยง and 5 mL of seed algae were 25 contained in the Erlenmeyer flask.Culture temperature: 25°CAerobic conditions: The Erlenmeyer flask was set on a shaker, and air was fed into the อาหารเพาะเลี้ยง by operation at a rotational speed of 120 rpm. Light-สภาวะที่มืด: Light/สภาวะที่มืด (Culture was performed 30 while a light irradiation environment for 12 hours and a dark environment for12 hours were repeated. The photosynthetic photon flux density (PPFD) in 29the light irradiation environment was set to about 100 p.mol/m2•s.) The culture results are shown in รูป 6.
[0081]
It can be seen, for example, from the aforementioned results by the
5 comparison of รูป 6 with Figs. 2 to 4 that it is more advantageous to perform
the algae culture method of this รูปลักษณะ under สภาวะที่มืด in order to culture the algae more efficiently.
INDUSTRIAL APPLICABILITY
10 [0082]
The method for culturing ไมโครแอลจี of the การประดิษฐ์นี้ can be used suitably for using ไมโครแอลจี storing organic compounds such as
hydrocarbons
การแปล กรุณารอสักครู่..
