Cells were grown on cover slips and treated as described above.
Cells were washed with PBS, fixed (4% paraformaldehyde, 15 min,
37 °C), washed again (PBS), blocked in blocking solution (5% FBS,
0.1% Tween-20 in PBS, 1 h, RT) and incubated with 7-(diethylamino)-coumarin-3-carbohydrazide
(CHH; 0.2 mM, 2 h, RT). Cells
were washed (PBS; 3 times), nuclei were counterstained with
propidium-iodide, washed (PBS), and cover slips were mounted on
cover slides using Immunoselect Antifading mounting medium
(Dianova GmbH, Hamburg, Germany). Images processing was
performed equally and simultaneously to all groups and was carried
out using GIMP 1.2 software.
เซลล์ถูกปลูกบนปกจัดส่ง และรับการรักษาตามที่อธิบายไว้ข้างต้นเซลล์ถูกล้าง ด้วย PBS ถาวร (4% paraformaldehyde, 15 นาที37 ° C), หินอีก (PBS), บล็อกในบล็อกโซลูชัน (5% FBS0.1% Tween-20 ใน PBS, 1 h, RT) และ มี 7- (diethylamino) - coumarin - 3 incubated-carbohydrazide(CHH; 0.2 mM, 2 h, RT) เซลล์ถูกล้าง (PBS ครั้งที่ 3), แอลฟามี counterstained ด้วยไอโอ ไดด์ propidium หิน (PBS), และครอบคลุมการจัดส่งถูกติดตั้งบนครอบคลุมการใช้สื่อการติดตั้ง Antifading Immunoselect(Dianova GmbH ฮัมบูร์ก เยอรมนี) ภาพที่ประมวลผลได้ทำเท่า ๆ กัน และพร้อม ๆ กันไป และทำออกใช้ GIMP 1.2 ซอฟต์แวร์
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
เซลล์ที่ถูกปลูกในบิลครอบคลุมและได้รับการรักษาตามที่อธิบายไว้ข้างต้น.
เซลล์ที่ถูกล้างด้วยพีบีเอสได้รับการแก้ไข (4% paraformaldehyde, 15 นาที,
37 ° C) ล้างอีกครั้ง (พีบีเอส) ที่ถูกปิดกั้นในการแก้ปัญหาการปิดกั้น (5% FBS,
0.1% Tween -20 ในพีบีเอส, 1 ชั่วโมง, RT) และบ่มด้วย 7 (diethylamino) -coumarin-3-carbohydrazide
(CHH; 0.2 มิลลิ, 2 ชั่วโมง, RT) เซลล์ถูกล้าง (พีบีเอส 3 ครั้ง) นิวเคลียสถูก counterstained กับ propidium-ไอโอไดด์ล้าง (พีบีเอส) และบิลปกถูกติดตั้งอยู่บนสไลด์ปกโดยใช้สื่อการติดตั้งImmunoselect Antifading (Dianova GmbH, ฮัมบูร์ก, เยอรมนี) การประมวลผลภาพที่ได้รับการดำเนินการอย่างเท่าเทียมกันและพร้อมกันเพื่อทุกกลุ่มและได้รับการดำเนินการโดยใช้GIMP 1.2 ซอฟแวร์
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
เซลล์ที่ปลูกบนปกลื่นและรักษาตามที่อธิบายไว้ข้างต้น .
เซลล์มีการล้างด้วย pbs คงที่ 4 เปอร์เซ็นต์ ( พาราฟอร์มาลดิไฮด์ , 15 นาที , 37 /
c ) , ล้างอีกที ( PBS ) , บล็อกในบล็อกโซลูชั่น ( 5% FBS
0.1% tween-20 ใน PBS 1 H , RT ) และแยก 7 - ( diethylamino ) - coumarin-3-carbohydrazide
( ชิ ; 0.2 มม. 2 H , RT ) เซลล์
ถูกล้าง ( PBS 3 ครั้ง ) , นิวเคลียสเป็น counterstained ด้วย
propidium ไอโอไดด์ล้าง ( PBS ) และฝาหลุดติดบนฝาสไลด์ที่ใช้ immunoselect antifading
( ติดกลาง dianova GmbH , ฮัมบูร์ก , เยอรมนี ) ประมวลภาพ
ดำเนินการอย่างเท่าเทียมกันและพร้อมกันทุกกลุ่มและถูกนำออกมาใช้ GIMP
ดาวน์โหลดซอฟต์แวร์
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)