that addition of1 mM ofsilver nitrate increased the number
ofshoots per explant ofChrysanthemum when cultured on a
medium containing equal amounts of cytokinin and auxin.
Even at a concentration of 10 mM, silver nitrate did not
inhibit shoot regeneration. Moreover, concentrations of
silver nitrate up to 100 mM did not completely inhibit shoot
regeneration. However, in the present study, silver nitrate
exerted highly negative effects on shoot regeneration from
explants cultured on medium containing 1 mM silver
nitrate, whereas 25 mM of silver nitrate completely
inhibited shoot regeneration. A possible explanation for
this discrepancy could be that a higher concentration of
cytokinin was used in the study by Xiaohan et al. [15], as
cytokinin is known to stimulate ethylene production in vitro.
Thus, addition of silver nitrate (10–20 mM) would result in
the absorption ofethylene and promote shoot regeneration.
In a study by Lee et al. [6], 1 mM of silver nitrate stimulated
shoot regeneration in the presence of equal amounts of
cytokinin and auxin. In this study, the concentration of
cytokinin was lower than that of auxin, and the addition of
silver nitrate had negative effects on shoot regeneration. A
significant interaction between cytokinin and silver nitrate
in Chrysanthemum has been reported [15]. Alternately, these
observations could be attributed to differences in endogenous ethylene levels among the various genotypes. Cho and
Kasha [16] earlier reported that silver nitrate as well as other
ethylene inhibitors may stimulate embryogenesis in species
containing high endogenous levels of ethylene, but inhibit
embryogenesis in species with lower endogenous ethylene
levels.
Until now, no report has investigated the effects of
gelling agents on in vitro plant growth parameters of
Chrysanthemum. In our study, Gelrite was best suited for
shoot regeneration and was able to promote superior plant
growth parameters of Chrysanthemum. This observation
could be explained by the fact that Gelrite seemed to
diffuse nutrients that favor in vitro rooting and plant
growth. Recently, Gelrite has been increasingly used as a
gelling agent due to its advantages.
The genetic variation observed in Chrysanthemum has
been reported [17,18]. In the present study, flow cytometry
demonstrated genetic stability between the mother plant
(control) as well as the in vitro regenerated plants of
Chrysanthemum cv. Vivid Scarlet. Min˜ano et al. [19] also
observed that most Chrysanthemum cultivars show high
genetic stability when tissue culture is employed for shoot
multiplication. Martı´n et al. [20] mentioned that genotype
is one of the most important factors affecting genetic
variation in Chrysanthemum.
The effects of genotype specificity on shoot organogenesis of Chrysanthemum have been reported [5,21,22].
Recently, Lim et al. [5] observed that shoot formation
from leaf explants of Chrysanthemum is highly dependent
on genotypes, whereas only one out of eleven cultivars
exhibited shoot induction. However, the PGR combination
used in this experiment was applicable to four out of six
cultivars. Thus, we suggest that our combination would be
useful for genetic transformation of cultivars.
