The mixture was then incubated at 3

The mixture was then incubated at 37°C for 5 h. The reaction was
stopped by incubating at 65°C for 10 min and diluting 10 times in 0.1X TE (1 mM Tris-HCl,
0.1 mM EDTA, pH 8) for polymerase chain reaction (PCR) amplification. The second reaction
was carried out as above, except that HpaII (Fermentas) was used instead of MspI. The
pre-selective amplification reaction was performed using 2 μL diluted digestion/ligation reactions,
in 25 μL PCR mixture containing 200 mM Tris-HCl, pH 8.4, 500 mM KCl

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ส่วนผสมได้แล้ว incubated ที่ 37° C สำหรับ 5 h ปฏิกิริยาหยุด โดย incubating ที่ 65° C สำหรับ 10 นาที และ diluting 10 ครั้งใน TE X 0.1 (1 มม.ตรี-HCl0.1 mM EDTA ค่า pH 8) สำหรับพอลิเมอเรสปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ขยาย ปฏิกิริยาที่สองได้ดำเนินการดังกล่าว ยกเว้นว่าใช้แทน MspI HpaII (Fermentas) ที่ทำปฏิกิริยาขยาย pre-selective ใช้ย่อยอาหาร/ไข่ 2 μL ผสมปฏิกิริยา25 μL ส่วนผสม PCR ประกอบด้วย 200 mM ตรี-HCl ค่า pH 8.4, 500 mM KCl

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ส่วนผสมที่ถูกบ่มแล้วที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 ชั่วโมง ปฏิกิริยาที่ได้รับการ
หยุดโดยบ่มที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและเจือจาง 10 ครั้งใน 0.1X TE (1 มิลลิ Tris-HCl,
0.1 มิลลิ EDTA, pH 8) สำหรับวิธี Polymerase chain reaction (PCR) ขยาย ปฏิกิริยาที่สอง
ได้รับการดำเนินการดังกล่าวยกเว้น HpaII ที่ (Fermentas) ถูกนำมาใช้แทน MspI
ปฏิกิริยาการขยายก่อนเลือกได้รับการดำเนินการโดยใช้ 2 ไมโครลิตรเจือจางปฏิกิริยาการย่อยอาหาร / ligation,
ผสม 25 ไมโครลิตร PCR ที่มี 200 มิลลิ Tris-HCl, pH 8.4, 500 มิลลิ KCl

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ส่วนผสมก็บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 5 ชั่วโมง ปฏิกิริยาที่ถูกหยุดโดยการแช่
65 ° C เป็นเวลา 10 นาทีและเจือจาง 10 เท่าใน 0.1x เต ( 1 มิลลิเมตรหรือ HCL
0.1 mM EDTA pH 8 ) สำหรับวิธีพีซีอาร์ ( PCR ) ที่ขยาย .
ปฏิกิริยาที่สองเป็นไปตามข้างต้นยกเว้นที่ hpaii ( fermentas ) ถูกนำมาใช้แทนโดยใช้ .
ก่อนเลือกแบบปฏิกิริยาโดยใช้ 2 μชั้นเจือจาง การย่อย / Ligation ปฏิกิริยา
25 μผม PCR ส่วนผสมที่มี HCL หรือ 200 มม. pH 8.4 , 500 mm .