Erythrocytic malaria parasites degr

Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปรสิตมาลาเรีย erythrocytic ย่อยสลายฮีโมโกลบินในความเปรี้ยวแวคิวโอลอาหารการได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิตภาวะธำรงดุล ไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบินปรากฏขึ้นเพื่อ ให้สหกรณ์การกระบวนการที่ต้อง proteases cysteine (falcipains) และ aspartic proteases(plasmepsins), แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ต่าง ๆ ในกระบวนการนี้จะไม่รู้จัก เราก่อนหน้านี้พบว่า falcipain-2สำคัญ trophozoite แวคิวโอลอาหาร cysteine รติเอสได้ การกำหนดลักษณะบทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราระหว่างสองวัน falcipain-2ยีน และประเมินผลของการแก้ไขนี้ Falcipain-2-น่าพิศวงtrophozoites ได้ลดลงอย่างเด่นชัด cysteine รติเอสกิจกรรมและบวม สีดำย้อมสีอาหาร vacuoles สอดคล้องกับการบล็อกในไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบิน สาเหตุรติเอส cysteineinhibitors อย่างไรก็ตาม ผู้ใหญ่ขั้นกับน่าพิศวงมากจำแนกไม่ได้จากปรสิตชนิดป่า และการพัฒนาโดยปกติ ปรสิตน่าพิศวงได้ลดลง และล่าช้าการเพิ่มขึ้นของ falcipain-2 ที่ปรากฏการนำโดยtranscription ของสำเนาที่สองของยีน (falcipain-2)ของ falcipains และ plasmepsins อื่น ๆ คล้ายคลึงกันในปรสิต ชนิดป่า และน่าพิศวง เมื่อเทียบกับป่าชนิดชนะน็อกโดยเทคนิคปรสิตสำคัญประมาณ 3 ครั้งขึ้นไปcysteine inhibitors รติเอส E-64 และ leupeptin และ 50-fold กว่ามีความไวต่อการ aspartic รติเอสเตอร์ pepstatin ของเราผลลัพธ์กำหนดฟังก์ชันเฉพาะสำหรับ falcipain-2 ไฮโตรไลซ์ของฮีโมโกลบินใน trophozoites นอกจากนี้ พวกเขาเน้นที่สหกรณ์การดำเนินการของ cysteine และ aspartic proteases ในฮีโมโกลบินย่อยสลาย โดยปรสิตมาลาเรีย ปรสิตมาลาเรีย erythrocytic ย่อยสลายฮีโมโกลบินในความเปรี้ยวแวคิวโอลอาหารการได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิตภาวะธำรงดุล ไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบินปรากฏขึ้นเพื่อ ให้สหกรณ์การกระบวนการที่ต้อง proteases cysteine (falcipains) และ aspartic proteases(plasmepsins), แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ต่าง ๆ ในกระบวนการนี้จะไม่รู้จัก เราก่อนหน้านี้พบว่า falcipain-2สำคัญ trophozoite แวคิวโอลอาหาร cysteine รติเอสได้ การกำหนดลักษณะบทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราระหว่างสองวัน falcipain-2ยีน และประเมินผลของการแก้ไขนี้ Falcipain-2-น่าพิศวงtrophozoites ได้ลดลงอย่างเด่นชัด cysteine รติเอสกิจกรรมและบวม สีดำย้อมสีอาหาร vacuoles สอดคล้องกับการบล็อกในไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบิน สาเหตุรติเอส cysteineinhibitors อย่างไรก็ตาม ผู้ใหญ่ขั้นกับน่าพิศวงมากจำแนกไม่ได้จากปรสิตชนิดป่า และการพัฒนาโดยปกติ ปรสิตน่าพิศวงได้ลดลง และล่าช้าการเพิ่มขึ้นของ falcipain-2 ที่ปรากฏการนำโดยtranscription ของสำเนาที่สองของยีน (falcipain-2)ของ falcipains และ plasmepsins อื่น ๆ คล้ายคลึงกันในปรสิต ชนิดป่า และน่าพิศวง เมื่อเทียบกับป่าชนิดชนะน็อกโดยเทคนิคปรสิตสำคัญประมาณ 3 ครั้งขึ้นไปcysteine inhibitors รติเอส E-64 และ leupeptin และ 50-fold กว่ามีความไวต่อการ aspartic รติเอสเตอร์ pepstatin ของเราผลลัพธ์กำหนดฟังก์ชันเฉพาะสำหรับ falcipain-2 ไฮโตรไลซ์ของฮีโมโกลบินใน trophozoites นอกจากนี้ พวกเขาเน้นที่สหกรณ์การดำเนินการของ cysteine และ aspartic proteases ในฮีโมโกลบินย่อยสลาย โดยปรสิตมาลาเรีย ปรสิตมาลาเรีย erythrocytic ย่อยสลายฮีโมโกลบินในความเปรี้ยวแวคิวโอลอาหารการได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิตภาวะธำรงดุล ไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบินปรากฏขึ้นเพื่อ ให้สหกรณ์การกระบวนการที่ต้อง proteases cysteine (falcipains) และ aspartic proteases(plasmepsins), แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ต่าง ๆ ในกระบวนการนี้จะไม่รู้จัก เราก่อนหน้านี้พบว่า falcipain-2สำคัญ trophozoite แวคิวโอลอาหาร cysteine รติเอสได้ การกำหนดลักษณะบทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราระหว่างสองวัน falcipain-2ยีน และประเมินผลของการแก้ไขนี้ Falcipain-2-น่าพิศวงtrophozoites ได้ลดลงอย่างเด่นชัด cysteine รติเอสกิจกรรมและบวม สีดำย้อมสีอาหาร vacuoles สอดคล้องกับการบล็อกในไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบิน สาเหตุรติเอส cysteineinhibitors อย่างไรก็ตาม ผู้ใหญ่ขั้นกับน่าพิศวงมากจำแนกไม่ได้จากปรสิตชนิดป่า และการพัฒนาโดยปกติ ปรสิตน่าพิศวงได้ลดลง และล่าช้าการเพิ่มขึ้นของ falcipain-2 ที่ปรากฏการนำโดยtranscription ของสำเนาที่สองของยีน (falcipain-2)ของ falcipains และ plasmepsins อื่น ๆ คล้ายคลึงกันในปรสิต ชนิดป่า และน่าพิศวง เมื่อเทียบกับป่าชนิดชนะน็อกโดยเทคนิคปรสิตสำคัญประมาณ 3 ครั้งขึ้นไปcysteine inhibitors รติเอส E-64 และ leupeptin และ 50-fold กว่ามีความไวต่อการ aspartic รติเอสเตอร์ pepstatin ของเราผลลัพธ์กำหนดฟังก์ชันเฉพาะสำหรับ falcipain-2 ไฮโตรไลซ์ของฮีโมโกลบินใน trophozoites นอกจากนี้ พวกเขาเน้นที่สหกรณ์การดำเนินการของ cysteine และ aspartic proteases ในฮีโมโกลบินย่อยสลาย โดยปรสิตมาลาเรีย ปรสิตมาลาเรีย erythrocytic ย่อยสลายฮีโมโกลบินในความเปรี้ยวแวคิวโอลอาหารการได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิตภาวะธำรงดุล ไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบินปรากฏขึ้นเพื่อ ให้สหกรณ์การกระบวนการที่ต้อง proteases cysteine (falcipains) และ aspartic proteases(plasmepsins), แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ต่าง ๆ ในกระบวนการนี้จะไม่รู้จัก เราก่อนหน้านี้พบว่า falcipain-2สำคัญ trophozoite แวคิวโอลอาหาร cysteine รติเอสได้ การกำหนดลักษณะบทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราระหว่างสองวัน falcipain-2ยีน และประเมินผลของการแก้ไขนี้ Falcipain-2-น่าพิศวงtrophozoites ได้ลดลงอย่างเด่นชัด cysteine รติเอสกิจกรรมและบวม สีดำย้อมสีอาหาร vacuoles สอดคล้องกับการบล็อกในไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบิน สาเหตุรติเอส cysteineinhibitors อย่างไรก็ตาม ผู้ใหญ่ขั้นกับน่าพิศวงมากจำแนกไม่ได้จากปรสิตชนิดป่า และการพัฒนาโดยปกติ ปรสิตน่าพิศวงได้ลดลง และล่าช้าการเพิ่มขึ้นของ falcipain-2 ที่ปรากฏการนำโดยtranscription ของสำเนาที่สองของยีน (falcipain-2)ของ falcipains และ plasmepsins อื่น ๆ คล้ายคลึงกันในปรสิต ชนิดป่า และน่าพิศวง เมื่อเทียบกับป่าชนิดชนะน็อกโดยเทคนิคปรสิตสำคัญประมาณ 3 ครั้งขึ้นไปcysteine inhibitors รติเอส E-64 และ leupeptin และ 50-fold กว่ามีความไวต่อการ aspartic รติเอสเตอร์ pepstatin ของเราผลลัพธ์กำหนดฟังก์ชันเฉพาะสำหรับ falcipain-2 ไฮโตรไลซ์ของฮีโมโกลบินใน