tPolygalacturonase and pectinase ac

tPolygalacturonase and pectinase activities reported in the literature were measured by several differ-ent procedures. These procedures do not give comparable results, partly owing to the complexity of thesubstrates involved. This work was aimed at developing consistent and efficient assays for polygalacturo-nase and pectinase activities, using polygalacturonic acid and citrus pectin, respectively, as the substrate.Different enzyme mixtures produced by Aspergillus niger and Trichoderma reesei with different inducingcarbon sources were used for the method development. A series of experiments were conducted to eval-uate the incubation time, substrate concentration, and enzyme dilution. Accordingly, for both assays therecommended (optimal) hydrolysis time is 30 min and substrate concentration is 5 g/L. For polygalactu-ronase, the sample should be adjusted to have 0.3–0.8 U/mL polygalacturonase activity, because in thisrange the assay outcomes were consistent (independent of dilution factors). Such a range did not existfor the pectinase assay. The recommended procedure is to assay the sample at multiple (at least 2) dilu-tion factors and determine, by linear interpolation, the dilution factor that would release reducing sugarequivalent to 0.4 g/L d-galacturonic acid, and then calculate the activity of the sample accordingly (dilu-tion factor × 0.687 U/mL). Validation experiments showed consistent results using these assays. Effectsof substrate preparation methods were also examined.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

tPolygalacturonase และ pectinase กิจกรรมรายงานในวรรณคดีที่วัด โดยตอนเอนท์แตกต่างกันหลาย ขั้นตอนเหล่านี้ให้ผลการเปรียบเทียบได้ ส่วนหนึ่งเป็น เพราะความซับซ้อนของ thesubstrates ที่เกี่ยวข้อง งานนี้มุ่งพัฒนา assays สอดคล้อง และมีประสิทธิภาพสำหรับกิจกรรม polygalacturo nase และ pectinase ใช้กรด polygalacturonic และเพ กทินส้ม ตามลำดับ เป็นพื้นผิว น้ำยาผสมเอนไซม์ต่าง ๆ ที่ผลิต โดย Aspergillus ไนเจอร์และ Trichoderma reesei กับแหล่งอื่น inducingcarbon ถูกใช้สำหรับการพัฒนาวิธีการ ชุดการทดลองได้ดำเนินการ eval uate เวลาบ่ม พื้นผิวเข้มข้น และเอนไซม์เจือจาง ดังนั้น สำหรับ assays ทั้ง therecommended ไฮโตรไลซ์ (สูงสุด) เวลาเป็น 30 นาทีและพื้นผิวความเข้มข้น 5 g/l สำหรับ polygalactu-ronase ตัวอย่างควรจะปรับปรุงให้ 0.3 – 0.8 U/mL polygalacturonase กิจกรรม เนื่องจากใน thisrange ผลการทดสอบมีความสอดคล้อง (อิสระปัจจัยเจือจาง) ช่วงดังกล่าวได้วิเคราะห์ pectinase ไม่ existfor ขั้นตอนแนะนำคือ assay อย่างที่หลายปัจจัยสเตรชันแรมดีลู (ที่ 2) และ กำหนด โดยสอดแทรกเชิงเส้น อัตราเจือจางที่จะปล่อย sugarequivalent ลดให้กรด d-galacturonic 0.4 g/L และจากนั้น คำนวณกิจกรรมของตัวอย่างตาม (สเตรชันแรมดีลูตัวคูณ× 0.687 U/mL) ตรวจสอบทดลองพบผลสอดคล้องกันที่ใช้ assays เหล่านี้ วิธีการเตรียมพื้นผิว Effectsof ยังได้รับการตรวจสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

