dNA was extracted from gills, skele

dNA was extracted from gills, skeletal muscle, hepatopancreas, and cephalothorax appendages
using the dNeasy (Qiagen) kit methodology. pCR-amplification was conducted
on the extracted dNA using illustra™ puReTaq Ready-To-go pCR beads (gE healthcare)
containing a concentration of 200 μM dNTp’s in 10 mM Tris-hCl ph 9.0, 50 mM KCl and
1.5 mM MgCl2
in a 25-μl reaction volume and specific primer pairs for detection of wSSv,
wS500F: CCT TCC ATC TCC ACC ACA CTT and wS500R: CTg TTC CTT ggC AgA
gCA TTC that yields a 490 bp amplicon; wS800F: CTC ACC TgC gCT TCT CAC CTC
ATg CTT and wS800R: gCC ggC CAg TTC gTT CAC gAT AAC CTT that yields a 783 bp
amplicon (Nunan et al., 1998, d. Lightner, University of Arizona, pers. comm.). Both one-step
and nested reactions were carried out using these primers with the wS500F/R as the internal
primer set. A nested two-step pCR using the world Animal health Organization (or Office

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ดีเอ็นเอที่สกัดจากเหงือกกล้ามเนื้อโครงร่างตับและอวัยวะ cephalothorax
ใช้ dNeasy (Qiagen) วิธีการชุด PCR-ขยายได้ดำเนินการเกี่ยวกับการสกัดดีเอ็นเอโดยใช้ภาพประกอบ™ puReTaq พร้อมที่จะไปลูกปัด PCR (การดูแลสุขภาพ GE) ที่มีความเข้มข้นของ 200 ไมครอน dNTp ใน 10 มิลลิ Tris-HCl พีเอช 9.0, 50 มิลลิ KCl และ1.5 มิลลิ MgCl2 ใน 25 ปริมาณการเกิดปฏิกิริยา-μlและคู่ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจงสำหรับการตรวจสอบของ WSSV, wS500F: ซีซีทีทีซีซีทีซีซีแม็ก ATC ACA CTT และ wS500R: CTG TTC CTT GGC AGA GCA TTC ที่อัตราผลตอบแทน 490 bp amplicon; wS800F: CTC แม็ก TGC GCT TCT CAC CTC ATG CTT และ wS800R: GCC GGC CAG TTC GTT CAC GAT AAC CTT ที่อัตราผลตอบแทน 783 bp amplicon (... Nunan et al, 1998, D Lightner, มหาวิทยาลัยแอริโซนา pers Comm.) . ทั้งสองขั้นตอนเดียวและปฏิกิริยาที่ซ้อนกันได้ดำเนินการโดยใช้ไพรเมอร์เหล่านี้กับ wS500F / R เป็นภายในชุดไพรเมอร์ ซ้อนสองขั้นตอน-PCR โดยใช้สัตว์โลกองค์การสุขภาพ (หรือสำนักงาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดีเอ็นเอจากเหงือก โครงสร้างกระดูกกล้ามเนื้อ ตับ และซีฟาโลโทแรกซ์ appendages
ใช้ dneasy ( เพิ่ม 2 ชุด PCR ( ดำเนินการ
บนสกัดดีเอ็นเอโดยใช้ illustra ™ puretaq พร้อมที่จะไปจากลูกปัด ( GE Healthcare )
ที่มีความเข้มข้น 200 μ M dntp ใน 10 มิลลิเมตรโดย HCl พีเอช 9.0 KCl 50 มม. และ

ชุด 1.5 มม.ใน 25 - μ L ปฏิกิริยาและปริมาณที่เฉพาะเจาะจง ไพรเมอร์คู่ตรวจหาี
ws500f : CCT ทีซีซี , ATC TCC บัญชี WAY และทั่วโลก ws500r : CTG ttc ซีทีที ggc AGA
GCA TTC ที่ผลผลิตและเป็น 490 BP ; ws800f : CTT ws800r ATG และ CTC
CTC บัญชี TGC GCT TCT กั๊ก : GCC ggc CAG ทีทีซี gtt the GAT AAC ซีทีทีที่สามารถไปและ BP
( นู๋แนน et al . , 1998 , ดีไลท์เนอร์ , University of Arizona , ข่าวสาร การสื่อสาร ) ทั้งขั้นตอนเดียว
ด้วยปฏิกิริยาและทดลองใช้ไพรเมอร์เหล่านี้กับ ws500f / R เป็นภายใน
primer ตั้งค่า เป็นแบบซ้อนกัน 2 วิธี PCR โดยใช้โลกองค์กรหรือสำนักงานสุขภาพสัตว์