Whey protein isolate 895 (WPI) was supplied by Fonterra, New
Zealand. OVA was purified from day-fresh chicken egg white using
DEAE (2-(diethylamino)ethyl) Sephacel anion exchange resin (De
Groot & de Jongh, 2003) with stepwise elution of increasing NaCl
concentration (20–200 mM), dialysis against distilled water, and
0.22 lm sterile filtration. SPI and KPI were prepared from freshly
ground soy bean and kidney bean flour using slightly modified
extraction methods (Akkermans et al., 2007; Tang, Zhang, Wen, &
Huang, 2010). Briefly, fresh bean flour was stirred in extraction
buffer for 45 min (SPI extraction buffer: 30 mM Tris, 10 mM
b-mercaptoethanol, pH 8; KPI extraction buffer: 0.5 M NaCl,
25 mM HCl, pH 1.6). The flour suspension was centrifuged and
the supernatant was filtered (No.4 filter paper, Whatman), dialysed
against distilled water, adjusted to pH 1.6 with concentrated HCl,
0.22 lm sterile filtered, and stored at 4 C until further use.
Bovine insulin was purchased from Sigma–Aldrich (Castle Hill,
Australia). Protein concentrations were determined with the
Biuret assay.
เวย์โปรตีนแยกราคา 895 (WPI) ถูกกำหนด โดย Fonterra ใหม่นิวซีแลนด์ OVA ที่บริสุทธิ์ที่ใช้สีขาวไข่ไก่สดวันDEAE (2-(diethylamino)ethyl) Sephacel anion exchange resin (DeGroot และเด Jongh, 2003) กับ stepwise elution เพิ่ม NaClความเข้มข้น (20 – 200 mM) หน่วยเทียบกับน้ำกลั่น และ0.22 lm กรองฆ่าเชื้อ SPI และ KPI ที่เตรียมจากสดดินถั่วและถั่วแป้งใช้แก้ไขเล็กน้อยวิธีสกัด (Akkermans et al., 2007 ถัง จาง Wen, &ฮวง 2010) สั้น ๆ แป้งสดถั่วที่กวนในสกัดบัฟเฟอร์สำหรับ 45 นาที (SPI แยกบัฟเฟอร์: 30 มม.ตรี 10 มม.b mercaptoethanol, pH 8 KPI แยกบัฟเฟอร์: 0.5 M NaCl25 มม. HCl, pH 1.6) มี centrifuged ระงับแป้ง และsupernatant ไม่กรอง (ฉบับที่ 4 กระดาษกรอง Whatman) , dialysedกับกลั่นน้ำ ปรับ pH 1.6 กับ HCl เข้มข้น$ 0.22 lm กระบอกกรอง และเก็บไว้ที่ 4 C จนใช้การอินซูลินวัวถูกซื้อจากซิก-Aldrich (คาสเซิลฮิลล์ออสเตรเลีย) ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดด้วยการBiuret วิเคราะห์
การแปล กรุณารอสักครู่..

เวย์โปรตีนแยกได้ 895 (WPI) ได้รับการจัดจำหน่ายโดยฟอนเทียร่า, New
Zealand พหูพจน์บริสุทธิ์จากไก่สดวันไข่ขาวใช้
DEAE (2- (diethylamino) เอทิล) Sephacel เรซินแลกเปลี่ยนไอออน
(เดอกรูตและเดอJongh, 2003)
ที่มีการชะแบบขั้นตอนของการเพิ่มโซเดียมคลอไรด์ความเข้มข้น(20-200 มิลลิเมตร) การฟอกเลือดกับกลั่น น้ำและ
0.22 ไมครอนกรองผ่านการฆ่าเชื้อ SPI
และตัวชี้วัดที่เตรียมจากสดพื้นดินถั่วเหลืองและแป้งถั่วไตโดยใช้การแก้ไขเล็กน้อยวิธีการสกัด
(Akkermans et al, 2007;.
รสจางเหวินและหวาง2010) สั้น ๆ ,
แป้งถั่วสดถูกกวนในการสกัดบัฟเฟอร์เวลา45 นาที (SPI บัฟเฟอร์สกัด: 30 มิลลิ Tris 10 มิลลิ
B-mercaptoethanol ค่า pH 8; KPI บัฟเฟอร์สกัด: 0.5 M NaCl,
25 มิลลิ HCl, pH 1.6) ระงับแป้งถูกปั่นและใสถูกกรอง (ฉบับที่ 4 กระดาษกรอง Whatman) ไตกับน้ำกลั่นปรับค่าพีเอช1.6 ที่มีเข้มข้น HCl 0.22 LM หมันกรองและเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสจนกว่าจะใช้งานต่อไป. อินซูลินเป็นวัว ที่ซื้อมาจาก Sigma-Aldrich (ปราสาทฮิลล์ออสเตรเลีย) ความเข้มข้นของโปรตีนได้รับการพิจารณาด้วยการทดสอบ Biuret
การแปล กรุณารอสักครู่..

เวย์โปรตีนไอโซเลท 895 ( WPI ) ถูกจัดโดยฟอนเทียร่าใหม่
นิวซีแลนด์ OVA บริสุทธิ์จากวัน ไข่ไก่สดสีขาวโดยใช้ DEAE (
2 - ( diethylamino ) สารเรซินแลกเปลี่ยนไอออน ) เอนไซม์ ( de Groot
& de jongh , 2003 ) ด้วยการใช้เกลือที่ความเข้มข้นแบบ
( 20 - 200 มม. ) , ฟอกไตกับน้ำกลั่นและ
0.22 LM ปลอดเชื้อกรอง SPI และ KPI ที่เตรียมจาก
สดๆถั่วเหลืองและถั่วบดแป้งโดยใช้การแก้ไขเล็กน้อย
วิธีการสกัด ( akkermans et al . , 2007 ; แม่แตง จาง เหวิน&
Huang , 2010 ) สั้น ๆ , แป้งถั่วสดถูกกวนในบัฟเฟอร์การสกัด
สำหรับ 45 นาที ( SPI ใช้สาร 30 มม. หรือ 10 มม.
b-mercaptoethanol pH 8 ; KPI ที่ใช้สาร 0.5 M NaCl
25 มม. กรดไฮโดรคลอริก pH 1.6 ) แป้งระงับได้ระดับและ
และน่านถูกกรอง ( 4 ไส้กรองกระดาษ whatman ) dialysed
กับน้ำกลั่นปรับพีเอชเป็น 1.6 กับเข้มข้น HCl ,
0.22 LM ปลอดเชื้อกรอง , และเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส จนถึงการใช้งานต่อไป .
อินซูลินวัวซื้อมาจาก Sigma –ดิช (
ออสเตรเลียฮิลล์ , ปราสาท ) ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดด้วย
biuret การทดสอบ
การแปล กรุณารอสักครู่..
