Sterile explants were placed on aga

Sterile explants were placed on agar-solidified MT
medium (Murashige and Tucker, 1969) supplemented
with 2.2 mg/L N6-benzyladenine, 1 mg/L indole-3-
butyric acid and 3% sucrose. The pH was adjusted to
5.8 prior to autoclaving at 121ºC for 15 min. All explants
were maintained at a temperature 24±2ºC under
16 h photopriod with light intensity of 3,000 lux.
Plantlets were subcultured to fresh medium at intervals
of 4 to 8 weeks for 10 months dividing the shoots into
1-cm-long segments.
WBDL phytoplasma was detected using polymerase
chain reaction (PCR). Total DNA was extracted from
leaves using cetyl trimethyl ammonium bromide
(CTAB) extraction method (Zhang et al., 1998). Two
primer pairs P3/P7 and P1/P7 were used to amplify
part of the 16S rRNA gene, the 16S–23S spacer region,
and a portion of the 5-end region of the 23S
rRNA gene from phytoplasmas.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Explants หมันถูกวางบนอาหารแข็ง MTขนาดกลาง (Murashige และ Tucker, 1969) เสริมมี 2.2 mg/L N6-benzyladenine, 1 mg/L อินโดล-3 -ซูโครสกรดบิวทีริกและ 3% ปรับค่า pH5.8 ก่อน autoclaving ที่ 121ºC 15 นาที ทั้งหมด explantsยังคงไว้ที่อุณหภูมิ 24±2ºC ภายใต้photopriod 16 ชม.กับความเข้มแสงของ 3,000 ลักซ์Plantlets ถูก subcultured สดปานกลางในช่วงเวลา4 ถึง 8 สัปดาห์ 10 เดือนแบ่งหน่อเป็นส่วนยาว 1 ซม.WBDL phytoplasma ตรวจพบโดยใช้พอลิเมอเรสปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจากใบใช้ cetyl trimethyl แอมโมเนียโบรไมด์วิธีการสกัด (CTAB) (Zhang et al. 1998) สองใช้รองพื้นคู่ P3/P7 และ P1/P7 ขยายส่วนของยีน 16S rRNA ภูมิภาคแผ่นรอง 16S – 23Sและส่วนภูมิภาค 5 สิ้นสุดของการ 23Sยีนใน rRNA จาก phytoplasmas

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ชิ้นหมันถูกวางไว้บนวุ้นผลึกมอนแทนา
ปานกลาง (Murashige และ Tucker, 1969) เสริม
ด้วย 2.2 มิลลิกรัม / ลิตร N6-benzyladenine 1 มิลลิกรัม / ลิตร indole-3-
butyric กรดและน้ำตาลซูโครส 3% ค่าพีเอชได้รับการปรับให้
5.8 ก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อที่121ºCนาน 15 นาที ชิ้นส่วนทั้งหมด
ถูกเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 24 ±2ºCภายใต้
16 ชั่วโมง photopriod กับความเข้มแสง 3,000 ลักซ์.
ต้นกล้าที่ได้เลี้ยงกลางสดในช่วงเวลา
ของ 4-8 สัปดาห์ที่ผ่านมา 10 เดือนแบ่งหน่อออกเป็น
กลุ่ม 1 ซม. ยาว.
WBDL phytoplasma ตรวจพบการใช้โพลิเมอร์
ปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจาก
ใบใช้ cetyl ไตรเมทิลแอมโมเนียมโบรไมด์
(CTAB) วิธีการสกัด (Zhang et al., 1998) สอง
ไพรเมอร์คู่ P3 / P7 และ P1 / P7 ถูกนำมาใช้เพื่อขยาย
ส่วนหนึ่งของยีน 16S rRNA ที่ 16S-23S spacer ภูมิภาค
และเป็นส่วนหนึ่งของภูมิภาค 5 จุดสิ้นสุดของ 23S
ยีน rRNA จากไฟโตพลาสมา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

在Sterile explants是placed agar-solidified MT培养基（塔克），1969 Murashige和补充。与2.2 N6-benzyladenine，1 mg / L mg / L吲哚丁酸和pH值调整为：蔗糖是一个。在一个5.8 prior autoclaving 121ºC为所有explants 15 min。在一个24±是一直保持着2ºC温度下与光强度的16 H photopriod 3,000力士。在继代培养Plantlets是intervals到清新。（4 8 10月周到，为将该拍摄1-cm-long段。利用聚合酶WBDL phytoplasma是detected聚合酶链反应（PCR）和DNA extracted是从。使用溴化铵cetyl trimethyl地提取方法（CTAB）（Zhang et al .，1998）两种。pairs引物P1和P3 / P7 / P7是用来amplify部分16S rRNA基因的间隔区，23S），16S和一个部分的序列的23S 5-end从phytoplasmas rRNA基因。