2.5. Activity analysis of the enzym

2.5. Activity analysis of the enzyme converting purine nucleosides into purine bases The enzyme activity of probiotics converting purine nucleo- sides into purine bases was assayed as described previously(lsuboi et al., 2012: J.P5149305) with modifications. Briefly, 50 mg of probiotics powder or 1 g of probiotics-in-chocolate which con- tained 50 mg of probiotics powder after treatment with 0.85 Naci or simulated digestive juice was washed twice with 0.85x NaCl. After washing. 4.0 ml of the nucleoside solutions containing 2 mM guanosine and 4 mM inosine in 0.1 M potassium phosphate buffer(pH 70) were added into the resulting probiotics precipitation. The mixture was incubated for 1 h at 37 oc. and then the reaction was terminated by adding 0.5 ml of 2.0 N HCI. Gua nine and hypoxanthine in the reaction mixtures were quantified with high-performance liquid chromatography(HPLC). The HPLC analysis was performed with a Shimadzu LC 10 A-VP system(Shimadzu. Kyoto, Japan) equipped with a Cosmosil 5c18-PAQ column(4.6 x 250 mm, Nacalai Tesque, Inc., Kyoto, Japan) at 40 oc. 10 Hl of the filtered supernatant of the reaction mixture was in jected to HPLC The mobile phase was 50 mM KH2PO4(pH 3.0) The flow rate was 1.0 ml/min. The effluents were monitored at 254 nm using diode array detector(SPD-M20A, Shimadzu Kyoto, Japan)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 กิจกรรมการวิเคราะห์เอนไซม์แปลง purine nucleosides เป็น purine ฐานกิจกรรมเอนไซม์ของ probiotics แปลง purine nucleo ด้านเป็นฐาน purine ได้ assayed ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (lsuboi et al., 2012: J.P5149305) มีการปรับเปลี่ยน สั้น ๆ 50 มิลลิกรัม ของผง probiotics หรือ 1 g ของ probiotics-ในช็อคโกแลตที่คอน-tained 50 มก.ผง probiotics หลังจากรักษาด้วย 0.85 Naci หรือน้ำย่อยอาหารจำลองถูกล้างสองครั้ง ด้วย 0.85 x NaCl หลังจากซักผ้า ml 4.0 ในโซลูชั่น nucleoside guanosine 2 มม.และ inosine มม. 4 ใน 0.1 M โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 70) ถูกเพิ่มเข้าไปในฝน probiotics เป็นผลลัพธ์ ส่วนผสมคือ incubated สำหรับ h 1 ที่ 37 oc. แล้วปฏิกิริยาถูกยกเลิก โดยการเพิ่ม 0.5 ml ของ hci 2.0 N เก็กเก้าและ hypoxanthine ในน้ำยาผสมปฏิกิริยาถูก quantified กับ chromatography(HPLC) ของเหลวประสิทธิภาพสูง ทำการวิเคราะห์ HPLC ด้วยระบบ Shimadzu LC 10 A-VP (Shimadzu เกียวโต ญี่ปุ่น) พร้อมกับคอลัมน์ 18-PAQ Cosmosil 5 c (4.6 x 250 mm, Nacalai Tesque, Inc. เกียวโต ญี่ปุ่น) ที่ 40 oc. 10 Hl ของ supernatant กรองของผสมปฏิกิริยาอยู่ใน jected การ HPLC เฟสเคลื่อน 50 มม. KH2PO4(pH 3.0) อัตราการไหล 1.0 ml/min Effluents ถูกตรวจสอบที่ 254 nm โดยใช้ไดโอดอาร์เรย์จับ (SPD M20A, Shimadzu เกียวโต ญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์แปลง nucleosides purine