Plant samples for FISH-analysis were sequentially collected
after 6, 12, 24, 48 and 72 h after bacterial inoculation. At each
sampling time, the plantlets were removed from the inoculation
flasks and washed three times in phosphate-buffered
saline (PBS; 130 mM NaCl, 7 mM Na2HPO4, 3 mM NaH2PO4; pH
7.2) under shaking of 200 rpm for 5 min each time. After the
washings, the roots were cut in sections of 2–5mm and fixed
in 2 ml of fixation solution (4% paraformaldehyde in PBS) for
12 h at 6 C. After fixation, the roots were washed twice for
5 min in PBS, and stored frozen (20 C) in an Ethanol:PBS
solution (1:1, v/v) until their use for FISH. Control bacterial
mixtures were fixed in 4% PFA and kept in Ethanol:PBS as
described above until FISH-analysis.
โรงงานตัวอย่างสำหรับวิเคราะห์ปลาถูกรวบรวมตามลำดับหลังจาก 6, 12, 24, 48 และ 72 h หลัง inoculation แบคทีเรีย ในแต่ละเวลาการสุ่มตัวอย่าง plantlets ที่ออกจากที่ inoculationน้ำและหินสามเวลาใน buffered ฟอสเฟตน้ำเกลือ (PBS; 130 มม. NaCl, 7 มม. Na2HPO4, 3 มม. NaH2PO4 ค่า pH7.2) ภายใต้การสั่นของ rpm 200 สำหรับ 5 นาทีในแต่ละครั้ง หลังจากwashings รากถูกตัดในส่วนของ 2-5 มม. และถาวรใน 2 ml ของเบีแก้ (4% paraformaldehyde ใน PBS)h 12 ที่ c. 6 หลังจากเบี รากถูกล้างสองครั้งสำหรับ5 นาทีใน PBS และเก็บแช่แข็ง (20 C) ในเอทานอล: PBSโซลูชั่น (1:1, v/v) จนถึงการใช้ปลา ควบคุมแบคทีเรียส่วนผสมได้คงที่ใน 4% รับและเก็บไว้ในเอทานอล: PBS เป็นข้างจนปลาวิเคราะห์
การแปล กรุณารอสักครู่..

ตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์พืชเป็นปลาเก็บ
หลังจาก 6 , 12 , 24 , 48 และ 72 ชั่วโมงหลังจากปลูกเชื้อ ที่แต่ละคน
เวลา , ต้นเป็นลบออกจากวัคซีน
flasks และล้างสามครั้งในฟอสเฟต 2
น้ำเกลือ ( PBS ; 130 mm ขนาด 7 มม. na2hpo4 3 มม. nah2po4
; พีเอช 7.2 ) ภายใต้การเขย่า 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาทีในแต่ละครั้ง หลังจาก washings
,รากถูกตัดในส่วนที่ 2 – 5 และคงที่
2 ml ของการตรึง โซลูชั่น ( พาราฟอร์มาลดิไฮด์ 4% ใน PBS )
12 ชั่วโมง 6 C หลังจากการตรึง , รากถูกล้างสองครั้ง
5 นาทีใน PBS และเก็บแช่แข็ง ( 20 C ) ในเอทานอล : PBS
วิธีแก้ปัญหา ( 1 : 1 v / v ) จนกระทั่งการใช้สำหรับปลา ควบคุมแบคทีเรียผสมที่ได้รับการแก้ไขใน 4
% ๙และเก็บไว้ในเอทานอล : PBS เป็น
ที่อธิบายข้างต้นจนกว่าการวิเคราะห์ปลา
การแปล กรุณารอสักครู่..
