2.9. Fatty acid analysis
Lipids were extracted using chloroform/methanol solution (2:1, v/v) according to Folch et al. (1957). Fatty acid methyl esters (FAME) analyses were performed according to method described by Van Nieuwenhove et al. (2009, 2011). Briefly, lipids were hydrolyzed by addition of 3 mL of 0.9% (w/v) NaOH in methanol at 50 8C for 35 min. Fatty acids were methylated using 4% (v/v) HCl in methanol at 60 8C for 20 min, then extracted with hexane and evaporated under a nitrogen stream. One microlitre of FAME, dissolved in hexane, was injected to an Agilent Technologies (Palo Alto, CA, USA) gas chromatograph (Model 6890N, USA) equipped with a flame ionization detector and automatic injector (Model 7683, USA) into a HP-88 capillary column (100 m 0.25 mm 0.20 mm, Agilent Technologies, USA). GC
conditions were: injector temperature, 255 8C; the initial oven temperature of 75 8C was increased to 165 8C at 8 8C/min and held there for 35 min, increased to 210 8C at 5.5 8C/min and held for 2 min and then increased to 240 8C at 15 8C/min and held for 3 min. Detector temperature was 280 8C. Oxygen-free nitrogen was used as carrier gas at flow rate of 18 mL/min, at 38 psi. The total time of the oven programme was 72 min. Fatty acids were identified by comparison of retention times with the methylated standards (99% pure; Sigma, St. Louis, MO, USA). Results were expressed as g/100 g of fatty acids. All reagents and solvents used were from Merck (Darmstadt, Germany).
2.9 การวิเคราะห์กรดไขมันไขมันถูกสกัดโดยใช้คลอโรฟอร์ม / แก้ปัญหาเมทานอล (2: 1, v / v) ตาม Folch et al,
(1957) ไขมันเมทิลเอสเตอร์ของกรด (FAME) วิเคราะห์ได้ดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายไว้โดยรถตู้ Nieuwenhove et al, (2009 2011) สั้น ๆ , ไขมันถูกย่อยสลายโดยนอกเหนือจาก 3 มิลลิลิตร 0.9% (w / v) NaOH ในเมทานอลที่ 50 8C 35 นาที กรดไขมันถูก methylated โดยใช้ 4% (v / v) HCl ในเมทานอลที่ 60 8C 20 นาทีที่สกัดแล้วกับเฮกเซนและระเหยภายใต้กระแสไนโตรเจน หนึ่งไมโครลิตรเกียรติยศละลายในเฮกเซนถูกฉีดไปยัง Agilent Technologies (Palo Alto, CA, USA) ก๊าซ Chromatograph (รุ่น 6890N สหรัฐอเมริกา) การติดตั้งเครื่องตรวจจับไอออนไนซ์เปลวไฟและหัวฉีดอัตโนมัติ (รุ่น 7683, สหรัฐอเมริกา) ลง HP- 88 คอลัมน์ฝอย (100 เมตร? 0.25 มม? 0.20 มม Agilent Technologies, สหรัฐอเมริกา) GC
เงื่อนไขที่อุณหภูมิหัวฉีด 255 8C; อุณหภูมิเตาอบเริ่มต้นของ 75 8C เพิ่มขึ้นเป็น 165 8C ที่ 8 8C / นาทีและมีการจัดขึ้นเป็นเวลา 35 นาทีเพิ่มขึ้นถึง 210 8C ที่ 5.5 8C / นาทีและจัดขึ้นเป็นเวลา 2 นาทีและจากนั้นเพิ่มขึ้นถึง 240 8C 15 8C / นาทีและ ที่จัดขึ้นเป็นเวลา 3 นาที เครื่องตรวจจับอุณหภูมิเป็น 280 8C ไนโตรเจนที่ปราศจากออกซิเจนถูกใช้เป็นก๊าซที่อัตราการไหล 18 มิลลิลิตร / นาทีที่ 38 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว รวมเวลาของโครงการเตาอบ 72 นาทีเป็น กรดไขมันที่ถูกระบุโดยเปรียบเทียบครั้งการเก็บรักษาที่มีมาตรฐานสาร (99% บริสุทธิ์ซิกเซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นกรัม / 100 กรัมของกรดไขมัน น้ำยาทั้งหมดและตัวทำละลายที่ใช้มาจากเมอร์ค (ดาร์มสตัด, เยอรมนี)
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.9 . การวิเคราะห์กรดไขมันและไขมัน
สกัดโดยใช้เมทานอลคลอโรฟอร์ม / โซลูชั่น ( 2 : 1 v / v ) ตามฟอล์ช et al . ( 1957 ) กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ ( ชื่อเสียง ) และมีการปฏิบัติตามวิธีที่อธิบายไว้โดยรถตู้ nieuwenhove et al . ( 2009 , 2011 ) สั้น ๆ , ไขมันที่ผ่านการย่อยด้วยนอกเหนือจาก 3 ml 0.9 % ( w / v ) ในเมทานอลโซเดียมไฮดรอกไซด์ 50 8C 35 นาทีกรดไขมันเป็น methylated โดยใช้ 4 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) HCl ในเมทานอลที่ 60 8C นาน 20 นาที จากนั้นนำไปสกัดด้วยเฮกเซนและระเหยภายใต้ไนโตรเจนสายธาร หนึ่งไมโครลิตร ชื่อเสียง ละลายในเฮกเซน ฉีดเป็น Agilent Technologies ( พาโล อัลโต แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) แก๊ส ( รุ่น 6890n , USA ) พร้อมกับเฟลมไอออไนเซชันแบบอัตโนมัติ ( 7683 เครื่องและหัวฉีด ,สหรัฐอเมริกา ) เป็น hp-88 แคพิลลารีคอลัมน์ ( 100 เมตร 0.25 มม. 0.20 มม. Agilent Technologies , USA ) เงื่อนไข GC
: อุณหภูมิ , 255 8C หัวฉีด เริ่มต้นเตาอบที่อุณหภูมิ 75 8C เพิ่มเป็น 165 8C 8 8B / นาที โดยมี 35 นาที เพิ่มขึ้นเป็น 210 8C 5.5 8B / min และจัดขึ้นเป็นเวลา 2 นาทีจากนั้นเพิ่มเป็น 240 8C 15 8B / min และจัดขึ้นสำหรับ 3 เครื่องตรวจจับนาทีอุณหภูมิ 280 8C .ออกซิเจน ไนโตรเจน ฟรีถูกใช้เป็นแก๊สตัวพา ที่อัตราการไหลของ 18 มล. / นาทีที่ 38 psi . เวลาทั้งหมดของเตาอบ 6 72 นาที กรดไขมันที่ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบความคงทนในการจำครั้งด้วยมาตรฐาน methylated ( 99% บริสุทธิ์ ; Sigma , St . Louis , MO , USA ) ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นกรัม / 100 กรัมของกรดไขมัน ทั้งหมดเพื่อใช้เป็นตัวทำละลายจากเมอร์ค ( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี )
การแปล กรุณารอสักครู่..