trophozoites นอกจากนี้ พวกเขาเน้นที่สหกรณ์การดำเนินการของ cysteine และ aspartic proteases ในฮีโมโกลบินย่อยสลาย โดยปรสิตมาลาเรีย ปรสิตมาลาเรีย erythrocytic ย่อยสลายฮีโมโกลบินในความเปรี้ยวแวคิวโอลอาหารการได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิตภาวะธำรงดุล ไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบินปรากฏขึ้นเพื่อ ให้สหกรณ์การกระบวนการที่ต้อง proteases cysteine (falcipains) และ aspartic proteases(plasmepsins), แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ต่าง ๆ ในกระบวนการนี้จะไม่รู้จัก เราก่อนหน้านี้พบว่า falcipain-2สำคัญ trophozoite แวคิวโอลอาหาร cysteine รติเอสได้ การกำหนดลักษณะบทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราระหว่างสองวัน falcipain-2ยีน และประเมินผลของการแก้ไขนี้ Falcipain-2-น่าพิศวงtrophozoites ได้ลดลงอย่างเด่นชัด cysteine รติเอสกิจกรรมและบวม สีดำย้อมสีอาหาร vacuoles สอดคล้องกับการบล็อกในไฮโตรไลซ์ฮีโมโกลบิน สาเหตุรติเอส cysteineinhibitors อย่างไรก็ตาม ผู้ใหญ่ขั้นกับน่าพิศวงมากจำแนกไม่ได้จากปรสิตชนิดป่า และการพัฒนาโดยปกติ ปรสิตน่าพิศวงได้ลดลง และล่าช้าการเพิ่มขึ้นของ falcipain-2 ที่ปรากฏการนำโดยtranscription ของสำเนาที่สองของยีน (falcipain-2)ของ falcipains และ plasmepsins อื่น ๆ คล้ายคลึงกันในปรสิต ชนิดป่า และน่าพิศวง เมื่อเทียบกับป่าชนิดชนะน็อกโดยเทคนิคปรสิตสำคัญประมาณ 3 ครั้งขึ้นไปcysteine inhibitors รติเอส E-64 และ leupeptin และ 50-fold กว่ามีความไวต่อการ aspartic รติเอสเตอร์ pepstatin ของเราผลลัพธ์กำหนดฟังก์ชันเฉพาะสำหรับ falcipain-2 ไฮโตรไลซ์ของฮีโมโกลบินใน trophozoites นอกจากนี้ พวกเขาเน้นที่สหกรณ์การดำเนินการของ cysteine และ aspartic proteases ในฮีโมโกลบินย่อยสลาย โดยปรสิตมาลาเรีย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปรสิตมาลาเรีย Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
vacuole food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
อาหารที่จะได้รับกรดอะมิโนอิสระและรักษาพยาธิสภาวะสมดุล homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.Erythrocytic malaria parasites degrade hemoglobin in an acidic
food vacuole to acquire free amino acids and maintain parasite
homeostasis. Hemoglobin hydrolysis appears to be a cooperative
process requiring cysteine proteases (falcipains) and aspartic proteases
(plasmepsins), but the specific roles of different enzymes in
this process are unknown. We previously showed that falcipain-2
is a major trophozoite food vacuole cysteine protease. To characterize
the specific role of falcipain-2, we disrupted the falcipain-2
gene and assessed the effect of this alteration. Falcipain-2-knockout
trophozoites had markedly diminished cysteine protease activity
and swollen, dark staining food vacuoles, consistent with a
block in hemoglobin hydrolysis, as caused by cysteine protease
inhibitors. However, more mature stages of knockout parasites
were indistinguishable from wild-type parasites and developed
normally. The knockout parasites had decreased and delayed
expression of falcipain-2, which appeared to be directed by increased
transcription of a second copy of the gene (falcipain-2
).
