RESULTS
Staining of Wild-type Cells with Fluorochromelabeled
Phallotoxins
Most observations ofwild-type and mutant cells were made
using Rh-phalloidin and mounting the cells in a medium
containing p-phenylenediamine as described in Materials and
Methods. Omission of the p-phenylenediamine did not
change the patterns of staining observed, but the more rapid
photobleaching made observation and (especially) photographic
documentation difficult.
When wild-type cells were stained after fixation with formaldehyde
only, or after fixation with formaldehyde followed
by treatment with Glusulase and Triton X-100 (see Materials
and Methods), similar patterns offluorescence were observed
(Fig. 1, A and B). Numerous small patches or spots were seen
distributed over the cell surface ; the cortical location ofthese
spots was clear when the microscope was focused up and
down. In addition, fibers were seen coursing through the cells,
generally in a direction roughly parallel to the long axes of
the cells . In unbudded cells, there was often a concentration
of fluorescence near one pole (Fig. 1 A, cell g), and in cells
with very small buds there was generally a pronounced concentration
of fluorescence in the bud (Fig . 1 A, cells e and f,
Fig. 1 B, cell a) . In both cases, the concentration of fluorescence
was usually resolvable as a cluster of individual spots.
In cells with medium-sized buds, there was typically a higher
concentration of fluorescent spots in the bud than in the
mother cell (Fig . 1 A, cells a-c; Fig. 1 B, cell d). Cells with very
large buds often showed a concentration of fluorescence in
the neck region, sometimes apparently as clusters of spots
(Fig. 1 B, cells b and c) and sometimes apparently as a band
(Fig. 1 A, cell h)
ผลลัพธ์ย้อมสีเซลล์ชนิดป่ากับ FluorochromelabeledPhallotoxinsส่วนใหญ่สังเกตชนิด ofwild และ mutant เซลล์ทำใช้ Rh phalloidin และเซลล์ในสื่อการติดตั้งประกอบด้วยพี phenylenediamine ตามที่อธิบายไว้ในวัสดุ และวิธี ไม่กระทำการอันของ p-phenylenediamineเปลี่ยนรูปแบบของการย้อมสีการสังเกต แต่รวดเร็วมากขึ้นphotobleaching ทำการสังเกต และถ่ายภาพ (โดยเฉพาะ)เอกสารยากเมื่อเซลล์ชนิดป่าได้สีหลังจากเบีกับฟอร์มาลดีไฮด์เท่า นั้น หรือ หลังเบีกับฟอร์มาลดีไฮด์ตามโดยรักษาด้วย Glusulase และไตรตั้น X 100 (ดูวัสดุและวิธีการ), สุภัค offluorescence รูปแบบคล้ายกัน(Fig. 1, A และ B) เห็นปะขนาดเล็กจำนวนมากหรือจุดกระจายบนพื้นผิวเซลล์ ofthese สถานเนื้อแน่นจุดชัดเจนเมื่อกล้องจุลทรรศน์ที่เน้นค่า และลง นอกจากนี้ การที่เส้นใยถูกเห็น coursing ผ่านเซลล์โดยทั่วไปในทิศทางประมาณขนานกับแกนยาวของเซลล์ ในเซลล์ unbudded มีมักจะเข้มข้นของ fluorescence ใกล้ขั้วหนึ่ง (Fig. 1 A เซลล์ g), และ ในเซลล์มีอาหารเล็กๆ มีทั่วไปสมาธิออกเสียงของ fluorescence การแตกหน่อ (ฟิกเซลล์ 1 A, e และ fFig. 1 B เซลล์) ในทั้งสองกรณี ความเข้มข้นของ fluorescenceมีที่แก้ไขได้จะเป็นคลัสเตอร์ของแต่ละจุดในเซลล์ที่มีอาหารขนาดกลาง มีความสูงความเข้มข้นของจุดเรืองแสงในดอกตูมกว่าในการเซลล์แม่ (ฟิก 1 A เซลล์ a c Fig. 1 B, d เซลล์) เซลล์มีมากอาหารขนาดใหญ่ที่มักจะพบว่าความเข้มข้นของ fluorescence ในภูมิภาคคอ บางครั้งเห็นได้ชัดว่าเป็นกลุ่มของจุด(Fig. 1 B เซลล์ b และ c) และบางครั้งเห็นได้ชัดว่าเป็นวงดนตรี(Fig. 1 A, h เซลล์)
การแปล กรุณารอสักครู่..

การย้อมเซลล์ชนิดป่า
สังเกตมากที่สุด fluorochromelabeled ฟาโลท็ ซิน ofwild ชนิดและเซลล์กลายพันธุ์ได้
ใช้ RH phalloidin และติดตั้งเซลล์ในอาหาร
ที่มี p-phenylenediamine ตามที่อธิบายไว้ในวัสดุและ
วิธี การละเลยของ p-phenylenediamine ไม่ได้
เปลี่ยนรูปแบบของการตรวจสอบ แต่มากขึ้นอย่างรวดเร็ว
photobleaching ทำให้การสังเกตและ ( โดยเฉพาะ ) ถ่ายภาพ
เมื่อเอกสารยาก ของเซลล์มีการเปรอะเปื้อนหลังจากการตรึงฟอร์มัลดีไฮด์
เท่านั้น หรือหลังจากการตรึงฟอร์มัลดีไฮด์ตาม
โดยการรักษาด้วย glusulase และ Triton X-100 ( ดูวัสดุ
และวิธีการ ) , คล้ายรูปแบบ offluorescence พบ
( รูปที่ 1 , A และ B ) แพทช์ขนาดเล็กหลายหรือจุดที่ได้เห็น
กระจายไปทั่วพื้นผิวเซลล์ ; เปลือกที่ตั้งของ
จุดชัดเจนเมื่อกล้องจุลทรรศน์เน้นขึ้น
ลง นอกจากนี้ ไฟเบอร์ เห็นวิ่งผ่านเซลล์
โดยทั่วไปในทิศทางขนานกับแกนยาวประมาณ
เซลล์ ใน unbudded เซลล์มีความเข้มข้นของโซเดียมมักจะ
ใกล้ขั้วหนึ่ง ( รูปที่ 1 เซลล์และในเซลล์
G )กับตาขนาดเล็กมากมีความเข้มข้นของการออกเสียงทั่วไป
ต้นลม ( มะเดื่อ . 1 เซลล์ E และ F ,
รูปที่ 1 B cell ) ในทั้งสองกรณี , ความเข้มข้นของโซเดียม
มักจะ resolvable เป็นกลุ่มของจุดแต่ละ .
ในเซลล์กับตาขนาดกลาง มีโดยทั่วไปสูงกว่า
ความเข้มข้นเรืองแสงจุดในบัดกว่าใน
แม่เซลล์ ( มะเดื่อ . 1 ,เซลล์แอร์ ; รูปที่ 1 B ' D ) เซลล์ที่มีขนาดใหญ่มักจะมีดอกตูมมาก
ความเข้มข้นเรืองแสงในบริเวณลำคอ บางครั้งดูเหมือนว่าเป็นกลุ่มของปอ
( รูปที่ 1 B , เซลล์ B และ C ) และบางครั้งดูเหมือนว่าเป็นวงดนตรี
( รูปที่ 1 เซลล์ , H )
การแปล กรุณารอสักครู่..
