Rumen fluid (10 ml) for enzyme esti

Rumen fluid (10 ml) for enzyme estimation was centrifuged at 14,000g for 20 min at 4 °C to obtain supernatant for extra-cellular enzyme activity and pellet for intra-cellular enzyme activity. The crude enzyme solutions from the supernatants and pellets were extracted following the procedure described previously ( Agrawal et al., 2000). Activities of cellulase, xylanase and amylase were assayed by using the dinitrosalicylic acid method ( Miller, 1959). The assay mixture contained 1 ml phosphate buffer, 0.5 ml enzyme sample and 0.5 ml of carboxymethyl cellulose solution (10 g/l) with incubation time of 1 h at 39 °C for estimation of cellulase; 0.5 ml phosphate buffer, 0.25 ml starch solution (10 g/l) and 0.25 ml sample with incubation time of 30 min at 39 °C for estimation of α-amylase; and 1 ml phosphate buffer, 0.5 ml enzyme sample and 0.5 ml xylan solution (2.5 g/l) with incubation time of 30 min at 39 °C for estimation of xylanase. The amounts of glucose or xylan released (reducing sugar) was measured colorimetrically ( Miller, 1959). The enzyme activities were expressed as μmol of reducing sugars released per h per ml under assay conditions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ต่อน้ำมัน (10 มล.) สำหรับเอนไซม์ประเมินถูก centrifuged ที่ 14000 g สำหรับ 20 นาทีที่ 4 ° C รับ supernatant สำหรับโทรศัพท์มือถือนอกเอนไซม์และเม็ดสำหรับเอนไซม์ภายในเซล โซลูชั่นเอนไซม์ดิบจาก supernatants และขี้ถูกสกัดวิธีอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Agrawal และ al., 2000) กิจกรรม cellulase ไซลาเนส และ amylase ได้ assayed โดยวิธีกรดของ dinitrosalicylic (มิลเลอร์ 1959) ผสมทดสอบประกอบด้วย 1 ml ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ตัวอย่างเอนไซม์ 0.5 ml และ 0.5 ml ของ carboxymethyl เซลลูโลส (10 g/l) กับคณะทันตแพทยศาสตร์เวลา 1 ชั่วโมงที่ 39 ° C สำหรับการประเมิน cellulase บัฟเฟอร์ฟอสเฟต 0.5 ml, 0.25 ml แป้งโซลูชัน (10 g/l) และตัวอย่าง 0.25 ml บ่มเวลา 30 นาทีที่ 39 ° C สำหรับการประเมินของα-amylase 1 ml ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ตัวอย่างเอนไซม์ 0.5 ml และ 0.5 ml xylan โซลูชัน (2.5 g/l) กับคณะทันตแพทยศาสตร์เวลา 30 นาทีที่ 39 ° C สำหรับการประเมินของไซลาเนสด้วย มีวัดจำนวนกลูโคสหรือ xylan ออก (ลดน้ำตาล) colorimetrically (มิลเลอร์ 1959) กิจกรรมของเอนไซม์ที่ถูกแสดงเป็น μmol ลดน้ำตาลออกต่อ h ต่อมิลลิลิตรภายใต้เงื่อนไขการทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กระเพาะรูเมนของของไหล (10 มล.) สำหรับการประมาณเอนไซม์ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 14,000g 20 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเพื่อให้ได้สารละลายสำหรับกิจกรรมของเอนไซม์พิเศษโทรศัพท์มือถือและเม็ดสำหรับกิจกรรมของเอนไซม์ภายในเซลล์ โซลูชั่นเอนไซม์จาก supernatants และเม็ดสกัดต่อไปนี้ขั้นตอนที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Agrawal et al., 2000) กิจกรรมของเซลลูเลส, ไซลาเนสและอะไมเลสที่ได้รับการตรวจโดยใช้วิธีกรด dinitrosalicylic (มิลเลอร์, 1959) ส่วนผสมทดสอบที่มีอยู่ 1 มิลลิลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.5 มลตัวอย่างเอนไซม์และ 0.5 มล. ของการแก้ปัญหา Carboxymethyl cellulose, (10 g / l) มีเวลาฟักตัวประมาณ 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 39 องศาเซลเซียสเป็นเวลาประมาณเซลลูเลส; 0.5 มลฟอสเฟตบัฟเฟอร์, 0.25 มิลลิลิตรแป้ง (10 g / l) และ 0.25 มลตัวอย่างกับเวลาฟักตัวประมาณ 30 นาทีที่ 39 องศาเซลเซียสเป็นเวลาประมาณαอะไมเลส; และฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 1 มิลลิลิตร 0.5 มลตัวอย่างเอนไซม์และ 0.5 มิลลิลิตรไซแลน (2.5 g / l) มีเวลาฟักตัวประมาณ 30 นาทีที่ 39 องศาเซลเซียสเป็นเวลาประมาณไซลาเนส ปริมาณของน้ำตาลกลูโคสหรือไซแลนปล่อยออกมา (ลดน้ำตาล) วัด colorimetrically (มิลเลอร์, 1959) เอนไซม์ถูกแสดงเป็นไมโครโมลของน้ำตาลลดการปล่อยออกมาต่อชั่วโมงต่อมิลลิลิตรภายใต้เงื่อนไขการทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาหารเหลว ( 10 มล. ) เพื่อประเมินระดับเอนไซม์ที่ 14000g สำหรับ 20 นาทีที่ 4 ° C เพื่อให้ได้นำกิจกรรมเสริมและกิจกรรมเอนไซม์ของเซลล์เม็ดเอนไซม์ภายในเซลล์ . เอนไซม์โซลูชั่นจาก supernatants และเม็ดที่ทำตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( Agrawal et al . , 2000 ) กิจกรรมของเซลลูเลสอะไมเลสเป็นเอนไซม์ไซลาเนสและโดยการใช้วิธีกรด dinitrosalicylic ( มิลเลอร์ , 1959 ) วิเคราะห์ส่วนผสมที่มีอยู่ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 1 ml 0.5 ml เอนไซม์ตัวอย่างและ 0.5 มิลลิลิตรของสารละลายคาร์บอกซีเมทิลเซลลูโลส ( 10 กรัม / ลิตร ) กับระยะเวลา 1 H 39 ° C ในการประมาณค่าของเซลลูเลส 0.5 มิลลิลิตร ; ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ , 0.25 ml . แป้ง โซลูชั่น ( 10 กรัม / ลิตร ) และ 025 มิลลิลิตร ตัวอย่าง มีระยะเวลา 30 นาทีที่ 39 ° C ค่าแอลฟาอะไมเลส และฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 1 ml 0.5 ml เอนไซม์ตัวอย่างและ 0.5 ml สารละลายไซ ( 2.5 กรัม / ลิตร ) กับระยะเวลา 30 นาทีที่ 39 ° C ในการประมาณค่าของเอนไซม์ . ปริมาณกลูโคสหรือไซแลนออก ( ลดน้ำตาล ) วัด colorimetrically ( มิลเลอร์ , 1959 )กิจกรรมของเอนไซม์ถูกแสดงเป็นμโมลของลดน้ำตาลออกต่อชั่วโมงต่อมิลลิลิตรภายใต้เงื่อนไขการทดสอบ