Expression of other falcipains and plasmepsins was similar in
wild-type and knockout parasites. Compared with wild-type,
knockout parasites were about 3 times more sensitive to the
cysteine protease inhibitors E-64 and leupeptin, and over 50-fold
more sensitive to the aspartic protease inhibitor pepstatin. Our
results assign a specific function for falcipain-2, the hydrolysis of
hemoglobin in trophozoites. In addition, they highlight the cooperative
action of cysteine and aspartic proteases in hemoglobin
degradation by malaria parasites.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

erythrocytic มาลาเรียปรสิตเนื่องจากฮีโมโกลบินในแวคิวโอลอาหารเปรี้ยว
ได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิต
ความสมดุลของร่างกาย ย่อยสลายเม็ดเลือดแดง ปรากฏเป็น สหกรณ์ต้องใช้กรดอะมิโน
กระบวนการทาง ( falcipains ) และ Aspartic proteases
( plasmepsins ) แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ที่แตกต่างกันใน
กระบวนการนี้ไม่ทราบชื่อ เราเคยพบว่า falcipain-2
เป็นหลักทรอพโฟซ้อยต์แวคิวโอลอาหารซีสเตอีนโปรติเอส ลักษณะ
บทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราหยุดชะงัก ยีน falcipain-2
และผลของการเปลี่ยนแปลงนี้ประเมิน falcipain-2-knockout
trophozoites มีมูลค่าลดลงซีสเตอีนโปรกิจกรรม
และบวม , มืดคราบอาหาร แวคิวโอล สอดคล้องกับ
บล็อกในการย่อยโปรตีน ฮีโมโกลบิน โดยเกิดจากกรดอะมิโน
ตัวยับยั้ง แต่ผู้ใหญ่มากขึ้นขั้นตอนของปรสิต
ถูกแยกจากปรสิต โดยผลิตและพัฒนา
ตามปกติ น็อกปรสิตได้ลดลงและล่าช้า
การแสดงออกของ falcipain-2 ซึ่งปรากฏเป็นกำกับโดยเพิ่มขึ้น
ถอดความของสำเนาของยีน ( falcipain-2
) .
การแสดงออกของ falcipains อื่นเหมือนกัน
plasmepsins ในของและปรสิตที่น่าพิศวง เมื่อเทียบกับยา
ปรสิต , พิศวง มีค่าประมาณ 3 เท่าของความไวต่อโปรตีนโปรตีนและกรดอะมิโน
e-64 ลูเพปติน และกว่า 50 พับ
มีความไวต่อสารยับยั้งเอนไซม์โปรติเอสเสีย pepstatin . การกำหนดฟังก์ชันเฉพาะของเรา

falcipain-2 , การย่อยสลายของฮีโมโกลบินใน trophozoites . นอกจากนี้ จะเน้นความร่วมมือ
การกระทำของกรดอะมิโน Aspartic ในการย่อยสลายทางและฮีโมโกลบิน
โดยปรสิตมาลาเรีย erythrocytic มาลาเรียปรสิตเนื่องจากฮีโมโกลบินในแวคิวโอลอาหารเปรี้ยว
ได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิต
ความสมดุลของร่างกาย ย่อยสลายเม็ดเลือดแดง ปรากฏเป็น สหกรณ์ต้องใช้กรดอะมิโน
กระบวนการทาง ( falcipains ) และ Aspartic proteases
( plasmepsins )แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ที่แตกต่างกันใน
กระบวนการนี้ไม่ทราบชื่อ เราเคยพบว่า falcipain-2
เป็นหลักทรอพโฟซ้อยต์แวคิวโอลอาหารซีสเตอีนโปรติเอส ลักษณะ
บทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราหยุดชะงัก ยีน falcipain-2
และผลของการเปลี่ยนแปลงนี้ประเมิน falcipain-2-knockout
trophozoites มีมูลค่าลดลงซีสเตอีนโปรกิจกรรม
และบวม ,มืดคราบอาหาร แวคิวโอล สอดคล้องกับ
บล็อกในการย่อยโปรตีน ฮีโมโกลบิน โดยเกิดจากกรดอะมิโน
ตัวยับยั้ง แต่ผู้ใหญ่มากขึ้นขั้นตอนของปรสิต
ถูกแยกจากปรสิต โดยผลิตและพัฒนา
ตามปกติ น็อกปรสิตได้ลดลงและล่าช้า
การแสดงออกของ falcipain-2 ซึ่งดูเหมือนจะเพิ่มขึ้น
กำกับโดยการถอดความของสำเนาของยีน ( falcipain-2
) .
