A set of six specific primers was d

A set of six specific primers was designed to successfully detect the SSU rRNA gene of E. hepatopenaei by a LAMP reaction of 45 min at 65°C combined with visual detection of the amplification product via hybridization at 65°C for 5 min with a ssDNA-labelled nanogold probe, followed by salt-induced AuNP aggregation (total assay time, approximately 50 min). This method gave similar results to LAMP followed by electrophoresis or spectrophotometric detection, and it was more sensitive (0·02 fg total DNA) than a conventional nested PCR (0·2 fg total DNA). The new method gave negative results with shrimp DNA templates extracted from diseased shrimp containing other pathogens, indicating that the LAMP-AuNP assay was specific for E. hepatopenaei.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ชุดไพรเมอร์เฉพาะที่หกถูกออกแบบให้เรียบร้อยแล้วตรวจหายีน SSU rRNA ของ E. hepatopenaei โดยปฏิกิริยาไฟ 45 นาทีที่ 65° C ร่วมกับการตรวจจับภาพของผลิตภัณฑ์ขยายผ่าน hybridization 65° c 5 นาทีกับโพรบมีป้าย ssDNA nanogold ตาม ด้วยเกิดเกลือ AuNP รวม (รวมทดสอบเวลา ประมาณ 50 นาที) วิธีนี้ให้ผลที่คล้ายกับโคมไฟตาม ด้วยอิหรือตรวจจับ spectrophotometric และก็เพิ่มเติมสำคัญ (0·02 fg รวมดีเอ็นเอมากกว่าแบบธรรมดาซ้อน PCR (0·2 fg รวมดีเอ็นเอ วิธีการใหม่ให้ผลเชิงลบกับกุ้งแม่แบบดีเอ็นเอที่สกัดจากตัวกุ้งที่ประกอบด้วยเชื้อโรคอื่น ๆ ระบุว่า ทดสอบไฟ-AuNP ได้เฉพาะสำหรับ E. hepatopenaei

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ชุดของหกไพรเมอร์ได้รับการออกแบบที่เฉพาะเจาะจงที่จะประสบความสำเร็จในการตรวจสอบยีนซุ rRNA ของอี hepatopenaei โดยปฏิกิริยาโคมไฟของ 45 นาทีที่ 65 ° C รวมกับการตรวจสอบภาพของสินค้าที่มีการขยายผ่านการผสมพันธุ์ที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีด้วย ssDNA สอบสวน nanogold -labelled ตามด้วยการรวม AuNP เกลือที่เกิดขึ้น (เวลาทดสอบทั้งหมดประมาณ 50 นาที) วิธีนี้ให้ผลคล้ายกับโคมไฟตามด้วยอิเล็กหรือการตรวจสอบสเปกและมันก็เป็นความสำคัญมากขึ้น (0 · 02 ​​FG ดีเอ็นเอทั้งหมด) กว่าเดิมที่ซ้อนกัน PCR (0 · 2 FG ดีเอ็นเอทั้งหมด) วิธีการใหม่ให้ผลลบกับแม่กุ้งดีเอ็นเอที่สกัดจากกุ้งที่เป็นโรคที่มีเชื้อก่อโรคอื่น ๆ ที่แสดงให้เห็นว่าการทดสอบโคมไฟ AuNP เป็นที่เฉพาะเจาะจงสำหรับอี hepatopenaei