5. Conclusion
Shoot regeneration from leaf explants of Chrysanthemum cv. Vivid Scarlet was optimized by examining the
effects of PGRs, dark incubation period, gelling agents, and
silver nitrate. Influences of specific concentrations of PGRs,
dark incubation period, and gelling agent on efficient shoot
regeneration in vitro were observed. Further, a negative
effect of silver nitrate was also revealed. In addition, the
most suitable gelling agent for rooting and plant growth
was determined to be Gelrite. In this study, the established
protocol was applicable to shoot regeneration of other
cultivars
that addition of1 mM ofsilver nitrate increased the numberofshoots per explant ofChrysanthemum when cultured on amedium containing equal amounts of cytokinin and auxin.Even at a concentration of 10 mM, silver nitrate did notinhibit shoot regeneration. Moreover, concentrations ofsilver nitrate up to 100 mM did not completely inhibit shootregeneration. However, in the present study, silver nitrateexerted highly negative effects on shoot regeneration fromexplants cultured on medium containing 1 mM silvernitrate, whereas 25 mM of silver nitrate completelyinhibited shoot regeneration. A possible explanation forthis discrepancy could be that a higher concentration ofcytokinin was used in the study by Xiaohan et al. [15], ascytokinin is known to stimulate ethylene production in vitro.Thus, addition of silver nitrate (10–20 mM) would result inthe absorption ofethylene and promote shoot regeneration.In a study by Lee et al. [6], 1 mM of silver nitrate stimulatedshoot regeneration in the presence of equal amounts ofcytokinin and auxin. In this study, the concentration ofcytokinin was lower than that of auxin, and the addition ofsilver nitrate had negative effects on shoot regeneration. Asignificant interaction between cytokinin and silver nitratein Chrysanthemum has been reported [15]. Alternately, theseobservations could be attributed to differences in endogenous ethylene levels among the various genotypes. Cho andKasha [16] earlier reported that silver nitrate as well as otherethylene inhibitors may stimulate embryogenesis in speciescontaining high endogenous levels of ethylene, but inhibitembryogenesis in species with lower endogenous ethylenelevels.Until now, no report has investigated the effects ofgelling agents on in vitro plant growth parameters ofChrysanthemum. In our study, Gelrite was best suited forshoot regeneration and was able to promote superior plantgrowth parameters of Chrysanthemum. This observationcould be explained by the fact that Gelrite seemed todiffuse nutrients that favor in vitro rooting and plantgrowth. Recently, Gelrite has been increasingly used as agelling agent due to its advantages.The genetic variation observed in Chrysanthemum hasbeen reported [17,18]. In the present study, flow cytometrydemonstrated genetic stability between the mother plant(control) as well as the in vitro regenerated plants ofChrysanthemum cv. Vivid Scarlet. Min˜ano et al. [19] alsoobserved that most Chrysanthemum cultivars show highgenetic stability when tissue culture is employed for shootmultiplication. Martı´n et al. [20] mentioned that genotypeis one of the most important factors affecting geneticvariation in Chrysanthemum.The effects of genotype specificity on shoot organogenesis of Chrysanthemum have been reported [5,21,22].Recently, Lim et al. [5] observed that shoot formationfrom leaf explants of Chrysanthemum is highly dependent
on genotypes, whereas only one out of eleven cultivars
exhibited shoot induction. However, the PGR combination
used in this experiment was applicable to four out of six
cultivars. Thus, we suggest that our combination would be
useful for genetic transformation of cultivars.
5. Conclusion
Shoot regeneration from leaf explants of Chrysanthemum cv. Vivid Scarlet was optimized by examining the
effects of PGRs, dark incubation period, gelling agents, and
silver nitrate. Influences of specific concentrations of PGRs,
dark incubation period, and gelling agent on efficient shoot
regeneration in vitro were observed. Further, a negative
effect of silver nitrate was also revealed. In addition, the
most suitable gelling agent for rooting and plant growth
was determined to be Gelrite. In this study, the established
protocol was applicable to shoot regeneration of other
cultivars
การแปล กรุณารอสักครู่..
นอกจากว่าของ 1 มิลลิ ofsilver ไนเตรตเพิ่มจำนวน
ofshoots ต่อชิ้น ofChrysanthemum
เมื่อเพาะเลี้ยงบนขนาดกลางที่มีจำนวนที่เท่ากันของไซโตไคนิและออกซิน.
