A possible mechanism proposed to ex

A possible mechanism proposed to explain how HIV-1 protease could decrease GFP expression,
after the transfection of plasmids containing the GFP–PR, was through cell death induced by HIV-1 protease.In order to
ascertain the molecular mechanisms involved in phenotyping, cell viability assays were performed with annexin V (apoptotic marker) and 7-AAD (necrotic marker). 293T cells were transfected with pcDNA3_GFP_PR-wt at saquinavir concentrations ranging from 0 to 2 mM. The results show that the percentages of annexin V-positive cells in all cases (including negative controls) were equal, independent of the drug concentration (Figure 1a). The same results were observed after staining with 7-AAD (Figure 1a). Consequently, the loss of GFP signal when the protease is fully acting on the system (in the absence of drug) is not due to cell death.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กลไกที่เป็นไปได้การนำเสนออธิบายวิธีโปรติเอสของเชื้อเอชไอวี-1 สามารถลด GFP นิพจน์หลังจาก transfection ของ plasmids ประกอบด้วย GFP – PR ได้ผ่านการตายของเซลล์ที่เกิดจากโปรติเอสของเชื้อเอชไอวี-1 เพื่อเป็นการตรวจสอบกลไกระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องใน phenotyping เซลล์ชีวิต assays ดำเนินการ ด้วย annexin V (เครื่องหมาย apoptotic) และ 7-AAD (necrotic มาร์กเกอร์) 293T เซลล์ถูก transfected กับ pcDNA3_GFP_PR-wt ที่ความเข้มข้นซาควินาเวียร์ตั้งแต่ 0 ถึง 2 มม. แสดงผลลัพธ์ว่า เปอร์เซ็นต์ของ annexin V บวกเซลล์ในทุกกรณี (รวมถึงควบคุมค่าลบ) ได้เท่ากับ อิสระของความเข้มข้นของยา (รูปที่ 1a) ผลเดียวกันถูกตั้งข้อสังเกตหลังจากย้อมด้วย 7-AAD (รูปที่ 1a) ดังนั้น การสูญเสียของสัญญาณ GFP เมื่อโปรติเอสทำหน้าที่อย่างเต็มระบบ (ในกรณีที่ไม่มียาเสพติด) ไม่ได้เนื่องจากการตายของเซลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กลไกที่เป็นไปได้เสนอที่จะอธิบายวิธีการติดเชื้อ HIV-1 protease สามารถลดการแสดงออก GFP,
หลังจาก transfection ของพลาสมิดที่มี GFP-ประชาสัมพันธ์ผ่านการตายของเซลล์ที่เกิดจากการสั่งซื้อ HIV-1 protease.In เพื่อ
ยืนยันกลไกระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องในการ phenotyping เซลล์ การวิเคราะห์ความมีชีวิตได้รับการดำเนินการกับ annexin V (เครื่องหมาย apoptotic) และ 7-อ๊าด (เครื่องหมายเศษ) เซลล์ 293T ถูก transfected กับ pcDNA3_GFP_PR-WT ที่ความเข้มข้น saquinavir ตั้งแต่ 0 ถึง 2 mm ผลการศึกษาพบว่าร้อยละของเซลล์ annexin V-ในเชิงบวกในทุกกรณี (รวมถึงการควบคุมการลบ) ก็เท่ากับเป็นอิสระจากความเข้มข้นของยาเสพติด (รูปที่ 1a) ผลลัพธ์เดียวกันหลังจากที่ถูกตั้งข้อสังเกตการย้อมสีมี 7-อ๊าด (รูปที่ 1a) ดังนั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กลไกที่เป็นไปได้เสนอเพื่ออธิบายว่า HIV-1 protease GFP สามารถลดการแสดงออก ,หลังจาก transfection ของพลาสมิดที่มี GFP –พีอาร์ผ่านการตายของเซลล์ที่เกิดจาก HIV-1 protease เพื่อศึกษากลไกระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับอเซลล์ได้ด้วย , ยีนของเซลล์ที่ 5 ( กลุ่มที่มีเครื่องหมาย ( Marker ) และ 7-aad เปื่อย ) 293t cells transfected กับ pcdna3_gfp_pr-wt ซาควินาเวียร์ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 0 ถึง 2 มิลลิเมตร พบว่าเปอร์เซ็นต์ของ v-positive ของเซลล์เซลล์ทุกกรณี ( รวมถึงการควบคุมลบ ) เท่ากับ อิสระของตัวยาเข้มข้น ( รูปที่ 1A ) ผลลัพธ์ที่ได้หลังจากย้อมด้วย 7-aad ( รูปที่ 1A ) ดังนั้นการสูญเสียของสัญญาณเมื่อโปรตีน GFP แสดงอย่างเต็มที่ในระบบ ( ในกรณีที่ไม่มียา ) ไม่ได้เกิดจากเซลล์ที่ตาย