2. Materials and methodsThe phytase

2. Materials and methods
The phytase products used in the study included Phytase A (granulate) claimed to be heat stable due to the use of granulation technology and the new experimental phytase product (powder; Phytase B). Both products were provided by Canadian Bio-Systems Inc.,
Calgary, Alberta, Canada.In the in vitro assay, 100 mg of the respective enzyme was incubated with 200 μl buffer for 2 min at 60 and 70 °C (30 s at desired temperature) and then subjected to phytase activity determination using the procedure described below.
Both enzyme products were further subjected to the pelleting process in the feed mills located in Manitoba and British Columbia. Two independent pelleting runs utilizing Enzyme A and Enzyme B were performed. Enzyme premixes provided 1000 units of phytase
activity per kg of complete feed and were added to the respective diets at the expense of wheat. In each study,the control treatment with no added microbial phytase was employed to determine the level of endogenous phytase activity. Five mash (before pelleting) and pelleted samples were collected from each run at either location. Each run involved 2 t of feed from which five 500 g samples of both mash and pellets were collected and individually analyzed for phytase activity (see below). The temperature of feed was measured three times per each run using the infrared Therm Raytek 5T2C
thermometer. In the Manitoba study, the feed temperature at the discharge averaged 54.1 °C (±3.1) after conditioning and 67.0 °C (±1.6 °C) after pelleting. In the feed mill in British Columbia, the temperatures of pellets averaged 70.0 °C (±1.2 °C). Phytase activity was determined using a colorimetric procedure. Briefly, 1 g of sample was extracted at room temperature for 60 min in 0.1 M sodium acetate buffer pH 5.5 containing 100 mg L−1 of Tween 20 (Sigma P-1379). The samples were centrifuged, and 1 ml of supernatant was transferred into the test tube containing 1 ml of 0.1 M sodium acetate buffer. Test tubes were placed in a 37 °C water bath and after 5 min, 4 ml of
phytate solution (0.82 g of Sigma P-3168 sodium phytate in 100 ml of sodium acetate buffer) were added and incubated for exactly 60 min. The reaction was stopped
by the addition of 4 ml of ammonium molybdate/ammonium vanadate colour reagent. Blank samples

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการผลิตภัณฑ์คุณสมบัติที่ใช้ในการศึกษารวมคุณสมบัติ A (เม็ดเป็นเมล็ด) อ้างว่าเป็น ความร้อนที่มีเสถียรภาพเนื่องจากการใช้เทคโนโลยีแกรนูลและทดลองคุณสมบัติสินค้า (ผง คุณสมบัติ B) ผลิตภัณฑ์ทั้งสองได้จากแคนาดาชีวภาพระบบ Inc.Canada.In คัลการี่ อัลเบอร์ต้า เครื่องมือวิเคราะห์ 100 มิลลิกรัมของเอนไซม์เกี่ยวข้องถูก incubated กับ 200 μl บัฟเฟอร์สำหรับ 2 นาทีที่ 60 และ 70 ° C (30 s ระบุอุณหภูมิ) และภายใต้คุณสมบัติการกำหนดกิจกรรมที่ใช้กระบวนงานที่อธิบายไว้ด้านล่างแล้วผลิตภัณฑ์เอนไซม์ทั้งได้เพิ่มเติมภายใต้กระบวนการ pelleting ในโรงอาหารแห่งมานิโทบาและบริติชโคลัมเบีย มีดำเนินการสองอิสระ pelleting รันใช้เอนไซม์ A และ B เอนไซม์ เอนไซม์ premixes ให้หน่วย 1000 ของคุณสมบัติกิจกรรมต่อกิโลกรัมของสมบูรณ์อาหาร และมีเพิ่มอาหารตามค่าใช้จ่ายของข้าวสาลี ในแต่ละการศึกษา การรักษาควบคุม ด้วยคุณสมบัติจุลินทรีย์ไม่เพิ่มถูกจ้างเพื่อกำหนดระดับของ endogenous คุณสมบัติกิจกรรม สายห้า (ก่อน pelleting) และตัวอย่าง pelleted ถูกรวบรวมจากแต่ละรันที่ตำแหน่งใด 2 เกี่ยวข้องกับการทำงานแต่ละทีสารที่ 5 ตัวอย่าง 500 กรัมคลุกเคล้าและขี้ถูกรวบรวม และวิเคราะห์แต่ละคุณสมบัติกิจกรรม (ดูด้านล่าง) อุณหภูมิของอาหารถูกวัดสามครั้งต่อรันแต่ละใช้ 5T2C Therm Raytek อินฟราเรดวัดอุณหภูมิ ในการศึกษามานิโทบา อุณหภูมิอาหารที่จำหน่าย averaged 54.1 ° C (±3.1) หลังจากปรับและ 67.0 ° C (±1.6 ° C) หลังจาก pelleting ในโรงอาหารในบริติชโคลัมเบีย อุณหภูมิของขี้ averaged 70.0 ° C (±1.2 ° C) กิจกรรมคุณสมบัติถูกกำหนดโดยใช้กระบวนการเทียบเคียง 1 กรัมของตัวอย่างสั้น ๆ ถูกสกัดที่อุณหภูมิห้องใน 60 นาทีใน 0.1 M โซเดียม acetate บัฟเฟอร์ pH 5.5 มี 100 mg L−1 Tween 20 (ซิก P-1379) ตัวอย่างถูก centrifuged และ 1 ml ของ supernatant ถูกถ่ายโอนลงในหลอดทดสอบประกอบด้วย 1 ml ของบัฟเฟอร์ acetate โซเดียม 0.1 M หลอดทดสอบถูกวางลง ในน้ำน้ำ 37 ° C และหลัง จาก 5 นาที 4 ml ของโซลูชัน phytate (0.82 กรัมของซิก P-3168 โซเดียม phytate ใน 100 ml ของบัฟเฟอร์ acetate โซเดียม) ถูกเพิ่ม และ incubated สำหรับว่า 60 นาที หยุดปฏิกิริยาด้านนอก 4 ml ของรีเอเจนต์สี vanadate molybdate/แอมโมเนีย แอมโมเนีย ตัวอย่างที่ว่างเปล่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
และผลิตภัณฑ์ที่ใช้ในการ ศึกษาระดับ ( ที่ ) อ้างว่าเป็นความร้อนคงที่เนื่องจากการใช้เทคโนโลยีและผลิตภัณฑ์ใหม่ กลุ่มทดลอง ( ผง ; และ b ) ทั้งสองผลิตภัณฑ์มีให้โดยแคนาดาไบ Systems , Inc ,
คาลการี , อัลเบอร์ต้า , แคนาดา ในการทดสอบในหลอดทดลอง ,100 มิลลิกรัมของเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องถูกบ่มกับ 200 μชั้นบัฟเฟอร์สำหรับ 2 นาทีที่ 60 และ 70 องศา C ( 30 วินาทีที่อุณหภูมิที่ต้องการ ) แล้วต้องใช้กำหนดกิจกรรมโดยใช้ขั้นตอนที่อธิบายไว้ด้านล่าง
ทั้งเอนไซม์ผลิตภัณฑ์เพิ่มเติมภายใต้การอัดในกระบวนการอาหารและโรงงานตั้งอยู่ในแมนิโทบาบริติชโคลัมเบียอิสระ 2 อัดวิ่งโดยใช้เอนไซม์และเอนไซม์ b การวิจัย เอนไซม์ไฟเตส 1 , 000 หน่วยของ premixes จัดกิจกรรม
ต่อกิโลกรัมที่สมบูรณ์ และมีการเพิ่มอาหารที่เกี่ยวข้องที่ค่าใช้จ่ายของข้าวสาลี ในแต่ละการศึกษา , การควบคุมการเพิ่มจุลินทรีย์กลุ่มไม่ใช้เพื่อกำหนดระดับของกิจกรรมของเอนไซม์ไฟเตสใน .ห้า ( ก่อนอัดบดและอัดเม็ดโดยเก็บตัวอย่างจากแต่ละรันที่ให้สถานที่ เรียกใช้แต่ละเกี่ยวข้อง 2 t อาหารที่ 5 500 กรัมตัวอย่างทั้งบดและอัดเม็ดการเก็บรวบรวมและวิเคราะห์กิจกรรมแบบกลุ่ม ( ดูด้านล่าง ) อุณหภูมิของอาหารได้ 3 ครั้งต่อแต่ละรันโดยใช้อินฟราเรดความร้อน Raytek 5t2c
เครื่องวัดอุณหภูมิ ในการศึกษาแมนิโทบาอาหารอุณหภูมิจำหน่ายเฉลี่ย 54.1 ° C ( ± 3.1 ) หลังจากปรับองศา C ( ± 67.0 1.6 ° C ) หลังจากอัด . ในโรงงานอาหารสัตว์ในบริติชโคลัมเบีย , อุณหภูมิของเม็ดเฉลี่ย 70.0 ° C ( ± 1.2 ° C ) กิจกรรมที่ 1 คือการพิจารณากระบวนการ 7.4 . สั้น 1 กรัมของตัวอย่างที่สกัดที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 60 นาทีใน 0.1 โมลาร์โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ pH 55 ( 100 mg L − 1 ของ Tween 20 ( Sigma p-1379 ) จำนวนระดับ 1 มิลลิลิตร และนำถูกย้ายในหลอดทดลองที่มี 1 มิลลิลิตร 0.1 โมลาร์โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ หลอดทดสอบถูกวางอยู่ใน 37 ° C น้ำอาบ และหลังจาก 5 นาที , 4 ml
ไฟเตท โซลูชั่น ( 0.82 กรัมของ Sigma p-3168 โซเดียมไฟเตตใน 100 มิลลิลิตรของโซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ ) ที่ถูกบ่มครบ 60 นาทีปฏิกิริยาที่ถูกหยุด
โดยนอกเหนือจาก 4 มิลลิลิตร / แอมโมเนียแอมโมเนียมโมลิบเดตการทำงานสี เกิดปฏิกิริยา ตัวอย่างที่ว่างเปล่า