MATERIALS AND METHODSIsolation of c

MATERIALS AND METHODS
Isolation of cellulose degrading bacteria (CDB) by enrichment
method
Top soil samples (0 to 10 cm) were collected from the tea farm of
UPASI Tea Research Institute using auger. The soil samples were air
dried under shade and sieved through a 2.0 mm width mesh to remove
stones and plant debris. Cellulose degrading bacteria (CDB) were
isolated by enrichment method. Soil samples (10.0 g) obtained from a
tea field were added in minerals salts medium broth containing 0.1% of
carboxyl methyl cellulose and incubated at 30°C and 100 rpm for two
days of incubation under the shaking condition. From this stock, 10 ml
of the sample was taken and transferred to fresh MSM broth containing
0.1% CMC substrate as carbon source. After overnight incubation at
30°C, a 10 ml portion of supernatant fluid were serially diluted up to 107,
and then the 103, 104 and 105 dilutions were plated into the mineral salt
medium (100 ml) with CMC (0.1%) as carbon source. Plates were
incubated at 30°C and examined periodically for colonies which showed
areas of clearing. Representative colonies were transferred to nutrient
broth, allowed to grow for 24 h, diluted and plated again on cellulose
agar. This procedure was repeated until a pure culture of the cellulolytic
bacterium was obtained. The cellulolytic isolate was maintained at 4°C
on cellulose agar. Spread plate technique was followed and colonies
which appeared on CMC were amended on MSM media. Again, they
were streaked on mineral salts medium with 0.1% cellulose media in
order to bring pure cultures of CDB.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการ
แยกย่อยสลายแบคทีเรียเซลลูโลส (CDB) โดยการตกแต่ง

วิธีตัวอย่างดินบน (0-10 ซม. ) ถูกเก็บรวบรวมจากฟาร์มชาของ
upasi สถาบันวิจัยชาโดยใช้สว่าน ตัวอย่างดินถูกอากาศ
แห้งภายใต้ร่มเงาและร่อนผ่าน 2.0 มม. ความกว้างของตาข่ายที่จะลบ
ก้อนหินและเศษซากพืช แบคทีเรียย่อยสลายเซลลูโลส (CDB) มี
แยกโดยวิธีการตกแต่งตัวอย่างดิน (10.0 กรัม) ที่ได้รับจากสนาม
ชาที่ถูกเพิ่มเข้ามาในน้ำซุปเกลือแร่ธาตุกลางที่มี 0.1% ของ
carboxyl เมธิลเซลลูโลสและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสและ 100 รอบต่อนาทีสำหรับสอง
วันของการบ่มภายใต้เงื่อนไขการสั่น จากหุ้น 10 มล.
ของกลุ่มตัวอย่างที่ถูกนำมาและย้ายไปน้ำซุป MSM สดที่มี
0.1% พื้นผิว cmc เป็นแหล่งคาร์บอน หลังจากบ่มค้างคืนที่
30 ° C,ส่วน 10 มล. ของของเหลวใสถูกปรับลดเป็นลำดับขึ้นไป 107,
แล้ว 103, 104 และ 105 ถูกเจือจางลงไปชุบเกลือแร่
ขนาดกลาง (100 มล. ) ที่มี cmc (0.1%) เป็นแหล่งคาร์บอน แผ่นถูก
บ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสและตรวจสอบเป็นระยะ ๆ อาณานิคมซึ่งแสดงให้เห็น
พื้นที่ของสำนักหักบัญชี อาณานิคมตัวแทนถูกย้ายไป
สารอาหารน้ำซุปที่ได้รับอนุญาตที่จะเติบโตเป็นเวลา 24 ชั่วโมงเจือจางและชุบอีกครั้งบนเซลลูโลส
วุ้น ขั้นตอนนี้ซ้ำจนวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์ของเซลลูโลส
แบคทีเรียที่ได้รับ แยกสลายเซลลูโลสได้รับการเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศา c
บนวุ้นเซลลูโลส เทคนิคการแพร่กระจายแผ่นตามมาและอาณานิคม
ซึ่งปรากฏบน cmc ถูกแก้ไขเพิ่มเติมในสื่อ MSM อีกครั้งที่พวกเขาถูก
ลายบนเกลือแร่กลางที่มี 0.1% สื่อเซลลูโลสใน
เพื่อที่จะนำวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์ของ cdb