การแสดงออกของ falcipains อื่นเหมือนกัน
plasmepsins ในของและปรสิตที่น่าพิศวง เมื่อเทียบกับยา
ปรสิต , พิศวง มีค่าประมาณ 3 เท่าของความไวต่อโปรตีนโปรตีนและกรดอะมิโน
e-64 ลูเพปติน และกว่า 50 พับ
มีความไวต่อสารยับยั้งเอนไซม์โปรติเอสเสีย pepstatin . ของเรา
การกำหนดฟังก์ชันเฉพาะสำหรับ falcipain-2 , การย่อยสลาย
ฮีโมโกลบินใน trophozoites . นอกจากนี้ จะเน้นการกระทำของกรดอะมิโน Aspartic สหกรณ์
และคุณค่าทางอาหารในการย่อยสลายฮีโมโกลบิน
โดยปรสิตมาลาเรีย erythrocytic มาลาเรียปรสิตเนื่องจากฮีโมโกลบินในแวคิวโอลอาหารเปรี้ยว
ได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิต
ความสมดุลของร่างกายย่อยสลายเม็ดเลือดแดง ปรากฏเป็น สหกรณ์ต้องใช้กรดอะมิโน
กระบวนการทาง ( falcipains ) และ Aspartic proteases
( plasmepsins ) แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ที่แตกต่างกันใน
กระบวนการนี้ไม่ทราบชื่อ เราเคยพบว่า falcipain-2
เป็นหลักทรอพโฟซ้อยต์แวคิวโอลอาหารซีสเตอีนโปรติเอส ลักษณะ
บทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราหยุดชะงัก falcipain-2
ยีน และ ประเมิน ผลของการเปลี่ยนแปลงนี้ falcipain-2-knockout
trophozoites มีมูลค่าลดลงซีสเตอีนโปรกิจกรรม
และบวม , มืดคราบอาหาร แวคิวโอล สอดคล้องกับ
บล็อกในการย่อยโปรตีน ฮีโมโกลบิน โดยเกิดจากกรดอะมิโน
ตัวยับยั้ง แต่ผู้ใหญ่มากขึ้นขั้นตอนของปรสิต
ถูกแยกจากปรสิต โดยผลิตและพัฒนา
ตามปกติน็อกปรสิตได้ลดลงและล่าช้า
การแสดงออกของ falcipain-2 ซึ่งปรากฏเป็นกำกับโดยเพิ่มขึ้น
ถอดความของสำเนาของยีน ( falcipain-2
) .
การแสดงออกของ falcipains อื่นเหมือนกัน
plasmepsins ในของและปรสิตที่น่าพิศวง เมื่อเทียบกับยา
ปรสิต , พิศวง มีค่าประมาณ 3 เท่าของความไวต่อ
ซีสเตอีนโปรติเอสอินฮิบิเตอร์ e-64 และลูเพปติน และกว่า 50 พับ
มีความไวต่อสารยับยั้งเอนไซม์โปรติเอสเสีย pepstatin . การกำหนดฟังก์ชันเฉพาะของเรา

falcipain-2 , การย่อยสลายของฮีโมโกลบินใน trophozoites . นอกจากนี้ จะเน้นการกระทำของกรดอะมิโน Aspartic สหกรณ์
และคุณค่าทางอาหารในการย่อยสลายฮีโมโกลบิน
โดยปรสิตมาลาเรียerythrocytic มาลาเรียปรสิตเนื่องจากฮีโมโกลบินในแวคิวโอลอาหารเปรี้ยว
ได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิต
ความสมดุลของร่างกาย ย่อยสลายเม็ดเลือดแดง ปรากฏเป็น สหกรณ์ต้องใช้กรดอะมิโน
กระบวนการทาง ( falcipains ) และ Aspartic proteases
( plasmepsins ) แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ที่แตกต่างกันใน
กระบวนการนี้ไม่ทราบชื่อ เราเคยพบว่า falcipain-2
เป็นหลักทรอพโฟซ้อยต์แวคิวโอลอาหารซีสเตอีนโปรติเอส ลักษณะ
บทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราหยุดชะงัก ยีน falcipain-2
และผลของการเปลี่ยนแปลงนี้ประเมิน falcipain-2-knockout
trophozoites มีมูลค่าลดลงซีสเตอีนโปรกิจกรรม
และบวม , มืดคราบอาหาร แวคิวโอล สอดคล้องกับ
บล็อกในการย่อยโปรตีน ฮีโมโกลบิน โดยเกิดจากกรดอะมิโน
ตัวยับยั้ง แต่ผู้ใหญ่มากขึ้นขั้นตอนของปรสิต
ถูกแยกจากปรสิต โดยผลิตและพัฒนา
ตามปกติ น็อกปรสิตได้ลดลงและล่าช้า
การแสดงออกของ falcipain-2 ซึ่งปรากฏเป็นกำกับโดยเพิ่มขึ้น
ถอดความของสำเนาของยีน ( falcipain-2
) .