tPolygalacturonase และกิจกรรมเพคติเนสรายงานในวรรณคดีถูกวัดโดยวิธีการที่แตกต่างกันหลาย-กิจการ ขั้นตอนเหล่านี้ไม่ให้ผลการเปรียบเทียบส่วนหนึ่งเนื่องจากความซับซ้อนของ thesubstrates ที่เกี่ยวข้อง งานนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาชุดตรวจที่สอดคล้องและมีประสิทธิภาพสำหรับกิจกรรม polygalacturo-nase และเพคติเนสโดยใช้กรด polygalacturonic เพคตินและส้มตามลำดับในขณะที่ผสมเอนไซม์ substrate.Different ผลิตโดยเชื้อรา Aspergillus ไนเจอร์และเชื้อรา Trichoderma reesei กับแหล่ง inducingcarbon ที่แตกต่างกันถูกนำมาใช้สำหรับวิธีการ การพัฒนา ชุดทดลองเพื่อ eval-uate เวลาบ่มความเข้มข้นของสารตั้งต้นและเจือจางเอนไซม์ ดังนั้นสำหรับการตรวจทั้ง therecommended (ดีที่สุด) การย่อยสลายเป็นเวลา 30 นาทีและความเข้มข้นของสารตั้งต้นคือ 5 กรัม / ลิตร สำหรับ polygalactu-ronase ตัวอย่างควรมีการปรับให้มี 0.3-0.8 U / มิลลิลิตรกิจกรรม polygalacturonase เพราะใน thisrange ผลการทดสอบเป็นที่สอดคล้องกัน (อิสระของปัจจัยการเจือจาง) ช่วงดังกล่าวไม่ได้ existfor ทดสอบเพคติเน ขั้นตอนที่แนะนำคือการ assay ตัวอย่างที่หลาย ๆ (อย่างน้อย 2) ปัจจัย dilu-การและตรวจสอบโดยการสอดแทรกเชิงเส้นปัจจัยเจือจางที่จะปล่อยลด sugarequivalent 0.4 กรัม / ลิตร D-galacturonic acid และจากนั้นคำนวณการทำงานของ ตัวอย่างตาม (ปัจจัย dilu-การ× 0.687 U / มิลลิลิตร) การตรวจสอบการทดลองแสดงให้เห็นผลที่สอดคล้องกันโดยใช้ชุดตรวจเหล่านี้ การเตรียมพื้นผิว Effectsof วิธีการมีการตรวจสอบยัง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

และกิจกรรม tpolygalacturonase เป็นการรายงานในวรรณคดีมีหลายวัด โดยมีขั้นตอนการใส่ . ขั้นตอนเหล่านี้ไม่ให้ผลการเทียบเคียงบางส่วนเนื่องจากความซับซ้อนของ l ที่เกี่ยวข้อง งานนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการพัฒนาที่สอดคล้องและมีประสิทธิภาพใช้สำหรับกิจกรรมและ nase polygalacturo เอนไซม์โดยใช้กรด polygalacturonic ส้มและเพคตินตามลำดับ , เป็นสาร ต่าง ๆที่ผลิตโดยเอนไซม์จาก Aspergillus niger และ Trichoderma reesei กับแหล่ง inducingcarbon ต่างกันใช้สำหรับการพัฒนาวิธีการ ชุดของการทดลองเพื่อการประเมินผล uate บ่มเพาะเวลาที่ความเข้มข้นสารอาหารและเอนไซม์เจือจาง ตามสำหรับทั้ง 2 วิธี therecommended ( ที่ดีที่สุด ) เวลา 30 นาทีและการตั้งต้นความเข้มข้น 5 กรัม / ลิตร สำหรับ polygalactu ronase กลุ่มตัวอย่าง ควรปรับให้มี 0.3 - 0.8 U / ml เนื่องจากกิจกรรม polygalacturonase ใน thisrange assay ผลลัพธ์ที่สอดคล้อง ( อิสระของปัจจัยเจือจาง ) เช่นช่วงไม่ existfor เอนไซม์ ( . . .แนะนำขั้นตอนคือ การทดสอบตัวอย่างที่หลาย ๆ ( อย่างน้อย 2 ) dilu tion และปัจจัยกำหนด โดยสอดแทรกเชิงเส้น , การลดปัจจัยที่จะปล่อย sugarequivalent 0.4 กรัม / ลิตร d-galacturonic กรด แล้วคำนวณกิจกรรมของตัวอย่างตาม ( dilu tion ปัจจัย×ข้อมูลข่าวสาร U / ml ) การตรวจสอบการทดลองให้ผลสอดคล้องกันโดยใช้วิธีการเหล่านี้ผลของวิธีการเตรียมพื้นผิว นอกจากนี้ยังตรวจสอบ