Spheri-5, PerkinElmer, Waltham, Massachusetts, USA). Isocratic
chromatographic separation was carried out using a mobile phase
of Milli-Q water with acetic acid (0.1 mL/100 mL) and methanol in
a relative proportion of 95:5 (mL:mL). The eluent flow-rate was
0.7 mL/min, and the column temperature was 30 C. Ascorbic acid
was identified by comparing the retention time of the sample peak
with that of the ascorbic acid standard at 254 nm. Quantification
was carried out using external standardization.
The term vitamin C refers to AA and DHA because both have
vitamin activity. The quantification of AA before and after the
reduction of DHA to AA using DL-dithiothreitol allows an indirect
estimation of DHA levels. To measure the total concentration of
vitamin C, 1.5 g of sample and 4 mL of 0.0154 g mL1
DL-dithiothreitol
were added into a 15 mL centrifuge tube. The tube was
shaken for 30 s and then placed in a dark room for 20 min. Later,
1.5 mL of 0.045 g mL1 metaphosphoric acid solution was added to
the contents of the 15 mL centrifuge tube. The tube was shaken for
another 30 s and subsequently centrifuged (Cientec, model 500R,
Brazil) for 10 min at 5 C (3000 g). Afterward, the solution was
filtered through a PTFE membrane of 0.45 mm, and 40 mL was
injected into the HPLC system.
To quantify ascorbic acid content, 5 g of sample and 5 mL of
0.045 g mL1 metaphosphoric acid solution were placed into
a 15 mL centrifuge tube. The tube was shaken for 30 s and centrifuged
(Cientec, model 500R, Brazil) for 10 min at 5 C (3000 g).
Finally, the solutionwas filtered using a PTFE membrane of 0.45 mm,
and 40 ml was injected into the HPLC system. All the HPLC analyses
were done, at least, in triplicate.
The reliability of the method was evaluated in terms of sensitivity,
precision and recovery. The detection and quantification
limits were 0.88 and 2.92 mg mL1, respectively. The precision of
the method ranged from 0.2 to 1.3%, and the rate of recovery was
above 95%.
Spheri-5, PerkinElmer วอลแทม, Massachusetts, USA) Isocratic
แยกสารได้ดำเนินการโดยใช้เฟสเคลื่อนที่ของน้ำ Milli-Q ที่มีกรดอะซิติก (0.1 mL / 100 มิลลิลิตร) และเมทานอลในสัดส่วนที่สัมพันธ์กันของ95: 5 (มิลลิลิตร: มิลลิลิตร) อัตราการไหลชะเป็น0.7 มิลลิลิตร / นาทีและอุณหภูมิคอลัมน์เป็น 30 องศาเซลเซียส วิตามินซีที่ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาสูงสุดตัวอย่างกับที่ของมาตรฐานวิตามินซีที่254 นาโนเมตร ปริมาณได้รับการดำเนินการโดยใช้มาตรฐานภายนอก. วิตามินซีหมายถึง AA และ DHA เพราะทั้งสองมีกิจกรรมวิตามิน ปริมาณ AA ก่อนและหลังการลดลงของดีเอชเอที่จะใช้ AA DL-dithiothreitol ช่วยทางอ้อมประมาณระดับดีเอชเอ การวัดความเข้มข้นรวมของวิตามิน C, 1.5 กรัมของตัวอย่างและ 4 มิลลิลิตร 0.0154 กรัมมิลลิลิตร 1 DL-dithiothreitol ถูกเพิ่มลงในหลอด centrifuge 15 มิลลิลิตร หลอดถูกเขย่าเป็นเวลา 30 วินาทีแล้ววางไว้ในห้องมืดเป็นเวลา 20 นาที ต่อมา1.5 มิลลิลิตร 0.045 กรัมมิลลิลิตร 1 สารละลายกรด metaphosphoric ถูกบันทึกอยู่ในเนื้อหาของหลอดcentrifuge มิลลิลิตร 15 หลอดถูกเขย่าสำหรับอีก 30 และต่อมาหมุนเหวี่ยง (Cientec, 500R รุ่นบราซิล) เป็นเวลา 10 นาทีที่ 5? C (3000? g) ต่อจากนั้นการแก้ปัญหาที่ถูกกรองผ่านเยื่อ PTFE 0.45 มิลลิเมตรและ 40 มิลลิลิตรฉีดเข้าไปในระบบHPLC. ต้องการปริมาณเนื้อหาวิตามินซี 5 กรัมของกลุ่มตัวอย่างและ 5 มิลลิลิตร0.045 กรัมมิลลิลิตร 1 สารละลายกรด metaphosphoric ถูกวางลงใน15 มิลลิลิตรหลอดหมุนเหวี่ยง หลอดถูกเขย่าเป็นเวลา 30 และหมุนเหวี่ยง(Cientec, 500R รุ่นบราซิล) เป็นเวลา 10 นาทีที่ 5? C (3000? g). สุดท้าย solutionwas กรองโดยใช้เยื่อ PTFE 0.45 มิลลิเมตรและ40 มล. ได้รับการฉีดเข้าไปใน ระบบ HPLC ทั้งหมดวิเคราะห์ HPLC ได้ทำอย่างน้อยในเพิ่มขึ้นสามเท่า. ความน่าเชื่อถือของวิธีการที่ได้รับการประเมินในแง่ของความไวความแม่นยำและการกู้คืน การตรวจสอบและการหาปริมาณข้อ จำกัด อยู่ที่ 0.88 และ 2.92 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร 1 ตามลำดับ ความแม่นยำของวิธีการที่อยู่ในช่วง 0.2-1.3% และอัตราของการกู้คืนได้สูงกว่า95%
การแปล กรุณารอสักครู่..