การแสดงออกของ falcipains อื่นเหมือนกัน
plasmepsins ในของและปรสิตที่น่าพิศวง เมื่อเทียบกับยา
ปรสิต , พิศวง มีค่าประมาณ 3 เท่าของความไวต่อโปรตีนโปรตีนและกรดอะมิโน
e-64 ลูเพปติน และกว่า 50 พับ
มีความไวต่อสารยับยั้งเอนไซม์โปรติเอสเสีย pepstatin . การกำหนดฟังก์ชันเฉพาะของเรา

falcipain-2 , การย่อยสลายของฮีโมโกลบินใน trophozoites . นอกจากนี้ จะเน้นความร่วมมือ
การกระทำของกรดอะมิโน Aspartic ในการย่อยสลายทางและฮีโมโกลบิน
โดยปรสิตมาลาเรีย erythrocytic มาลาเรียปรสิตเนื่องจากฮีโมโกลบินในแวคิวโอลอาหารเปรี้ยว
ได้รับกรดอะมิโนอิสระ และรักษาปรสิต
ความสมดุลของร่างกาย ย่อยสลายเม็ดเลือดแดง ปรากฏเป็น สหกรณ์ต้องใช้กรดอะมิโน
กระบวนการทาง ( falcipains ) และ Aspartic proteases
( plasmepsins )แต่บทบาทเฉพาะของเอนไซม์ที่แตกต่างกันใน
กระบวนการนี้ไม่ทราบชื่อ เราเคยพบว่า falcipain-2
เป็นหลักทรอพโฟซ้อยต์แวคิวโอลอาหารซีสเตอีนโปรติเอส ลักษณะ
บทบาทเฉพาะของ falcipain-2 เราหยุดชะงัก ยีน falcipain-2
และผลของการเปลี่ยนแปลงนี้ประเมิน falcipain-2-knockout
trophozoites มีมูลค่าลดลงซีสเตอีนโปรกิจกรรม
และบวม ,มืดคราบอาหาร แวคิวโอล สอดคล้องกับ
บล็อกในการย่อยโปรตีน ฮีโมโกลบิน โดยเกิดจากกรดอะมิโน
ตัวยับยั้ง แต่ผู้ใหญ่มากขึ้นขั้นตอนของปรสิต
ถูกแยกจากปรสิต โดยผลิตและพัฒนา
ตามปกติ น็อกปรสิตได้ลดลงและล่าช้า
การแสดงออกของ falcipain-2 ซึ่งดูเหมือนจะเพิ่มขึ้น
กำกับโดยการถอดความของสำเนาของยีน ( falcipain-2
) .
การแสดงออกของ falcipains อื่นเหมือนกัน
plasmepsins ในของและปรสิตที่น่าพิศวง เมื่อเทียบกับยา
ปรสิต , พิศวง มีค่าประมาณ 3 เท่าของความไวต่อโปรตีนโปรตีนและกรดอะมิโน
e-64 ลูเพปติน และกว่า 50 พับ
มีความไวต่อสารยับยั้งเอนไซม์โปรติเอสเสีย pepstatin . ของเรา
การกำหนดฟังก์ชันเฉพาะสำหรับ falcipain-2 , การย่อยสลาย
ฮีโมโกลบินใน trophozoites . นอกจากนี้ จะเน้นการกระทำของกรดอะมิโน Aspartic สหกรณ์
และคุณค่าทางอาหารในการย่อยสลายฮีโมโกลบิน
โดยปรสิตมาลาเรีย