The samples were purified by immunoaffinity columns and
analyzed for aflatoxins B1, B2,G1, and G2 by high-performance liquid
chromatography (HPLC) with fluorescence detection according to
the methodology of the Chinese method standards(MOHC & SAC,
2006) and AOAC method 994.08 (AOAC, 2002) with minor modi-
fications. Finely ground samples (5.0 g) were extracted with 15 mL
of 4% NaCl-methanol-water. After ultrasonic extraction (50 C,
10mins) and filtration with double-layer slow quantitative filter
paper, the filtrate (3 mL) was collected in 50 mL centrifugal tube,
and then mixed with 8 mL ddH2O. The mixture was kept standing
overnight. The supernatant (3 mL) was collected, diluted with 8 mL
pure water. The extracts obtained (8 mL) were passed through
aflatoxin immunoaffinity columns specifically adsorpting total aflatoxins
(B1, B2, G1 and G2) with a flow rate of one droplet every
second and then eluted with 1 mL methanol into test tubes. The
eluates were filtered with organic membrane (0.22 mm) into glass
tubes and prepared for HPLC quantitative analysis.
HPLC analysis was performed with an Agilent 1100 HPLC system(Palo
Alto, CA, USA)equipped with a fluorescence detector at
wavelengths of 360 nm and 440 nm for excitation and emission,
respectively. Chromatographic separation was performed on a
Capcell Pak C-18 column (4.6 mm 150 mm 5 mm), with a wateracetonitrile
mobile phase pumped at a constant flow rate of 0.5 mL/
min and the injection volume being 10 mL.
ตัวอย่างที่บริสุทธิ์ โดยคอลัมน์ immunoaffinity และวิเคราะห์ความ aflatoxins B1, B2, G1 และ G2 โดยของเหลวประสิทธิภาพสูงchromatography (HPLC) ด้วยการตรวจหาสารเรืองแสงตามวิธีมาตรฐานวิธีจีน (MOHC & SAC2006) และวิธี aoac หรือ 994.08 (aoac หรือ 2002) กับรองโทรสาร -fications ประณีตตัวล่าง (5.0 g) ที่สกัด ด้วยขนาด 15 มล.4% NaCl-เมทานอลน้ำ หลังจากสกัดอัลตราโซนิก (50 C10mins) และกรองกับตัวกรองเชิงช้าดับเบิ้ลเลเยอร์รวบรวมในท่อหอยโข่ง 50 มล. กระดาษ การกรอง (3 mL)แล้ว ผสมกับ ddH2O 8 mL ส่วนผสมถูกเก็บยืนค้างคืน Supernatant (3 mL) รวบรวม กับ 8 mLน้ำบริสุทธิ์ สารสกัดที่ได้รับ (8 mL) ได้ผ่านคอลัมน์ immunoaffinity ฟลาท็อกซินโดยเฉพาะ aflatoxins รวม adsorpting(B1, B2, G1 และ G2) มีอัตราการไหลของหยดหนึ่งทุกสอง และ eluted กับเมทานอล 1 มิลลิลิตรลงในหลอดทดลอง การeluates ได้กรอง ด้วยเมมเบรนอินทรีย์ (0.22 มม.) ลงในแก้วหลอด และเตรียมไว้สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณของ HPLCดำเนินการวิเคราะห์ HPLC กับระบบ HPLC Agilent 1100 (Paloอัลโต CA, USA) พร้อมเครื่องตรวจจับสารเรืองแสงที่ความยาวคลื่นของ 360 nm และ 440 nm สำหรับกระตุ้นและปล่อยตามลาดับ แยกโครมาทำตามแบบคอลัมน์ Capcell Pak C-18 (4.6 มม. 150 มม. 5 มม.), กับ wateracetonitrileเฟสเคลื่อนที่สูบที่อัตราไหลคงที่ 0.5 mL /นาทีและปริมาณฉีดได้ 10 มล.
การแปล กรุณารอสักครู่..

กลุ่มตัวอย่างที่ถูกทำให้บริสุทธิ์ด้วยคอลัมน์ immunoaffinity และ
วิเคราะห์ aflatoxins B1, B2, G1 และ G2 โดยมีประสิทธิภาพสูงของเหลว
Chromatography (HPLC) มีการตรวจสอบการเรืองแสงตาม
วิธีการมาตรฐานวิธีการที่จีน (MOHC & SAC ที่
2006) และวิธี AOAC 994.08 (AOAC, 2002) กับ modi- เล็กน้อย
fications ตัวอย่างบดละเอียด (5.0 กรัม) ถูกสกัดด้วย 15 มล
4% โซเดียมคลอไรด์เมทานอลน้ำ หลังจากสกัดอัลตราโซนิก (50? C,
10mins) และการกรองที่มีสองชั้นกรองเชิงปริมาณช้า
กระดาษกรอง (3 มิลลิลิตร) มีการรวบรวม 50 หลอดแรงเหวี่ยงมิลลิลิตร
แล้วนำมาผสมกับ 8 มล ddH2O ส่วนผสมที่ถูกเก็บไว้ที่ยืน
ในชั่วข้ามคืน ใส (3 มิลลิลิตร) ถูกเก็บรวบรวมเจือจางด้วย 8 มิลลิลิตร
น้ำบริสุทธิ์ สารสกัดที่ได้รับ (8 มิลลิลิตร) ถูกส่งผ่าน
คอลัมน์อะฟลาท็อกซิน immunoaffinity เฉพาะ adsorpting aflatoxins รวม
(B1, B2, G1 และ G2) มีอัตราการไหลของหนึ่งหยดทุก
ครั้งที่สองแล้วชะด้วยเมทานอล 1 มิลลิลิตรลงในหลอดทดลอง
eluates ถูกกรองด้วยเมมเบรนอินทรีย์ (0.22 มิลลิเมตร) ลงไปในแก้ว
หลอดและเตรียมพร้อมสำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณ HPLC.
วิเคราะห์ HPLC ได้ดำเนินการกับ Agilent 1100 ระบบ HPLC (Palo
Alto, CA, USA) พร้อมกับเครื่องตรวจจับการเรืองแสงที่
ความยาวคลื่น 360 นาโนเมตรและ 440 นาโนเมตรสำหรับการกระตุ้นและการปล่อย,
ตามลำดับ การแยกสารที่ได้ดำเนินการใน
Capcell ปาก C-18 คอลัมน์ (4.6 มิลลิเมตร 150 มิลลิเมตร 5 มิลลิเมตร) กับ wateracetonitrile
เฟสเคลื่อนที่สูบที่มีอัตราการไหลคงที่ของ 0.5 มิลลิลิตร /
นาทีและปริมาณการฉีดเป็น 10 มล
การแปล กรุณารอสักครู่..