แม้ที่ความเข้มข้น 10
มมไนเตรตเงินไม่ได้ยับยั้งการงอกใหม่ของการถ่ายภาพ นอกจากนี้ความเข้มข้นของไนเตรตเงินได้ถึง 100 มิลลิไม่สมบูรณ์ยับยั้งการยิงการฟื้นฟู อย่างไรก็ตามในการศึกษาปัจจุบันไนเตรตเงินออกแรงผลกระทบเชิงลบอย่างมากในการฟื้นฟูยิงจากชิ้นส่วนที่เพาะเลี้ยงบนอาหารที่มี1 มิลลิเงินไนเตรตในขณะที่25 มิลลิไนเตรตเงินสมบูรณ์ยับยั้งการงอกใหม่ของการถ่ายภาพ คำอธิบายที่เป็นไปได้สำหรับความแตกต่างนี้อาจเป็นไปได้ว่ามีความเข้มข้นที่สูงขึ้นของไซโตไคนิที่ใช้ในการศึกษาโดยXiaohan et al, [15] ในขณะที่ไซโตไคนิเป็นที่รู้จักกันเพื่อกระตุ้นการผลิตเอทิลีนในหลอดทดลอง. ดังนั้นการเพิ่มขึ้นของเงินไนเตรต (10-20 มิลลิเมตร) จะส่งผลให้ofethylene การดูดซึมและส่งเสริมการฟื้นฟูยิง. ในการศึกษาโดยลี et al, [6], 1 มิลลิไนเตรตเงินกระตุ้นการงอกใหม่ของการถ่ายภาพในที่ที่มีปริมาณที่เท่ากันของไซโตไคนิและออกซิน ในการศึกษานี้ความเข้มข้นของไซโตไคนิต่ำกว่าที่ของออกซินและการเพิ่มขึ้นของไนเตรตสีเงินมีผลกระทบต่อการงอกใหม่ของการถ่ายภาพ ปฏิสัมพันธ์ที่สำคัญระหว่างไซโตไคนิและไนเตรทเงินในเบญจมาศได้รับรายงาน [15] อีกวิธีหนึ่งเหล่านี้สังเกตอาจจะประกอบไปความแตกต่างในระดับเอทิลีนภายนอกหมู่ยีนต่างๆ โชและKasha [16] ก่อนหน้านี้มีรายงานว่าไนเตรตเงินเช่นเดียวกับที่อื่น ๆยับยั้งเอทิลีนอาจกระตุ้น embryogenesis ในสายพันธุ์ที่มีระดับภายนอกสูงของเอทิลีนแต่ยับยั้งembryogenesis ในสายพันธุ์ที่มีต่ำกว่าเอทิลีนภายนอกระดับ. จนถึงขณะนี้รายงานยังไม่มีการตรวจสอบผลกระทบของตัวแทนในการก่อเจลในหลอดทดลองพารามิเตอร์เจริญเติบโตของพืชของดอกเบญจมาศ ในการศึกษาของเรา Gelrite เป็นเหมาะที่สุดสำหรับการฟื้นฟูยิงและก็สามารถที่จะส่งเสริมพืชที่เหนือกว่าค่าพารามิเตอร์การเจริญเติบโตของดอกเบญจมาศ ข้อสังเกตนี้สามารถอธิบายได้ด้วยความจริงที่ว่า Gelrite ดูเหมือนจะกระจายสารอาหารที่เป็นที่โปรดปรานในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชรากและการเจริญเติบโต เมื่อเร็ว ๆ นี้ได้รับการ Gelrite ใช้เพิ่มขึ้นเป็นตัวแทนก่อเจลอันเนื่องมาจากข้อดีของมัน. การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมพบว่าในดอกเบญจมาศได้รับรายงาน [17,18] ในการศึกษาปัจจุบัน cytometry ไหลแสดงให้เห็นถึงความมั่นคงทางพันธุกรรมระหว่างโรงงานแม่(ควบคุม) เช่นเดียวกับพืชในหลอดทดลอง Regenerated ของพันธุ์ดอกเบญจมาศ สีแดงสดใส Min~ano et