The oxidation
degree of Odex was determined by quantifying the aldehyde groups formed by tertbutyl
carbazate via carbazone formation [28,29]. Briefly, an Odex solution (10 mg/mL
in pH 5.2 acetate buffer) was prepared, and a fivefold excess tert-butyl carbazate in
the same buffer was added and the mixture was allowed to react for 24 h at ambient
temperature followed by addition of a fivefold excess of NaBH3CN. After another
12 h, the reaction product was precipitated thrice with acetone and the final precipitate
was dialyzed thoroughly against water followed by lyophilization. Odex
preparations with theoretical oxidation degrees of 5, 15 and 25% were coded as
Odex-I, Odex-II, and Odex-III, respectively. The degree of oxidation (i.e., abundance
of aldehyde groups) was assessed by 1H NMR by integrating the peaks at 1.3 ppm
(tert-butyl) against 4.8 ppm (anomeric proton of dextran) (Varian 400). The molecular
weights of Odex (dissolved in water, concentration: 0.5 mg/mL) were determined
by HPLC (Waters 600e pump and controller, 715 injector, 410 differential
refractometer, USA) coupled to Waters Ultrahydrogel 2000, 1000, and 500;
300 mm 7.8 mm columns connected in series, using 0.1 M KNO3 as a mobile phase
at a flow rate of 0.8 mL/min with temperature maintained at room temperature.
Dextran standards (Fluka Chemie AG, Switzerland) in the molecular range of
12–80 kDa were used as calibration standards.
The oxidationdegree of Odex was determined by quantifying the aldehyde groups formed by tertbutylcarbazate via carbazone formation [28,29]. Briefly, an Odex solution (10 mg/mLin pH 5.2 acetate buffer) was prepared, and a fivefold excess tert-butyl carbazate inthe same buffer was added and the mixture was allowed to react for 24 h at ambienttemperature followed by addition of a fivefold excess of NaBH3CN. After another12 h, the reaction product was precipitated thrice with acetone and the final precipitatewas dialyzed thoroughly against water followed by lyophilization. Odexpreparations with theoretical oxidation degrees of 5, 15 and 25% were coded asOdex-I, Odex-II, and Odex-III, respectively. The degree of oxidation (i.e., abundanceof aldehyde groups) was assessed by 1H NMR by integrating the peaks at 1.3 ppm(tert-butyl) against 4.8 ppm (anomeric proton of dextran) (Varian 400). The molecularweights of Odex (dissolved in water, concentration: 0.5 mg/mL) were determinedby HPLC (Waters 600e pump and controller, 715 injector, 410 differentialrefractometer, USA) coupled to Waters Ultrahydrogel 2000, 1000, and 500;300 mm 7.8 mm columns connected in series, using 0.1 M KNO3 as a mobile phaseat a flow rate of 0.8 mL/min with temperature maintained at room temperature.Dextran standards (Fluka Chemie AG, Switzerland) in the molecular range of12–80 kDa were used as calibration standards.
การแปล กรุณารอสักครู่..

ออกซิเดชัน
. ODEX ถูกกําหนดโดยปริมาณอัลดีไฮด์กลุ่มขึ้น โดย tertbutyl
carbazate ผ่าน carbazone ก่อตัว [ 28,29 ] สั้น ๆ , เป็น ODEX โซลูชั่น ( 10 mg / ml
ใน pH 5.2 อะซิเตทบัฟเฟอร์ ) ได้เตรียมการ และรับเกิน tert บิวทิล carbazate ในบัฟเฟอร์เดียวกัน
เพิ่มและผสมได้รับอนุญาตให้ตอบสนองต่อ 24 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิห้อง
ตามการเพิ่มของอุณหภูมิเกิน 5 เท่าของ nabh3cn . หลังจากที่อื่น
12 H , ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาตกตะกอน 3 ครั้งด้วยอะซีโตน และสุดท้ายคือ ให้ต่อผ่าน
ตกตะกอน น้ำ ตามด้วยเอนไซม์ ODEX
การเตรียมกับทฤษฎีออกซิเดชันองศา 5 , 15 และ 25 % ถูกเข้ารหัสเป็น
odex-i ODEX ODEX , II , และ 3 ตามลำดับ ระดับของการเกิดออกซิเดชันของ ( เช่นความอุดมสมบูรณ์
ของหมู่อัลดีไฮด์ ) คือการประเมินจาก 1H NMR โดยรวมยอด 1.3 ppm
( tert บิวทิล ) กับ 4 ppm ( โปรตอน anomeric ของ dextran ) ( เครื่อง 400 ) i
น้ำหนัก ODEX ( ละลายในน้ำความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) มีความตั้งใจ
2 ( น้ำ 600e ปั๊มและหัวฉีดควบคุม , 715 , 410 ดิฟ
Refractometer , USA ) คู่กับน้ำ ultrahydrogel 2000 , 1000 ,และ 500 ;
7.8 มม. 300 มม. คอลัมน์ต่อชุด ใช้ 0.1 M kno3 เป็นเฟสเคลื่อนที่
ที่อัตราการ ไหลของ 0.8 มิลลิลิตรต่อนาที ด้วยอุณหภูมิเก็บรักษาที่อุณหภูมิห้อง
มาตรฐาน ( fluka CHEMIE AG , dextran สวิตเซอร์แลนด์ ) ในช่วงของโมเลกุล
12 – 80 กิโลดาลตันถูกใช้เป็นมาตรฐานการสอบเทียบ .
การแปล กรุณารอสักครู่..