Perkinelmer spheri-5 , , Waltham , Massachusetts , USA ) Isocratic
ดิ้นรนได้ดําเนินการโดยใช้เฟสเคลื่อนที่ของน้ำด้วย
milli-q กรดอะซิติก 0.1 มล. / 100 มิลลิลิตร ) และเมทานอลใน
สัดส่วนสัมพัทธ์ของ 95:5 ( ml : ml ) อัตราการไหลของสารละลายคือ
0.7 มิลลิลิตรต่อนาทีและอุณหภูมิ 30 คอลัมน์ C วิตามินซี
ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบความคงทนในการจำของตัวอย่างสูงสุด
ด้วยมาตรฐานของ กรดแอสคอร์บิกที่ 254 นาโนเมตร ปริมาณการใช้มาตรฐานภายนอก
.
คำว่าวิตามิน C หมายถึง AA และ DHA เพราะทั้งสองมี
กิจกรรมวิตามิน มีปริมาณ AA ก่อนและหลัง
ลด DHA AA ใช้บัตรแข็งให้ DL แบบทางอ้อม
ของ DHA ในระดับ วัดความเข้มข้นรวมของ
วิตามินซี 15 กรัมของตัวอย่างและ 4 มิลลิลิตร 0.0154 กรัมมิลลิลิตร 1
DL บัตรแข็งเพิ่มเป็น 15 ml centrifuge หลอด หลอดมัน
เขย่า 30 S แล้ววางไว้ในห้องมืดนาน 20 นาทีต่อมา
1.5 มิลลิลิตร 0.045 กรัมต่อสารละลาย 1 เมตทาฟอสฟอริกแอซิดเพิ่ม
เนื้อหาของ centrifuge หลอด 15 ml . หลอดที่ถูกเขย่าสำหรับ
อีก 30 และต่อมาไฟฟ้า ( cientec แบบ 500r
, ,บราซิล ) สำหรับ 10 นาทีที่ 5 C ( 3 , 000 กรัม ) หลังจากนั้น สารละลายกรองผ่านเมมเบรน PTFE
0.45 มม. และ 40 มล. ฉีดเข้าระบบ HPLC ได้
.
ที่มีปริมาณวิตามินซี 5 กรัมของตัวอย่างและ 5 มิลลิลิตรปริมาตร 0.045 g
1 เมตทาฟอสฟอริกแอซิดโซลูชั่นถูกวางลงในการเหวี่ยงหลอด 15 ml . หลอดที่ถูกเขย่า 30 s ไฟฟ้า
( cientec 500r , โมเดล ,บราซิล ) สำหรับ 10 นาทีที่ 5 C ( 3 , 000 g )
ในที่สุด solutionwas กรองโดยใช้เมมเบรน PTFE 0.45 มม.
และ 40 ml ฉีดเข้าไปในระบบ 2 . การวิเคราะห์ HPLC
ทั้งหมด ทำ อย่างน้อย ทั้งสามใบ
ความน่าเชื่อถือของวิธีการประเมินในแง่ของความไว
ความแม่นยำและการกู้คืน การตรวจหาปริมาณจำกัดและ 0.88 และ 2.92 มิลลิกรัม )
1 มิลลิลิตร ตามลำดับความแม่นยำของ
วิธีอยู่ระหว่าง 0.2 ถึง 1.3 % และอัตราการกู้คืนถูก
ข้างต้น 95%
การแปล กรุณารอสักครู่..