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการและวัสดุ
แยกเซลลูโลสลดแบคทีเรีย (CDB) โดยขอ
วิธี
ตัวอย่างดินบน (0-10 เซนติเมตร) ได้รวบรวมจากฟาร์มชาของ
สถาบันวิจัยชา UPASI ใช้ชอน ตัวอย่างดินถูกอากาศ
แห้งภายใต้ร่มเงา และ sieved ผ่านตาข่ายความกว้าง 2.0 มม.เอา
หินและเศษพืช เซลลูโลสแบคทีเรีย degrading (CDB) ถูก
แยกต่างหาก โดยวิธีเติมเต็ม ตัวอย่างดิน (10.0 g) ได้รับจากการ
ชาฟิลด์เพิ่มในแร่เกลือซุปปานกลางประกอบด้วย 0.1% ของ
carboxyl methyl เซลลูโลส และ incubated ที่ 30° C และ 100 รอบต่อนาทีสำหรับสอง
วันบ่มภายใต้เงื่อนไขงก ๆ จากนี้หุ้น 10 ml
ของตัวอย่างนำมาให้ และสด MSM ซุป containing
0.1% พื้นผิว CMC เป็นแหล่งคาร์บอน หลังจากบ่มค้างคืนที่
30° C ส่วน 10 มล.ของเหลว supernatant serially ถูกผสมได้ถึง 107,
แล้ว 103, 104 และ 105 dilutions ถูกชุบลงในเกลือแร่
ปานกลาง (100 มล.) กับ CMC (0.1%) เป็นแหล่งคาร์บอน มีแผ่น
incubated ที่ 30° C และตรวจสอบเป็นระยะ ๆ สำหรับอาณานิคมซึ่งแสดงให้เห็น
ของหัก ผู้แทนอาณานิคมถูกโอนย้ายไปยังอาหาร
ซุป สามารถเติบโตใน 24 ชม ผสม และเคลือบอีกครั้งบนเซลลูโลส
agar ขั้นตอนนี้ถูกทำซ้ำจนกระทั่งวัฒนธรรมบริสุทธิ์ของ cellulolytic
แบคทีเรียไม่ได้รับการ Cellulolytic isolate ถูกเก็บที่ 4° C
ใน agar เซลลูโลส เทคนิคแพร่แผ่นถูกตามอาณานิคมและ
ซึ่งปรากฏใน CMC ถูกแก้ไขบนสื่อ MSM อีกครั้ง พวกเขา
มีลายอยู่กลางเกลือแร่กับสื่อเซลลูโลส 0.1% ใน
สั่งให้นำวัฒนธรรมบริสุทธิ์ของ CDB

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ
ซึ่งจะช่วยขจัดแบคทีเรียย่ำยีศักดิ์ศรีเซลลูโลส(นายเฉินหยวน)โดยตัวอย่างดิน

ทางด้านบนสุดร่ำรวยวิธีการ( 0 ถึง 10 ซม.)จะถูกรวบรวมจากฟาร์มน้ำชาที่ชงชาการวิจัยสถาบัน
upasi โดยใช้สว่าน ตัวอย่างดินที่มีอากาศแห้ง
ซึ่งจะช่วยใต้ร่มเงาและนำผ่านตาข่ายความกว้าง 2.0 มม.ที่จะลบ
เศษพืชและก้อนหิน กำจัดเชื้อแบคทีเรียย่ำยีศักดิ์ศรีเซลลูโลส(นายเฉินหยวน)ได้ถูกแยกออกจากกันโดยใช้วิธีการ
ซึ่งจะช่วยทำให้ร่ำรวยดินตัวอย่าง( 10.0 กรัม)ได้รับจาก
น้ำชาฟิลด์ถูกเพิ่มลงในเกลือแร่เกลือขนาดกลางน้ำซุปที่มี 0.1% ของ
ผลิตภัณฑ์ แป้งและ incubated ที่ 30 ° C และ 100 รอบต่อนาทีสำหรับสอง
วันของผู้ประกอบการในการเขย่า สภาพ . จากหุ้นตัวนี้ 10 มล.
ของตัวอย่างที่ได้ถูกนำตัวไปและจะพาท่านไปส่งถึงยังน้ำซุป msm สดใหม่มี
ซึ่งจะช่วยยึดไดย์กับ 0.1% เจ๋อหมิคาร์บอนเป็นแหล่งที่มา หลังจากแสดงระยะฟักตัวพักค้างคืนที่
30 ° Cส่วน 10 มล.ของน้ำยา supernatant เป็นแบบอนุกรมเจือจางได้ถึง 107
แล้ว 103104 และ 105 dilutions เป็นตัวเสียบเคลือบทองไปเกลือแร่
ขนาดกลาง( 100 มล.)ที่พร้อมด้วยเจ๋อหมิ( 0.1% )เป็นแหล่งคาร์บอน แผ่นความร้อนมี
incubated ที่ 30 ° C และตรวจสอบเป็นระยะเพื่ออาณานิคมซึ่งแสดงให้เห็นว่ามีพื้นที่ที่มีการหักบัญชีเช็คระหว่างธนาคาร
ดินแดนอาณานิคมเป็นตัวแทนท้องถิ่นจะพาท่านไปส่งถึงยังสารอาหาร
น้ำซุปได้รับอนุญาตให้ขยายตัวสำหรับ 24 ชั่วโมงตัวเสียบเคลือบทองเจือจางและอีกครั้งในเซลลูโลส
สาหร่ายทะเล ขั้นตอนนี้เป็นซ้ำจนกว่าทางวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ของ cellulolytic
แบคทีเรียที่ได้มา cellulolytic แยกที่มีการดูแลรักษาเป็นอย่างดีที่ 4 ° C
บนสาหร่ายเซลลูโลส เทคนิคแผ่นกระจายอยู่ตามมาและอาณานิคม
ซึ่งปรากฏอยู่บนเจ๋อหมิได้แก้ไขเพิ่มเติมในสื่อ msm อีกครั้งเขา
เป็นลายที่มีขนาดกลางพร้อมด้วยเกลือแร่ 0.1 มีเดียเซลลูโลส%ใน
ตามมาตรฐานการสั่งซื้อในการนำวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์ของ cdb.