เข้าไปในฐาน purine กิจกรรมเอนไซม์ของโปรไบโอติกแปลงด้าน purine nucleo- เข้าไปในฐาน purine ได้รับการวิเคราะห์ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (lsuboi et al, 2012:. J.P5149305) มีการปรับเปลี่ยน สั้น ๆ , 50 มิลลิกรัมของผงโปรไบโอติกหรือ 1 กรัมของโปรไบโอติกในช็อคโกแลตซึ่งจะประกอบด้วย tained 50 mg ของโปรไบโอติกผงหลังการรักษาด้วย 0.85 Naci หรือจำลองน้ำผลไม้ย่อยอาหารถูกล้างครั้งที่สองกับ 0.85x โซเดียมคลอไรด์ หลังจากล้าง 4.0 มล. ของการแก้ปัญหาที่มี nucleoside 2 มิลลิ guanosine และ 4 มิลลิ inosine ใน 0.1 M โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 70) ได้รับการเพิ่มเข้าไปในยุโปรไบโอติกที่เกิด ส่วนผสมที่ถูกบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง 37 oc แล้วเกิดปฏิกิริยาถูกยกเลิกโดยการเพิ่ม 0.5 มล. 2.0 ไม่มี HCI Gua เก้า hypoxanthine ผสมปฏิกิริยาถูกวัดที่มีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) การวิเคราะห์ HPLC ได้รับการดำเนินการกับ Shimadzu LC 10 ระบบ A-VP (Shimadzu. เกียวโตญี่ปุ่น) พร้อมกับ Cosmosil คอลัมน์ 5c18-PAQ (4.6 x 250 มม Nacalai Tesque, Inc, เกียวโตญี่ปุ่น) ที่ 40 oc 10 Hl ของสารละลายที่กรองของผสมปฏิกิริยาอยู่ใน jected เพื่อ HPLC ได้เฟสเคลื่อนที่ได้ 50 มิลลิ KH2PO4 (pH 3.0) อัตราการไหลเป็น 1.0 มล. / นาที สิ่งปฏิกูลที่ถูกตรวจสอบที่ 254 นาโนเมตรโดยใช้เครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอด (SPD-M20A, Shimadzu เกียวโตญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์แปลงพิวรีน nucleosides เป็น purine ฐานกิจกรรมของเอนไซม์โปรไบโอติกแปลงพิวรีนนิวคลีโอ - ด้านข้างเป็น purine bases ซีรั่มตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( lsuboi et al . , 2012 : j.p5149305 ) ที่มีการปรับเปลี่ยน สั้น ๆ , 50 มก. ของโปรไบโอติกผงหรือ 1 กรัมของโปรไบโอติกในช็อกโกแลต ซึ่งคอน - tained 50 มก. ของโปรไบโอติกผง หลังการรักษาด้วย 085 NaCl หรือน้ำผลไม้ย่อยอาหารจำลองซักสองครั้งกับ 0.85x เกลือ หลังล้าง 4.0 มิลลิลิตรของสารละลายที่มีนิวคลิโอไซด์ 2 มม. และ 4 มม. อินโนกัวโนซีนใน 0.1 โมลาร์โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 70 ) ถูกเพิ่มเข้ามา ส่งผลให้โปรไบโอติกตกตะกอน ส่วนผสมจะถูกบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส แล้วปฏิกิริยาที่ถูกยกเลิกโดยการเพิ่ม 0.5 มล. 2.0 N โดย .กัวเก้าและไฮโปแซนทีนในปฏิกิริยาผสมถูกวัดด้วยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง ( HPLC ) การวิเคราะห์ HPLC แสดงกับ Shimadzu LC 10 a-vp ระบบ ( Shimadzu . เกียวโต , ญี่ปุ่น ) พร้อมกับ cosmosil 5c18 PAQ คอลัมน์ ( 4.6 x 250 มม. nacalai tesque , อิงค์ , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) ที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียส10 HL ของกรองนำของปฏิกิริยาผสมอยู่ใน jected เพื่อหาระยะเคลื่อนที่ 50 mm kh2po4 ( pH 3.0 ) อัตราการไหลเท่ากับ 1.0 มล. / นาที ถูกทิ้งที่ 254 นาโนเมตรโดยใช้เครื่องตรวจจับเรย์ไดโอด ( spd-m20a Shimadzu , เกียวโต , ญี่ปุ่น