Prior to electrophoresis samples were vortexed, and 20 ml of
supernatant were added to 20 ml of 2 loading buffer (4% SDS, 10%
2-mercaptoethanol, 20% glycerol, 0.004% bromophenol blue,
0.125 M triseHCl), and the sample was boiled at 100 C for 5 min
and centrifuged for 5 s. Samples were subjected to electrophoresis
in 5% Criterion TriseHCl gels (Bio-Rad) until the bromophenol blue
was at the very bottom of the gel. The running buffer consisted of
192 mM glycine, 25 mM Tris and 0.1% SDS. The gels were washed 3
times in double de-ionized water for 5 min each and stained with
Gel-Code Blue Stain reagent (Pierce, Rockford, IL) for 1 h. Gels were
stored covered in double de-ionized water at 4 C until the bands
were excised.
ก่อนที่จะได้รับตัวอย่าง electrophoresis การ vortex, และ 20 มิลลิลิตร
ใสถูกเพิ่มถึง 20 มิลลิลิตร 2 หรือไม่? โหลดบัฟเฟอร์ (4% SDS 10%
2-mercaptoethanol, กลีเซอรีน 20%, 0.004% Bromophenol ฟ้า
0.125 M triseHCl) และตัวอย่างที่ถูกต้มที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที
และปั่นเป็นเวลา 5 วินาที ตัวอย่างถูกยัดเยียดให้ electrophoresis
ใน 5% เกณฑ์เจล TriseHCl (Bio-Rad) จนกว่า Bromophenol สีฟ้า
เป็นที่ด้านล่างสุดของเจล บัฟเฟอร์ทำงานประกอบด้วย
ไกลซีน 192 มิลลิ, 25 มม Tris และ 0.1% SDS เจลล้าง 3
ครั้งในน้ำบริสุทธิ์คู่เป็นเวลา 5 นาทีในแต่ละครั้งและย้อมด้วย
เจลรหัสน้ำยาสีฟ้าสี (เพียร์ซ, ฟอร์ด, อิลลินอยส์) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เจลถูก
เก็บไว้ที่ปกคลุมอยู่ในน้ำบริสุทธิ์คู่ที่ 4 องศาเซลเซียสจนวง
ถูกตัดทิ้ง
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)