6.2. Polymerase chain reaction (PCR

6.2. Polymerase chain reaction (PCR)

To overcome the disadvantage of MPN method for detecting V. parahaemolyticus, polymerase chain reaction (PCR) using DNA primers targeting tdh and trh genes encoding thermostable direct hemolysin (TDH) and TDH- related hemolysin (TRH), respectively, were developed for detecting virulent strains of V. parahaemolyticus. Tada et al. (1992) developed a PCR procedure for specific detection of tdh and trh and reported that the procedure was capable of detecting 400 fg of cellular DNA carrying the respective gene. However, this assay cannot be used to detect V. parahaemolyticus that does not carry tdh or trh and its sensitivity was reduced by inhibitors present in normal fecal samples. Authors suggested that either a DNA extraction or an enrichment of samples in alkaline peptone water for 4 h be conducted when analyzing fecal samples

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

6.2 ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR)เพื่อเอาชนะข้อเสียของวิธี MPN สำหรับการตรวจหา V. parahaemolyticus ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) โดยใช้ดีเอ็นเอ เป้าหมาย tdh และ trh ยีนเข้ารหัส thermostable ไพรเมอร์โดยตรง hemolysin (TDH) และ TDH hemolysin (TRH), ตามลำดับ ได้ถูกพัฒนาขึ้นสำหรับการตรวจสอบพันธุ์ virulent V. parahaemolyticus Tada et al. (1992) พัฒนากระบวนการ PCR สำหรับการตรวจหา specific tdh และ trh และรายงานว่า กระบวนการไม่สามารถตรวจจับ 400 fg ของดีเอ็นเอเซลล์ยีนเกี่ยวข้องดำเนินการ อย่างไรก็ตาม ไม่สามารถใช้ทดสอบนี้ตรวจหา V. parahaemolyticus ที่มี tdh หรือ trh และความไวเป็นถูกลดยับยั้งอยู่ในตัวอย่างอุจจาระปกติ ผู้เขียนแนะนำว่า การสกัดดีเอ็นเอหรือการเพิ่มคุณค่าในตัวอย่างในน้ำอัลคาไลน์ peptone 4 ชม.จะดำเนินการเมื่อวิเคราะห์ตัวอย่างอุจจาระ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

6.2 วิธี Polymerase chain reaction (PCR)

เพื่อเอาชนะข้อเสียของวิธี MPN การตรวจวัด V. parahaemolyticus, วิธี Polymerase chain reaction (PCR) โดยใช้ไพรเมอร์ดีเอ็นเอกำหนดเป้าหมาย TDH และยีน TRH เข้ารหัส hemolysin ที่ทนความร้อนโดยตรง (TDH) และ TDH- hemolysin ที่เกี่ยวข้องกัน (TRH) ตามลำดับ , ได้รับการพัฒนาสำหรับการตรวจหาสายพันธุ์ที่รุนแรงของ V. parahaemolyticus ธาดา, et al (1992) การพัฒนากระบวนวิธี PCR สำหรับ speci Fi C การตรวจสอบของ TDH และ TRH และมีการรายงานว่าขั้นตอนมีความสามารถในการตรวจจับ 400 FG ของดีเอ็นเอของโทรศัพท์มือถือถือของยีนที่เกี่ยวข้อง อย่างไรก็ตามการทดสอบนี้จะไม่สามารถนำมาใช้ในการตรวจสอบ parahaemolyticus โวลต์ที่ไม่ได้ดำเนินการหรือ TDH TRH และความไวของมันลดลงยับยั้งอยู่ในอุจจาระปกติ ผู้เขียนชี้ให้เห็นว่าทั้งสกัดดีเอ็นเอหรือการเพิ่มปริมาณของกลุ่มตัวอย่างในน้ำอัลคาไลน์สำหรับเปปโตน 4 ชั่วโมงจะต้องดำเนินการเมื่อวิเคราะห์ตัวอย่างอุจจาระ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

6.2 . ปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR )ที่จะเอาชนะข้อเสียของวิธี MPN สำหรับตรวจหา V . parahaemolyticus , ปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR ) โดยใช้ไพรเมอร์ tdh trh ยีนและดีเอ็นเอเป้าหมายโดยตรงในการเข้ารหัส ( tdh ) และ tdh ที่เกี่ยวข้อง - ตรง ( เจ้าชาย ) ตามลำดับ ได้ถูกพัฒนาขึ้นสำหรับการตรวจหาสายพันธุ์ tdh รุนแรง . ทาดะ และคณะ ( 1992 ) พัฒนาเทคนิคกระบวนการกาจึง C การตรวจหาและ tdh ตลาดและรายงานว่ากระบวนการมีความสามารถในการตรวจหาดีเอ็นเอของเซลล์ 400 FG แบกยีนที่เกี่ยวข้อง อย่างไรก็ตาม วิธีนี้ไม่สามารถใช้ในการตรวจสอบที่ไม่พก tdh tdh และ trh หรือความไวลดลงจากปัจจุบัน ในตัวอย่างอุจจาระปกติ ผู้เขียนแนะนำว่า ทั้งการสกัดดีเอ็นเอ หรือตัวอย่างในการ extract น้ำอัลคาไลน์ 4 H จะดำเนินการเมื่อวิเคราะห์ตัวอย่างอุจจาระ