2. Methods
2.1. Bacterial isolates
Cefpodoxime-resistant Enterobacteriaceae (n = 580) were collected
and characterised as part of a nation-wide 3GC-resistance
surveillance study in Wales, UK. These nosocomial specimens
originated from either community-acquired (C) or hospitalacquired
(H) infections and were classified as such (Table 1). All
ESBL-producers were confirmed phenotypically via susceptibility
testing (CLSI) and cephalosporin-clavulanate synergy testing.
Screening for blaCTX-M was carried out by multiplex PCR (Woodford
et al., 2006) and subsequent sequence analysis.
blaCTX-M-14 E. coli collected during the work by Liebana et al.
(2006) were included (isolates #6477, #6478, #6479, #6480) as
comparators to the human isolates collected in all further
investigation. In short, samples were collected from rectal swabs
of scour-suffering calves in a North-Wales farm (location
withheld). A history of treatment with amoxicillin-clavulanate,
marbofloxacin and cefquinome was noted.
Unless otherwise stated, all bacterial isolates were cultured
overnight at 37 C on CBA plates (Oxoid Ltd., Hampshire, UK) and
stored at
80 C in Microbank Beads (Pro-Lab Diagnostics,
Merseyside, UK).
2.2. Identification of blaCTX-M-14
CTX-M Group 9-producing E. coli isolates identified were
screened for the presence of blaCTX-M-14 using the primers CTX-
M-14-F (50-ggt gac aaa gag agt gca acg-30) and CTX-M-14-R (50-ccg
2. วิธีการ
2.1 แบคทีเรียที่แยก
เซฟโปดอกซิมทน Enterobacteriaceae (n = 580) ที่ถูกเก็บรวบรวม
และโดดเด่นในฐานะส่วนหนึ่งของ 3GC ต้านทานทั่วประเทศ
การศึกษาการเฝ้าระวังในเวลส์, สหราชอาณาจักร เหล่านี้เป็นตัวอย่างในโรงพยาบาล
มาจากทั้งชุมชนที่ได้รับ (C) หรือ hospitalacquired
(H) การติดเชื้อและถูกจัดให้เป็นเช่น (ตารางที่ 1) ทั้งหมด
ผู้ผลิต ESBL ได้รับการยืนยันลักษณะภายนอกผ่านทางความไวต่อการ
ทดสอบ (CLSI) และ cephalosporin-clavulanate การทดสอบการทำงานร่วมกัน.
คัดกรอง blaCTX-M ได้ดำเนินการโดย multiplex PCR (Woodford
et al., 2006) และการวิเคราะห์ลำดับต่อมา.
blaCTX-M-14 E . โคไลที่เก็บรวบรวมได้ในระหว่างการทำงานโดย Liebana et al.
(2006) ถูกรวม (แยก # 6477, # 6478, # 6479, # 6480) เป็น
ตัวเปรียบเทียบเพื่อมนุษย์แยกเก็บในทั้งหมดต่อ
การตรวจสอบ ในระยะสั้นเก็บตัวอย่างจาก swabs ทวารหนัก
ของลูกกัดเซาะทนทุกข์ทรมานในฟาร์มนอร์ทเวลส์ (ตำแหน่ง
ระงับ) ประวัติของการรักษาด้วย amoxicillin-clavulanate,
marbofloxacin และ cefquinome ก็สังเกตเห็น.
เว้นแต่จะระบุไว้เป็นอย่างอื่นแบคทีเรียทั้งหมดถูกเลี้ยง
ค้างคืนที่ 37 องศาเซลเซียสใน CBA แผ่น (Oxoid จำกัด Hampshire, UK) และ
เก็บไว้ที่
? 80? C ใน Microbank ลูกปัด (Pro-Lab วินิจฉัย
ซีย์ไซด์สหราชอาณาจักร).
2.2 บัตรประจำตัวของ blaCTX-M-14
CTX-M 9 กลุ่มผลิตเชื้อ E. coli แยกระบุถูก
คัดกรองการปรากฏตัวของ blaCTX-M-14 โดยใช้ไพรเมอร์ CTX-
M-14-F (50 GGT ปิดปาก GAC AAA agt GCA ACG -30) และ CTX-M-14-R (50 CCG
การแปล กรุณารอสักครู่..
2 . วิธีการ2.1 . แบคทีเรียไอโซเลทผิดเพี้ยนทนเซฟโปดอกซิม ( n = 580 ) ศึกษาและมีลักษณะเป็นส่วนหนึ่งของเนชั่นไวด์ 3gc ความต้านทานการศึกษาการเฝ้าระวังในเวลส์ , UK ตัวอย่างเหล่านี้ ในโรงพยาบาลที่มาจากทั้ง community-acquired ( C ) หรือ hospitalacquired( H ) เชื้อและจำแนก ดังนี้ ( ตารางที่ 1 ) ทั้งหมดผู้ผลิต esbl ได้รับการยืนยัน phenotypically ผ่าน พฤติกรรมการทดสอบ ( ต่างๆ ) และการทดสอบความสอดคล้อง Clavulanate cephalosporin .การคัดกรอง blactx-m กระทำโดย multiplex PCR ( ไพน์et al . , 2006 ) และการวิเคราะห์ลำดับต่อมาblactx-m-14 E . coli ที่ใช้ในการทำงานโดย liebana et al .( 2006 ) รวม ( แยก # 6477 # 6478 # 6479 , , , 6480 # ) เช่นเปรียบเทียบกับมนุษย์ไอโซในเพิ่มเติมการสืบสวน ในระยะสั้น โดยเก็บตัวอย่างจากทวารหนักจากการเป็นทุกข์ลูกวัวในฟาร์มทางตอนเหนือของเวลส์ ( สถานที่2 ) ประวัติความเป็นมาของการรักษาด้วย Amoxicillin Clavulanate ,และ marbofloxacin เซฟควิน ได้ระบุไว้เว้นแต่จะระบุเป็นอย่างอื่น อาหารเพาะเลี้ยงเชื้อที่แยกได้ทั้งหมดค้างคืนที่ 37 C ใน CBA แผ่น ( oxoid จำกัด , Hampshire , UK ) และเก็บไว้ที่80 องศาเซลเซียส ใน microbank ลูกปัด ( Lab Pro การวินิจฉัยลิเวอร์พูล , อังกฤษ )2.2 . การ blactx-m-14ctx-m กลุ่ม 9-producing E . coli สายพันธุ์ที่ระบุคือเพิ่มการแสดงตนของ blactx-m-14 โดยใช้ไพรเมอร์ซีทีเอ็กซ์ -m-14-f ( 50 ก่อนถ่าน AAA มุข agt GCA acg-30 ) และ ctx-m-14-r ( 50 ccg
การแปล กรุณารอสักครู่..