al, [19] นอกจากนี้ยังตั้งข้อสังเกตว่าส่วนใหญ่พันธุ์เบญจมาศแสดงสูงเสถียรภาพทางพันธุกรรมเมื่อเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเป็นลูกจ้างสำหรับการถ่ายคูณ Martı'n et al, [20] บอกว่าจีโนไทป์เป็นหนึ่งในปัจจัยที่สำคัญที่สุดที่มีผลต่อทางพันธุกรรมเปลี่ยนแปลงในเบญจมาศ. ผลของยีนที่เฉพาะเจาะจงในการถ่ายอวัยวะของดอกเบญจมาศที่ได้รับรายงาน [5,21,22]. เมื่อเร็ว ๆ นี้ Lim et al, [5] ตั้งข้อสังเกตว่าการก่อตัวยิงจากใบชิ้นส่วนของดอกเบญจมาศจะสูงขึ้นอยู่ในยีนขณะที่มีเพียงหนึ่งในสิบเอ็ดพันธุ์แสดงยิงเหนี่ยวนำ อย่างไรก็ตามการรวมกัน PGR ใช้ในการทดลองครั้งนี้มีผลบังคับใช้กับสี่หกออกมาจากสายพันธุ์ ดังนั้นเราจึงขอแนะนำว่าการรวมกันของเราจะเป็นประโยชน์สำหรับการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมของพันธุ์. 5 สรุปยิงฟื้นฟูจากใบชิ้นส่วนของพันธุ์ดอกเบญจมาศ สีแดงสดใสถูกปรับให้เหมาะสมด้วยการตรวจสอบผลกระทบของ PGRs ระยะเวลาการบ่มเข้มตัวแทนก่อเจลและไนเตรตเงิน อิทธิพลของความเข้มข้นที่เฉพาะเจาะจงของ PGRs, ระยะฟักตัวมืดและตัวแทนก่อเจลที่มีประสิทธิภาพในการถ่ายภาพการฟื้นฟูในหลอดทดลองพบ นอกจากนี้การลบผลกระทบของเงินไนเตรตยังถูกเปิดเผย นอกจากนี้ตัวแทนก่อเจลที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการขจัดและการเจริญเติบโตของพืชได้รับการมุ่งมั่นที่จะGelrite ในการศึกษานี้ที่จัดตั้งขึ้นโปรโตคอลเป็นที่ใช้บังคับกับการถ่ายภาพการงอกของอื่น ๆ พันธุ์
การแปล กรุณารอสักครู่..
ว่านอกจาก 1 มม. ofsilver ไนเตรตเพิ่มขึ้น
ofshoots ต่อต่อ ofchrysanthemum เมื่อเพาะเลี้ยงในอาหารที่มีปริมาณเท่ากัน )
และ ออกซิน . แม้ที่ความเข้มข้น 10 mM , ซิลเวอร์ไนเทรตไม่ได้
ยับยั้งการยิง นอกจากนี้ความเข้มข้นของไนเตรทขึ้น
เงิน 100 มม. ไม่ได้สมบูรณ์ขัดขวางการยิง
อย่างไรก็ตาม ในการศึกษาครั้งนี้ซิลเวอร์ไนเตรท
นั่นเองผลสูงลบยิงผิว
เนื้อเยื่อเพาะเลี้ยงบนอาหารที่มีไนเตรทเงิน
1 มม. และ 25 มม. ซิลเวอร์ไนเทรตอย่างสมบูรณ์
ยับยั้งการยิง คำอธิบายที่เป็นไปได้สำหรับ
ความแตกต่างนี้สามารถที่ความเข้มข้นสูงกว่า
) ถูกใช้ในการศึกษาโดย xiaohan et al . [ 15 ] ,
) เป็นที่รู้จักกันเพื่อกระตุ้นการผลิตเอทิลีนในหลอดทดลอง .
ดังนั้นนอกจากนี้ซิลเวอร์ไนเทรต ( 10 - 20 mm ) จะส่งผลในการดูดซับแสงและส่งเสริมการฟื้นฟู
ในการยิง โดย ลี และคณะ [ 6 ] 1 มม. ของซิลเวอร์ไนเตรท กระตุ้น
การยิงในการปรากฏตัวของจํานวนเงินเท่ากับ
และไซโตไคนินออกซิน . ในการศึกษานี้ความเข้มข้นของ
) ที่ระดับต่ำกว่า ,และนอกเหนือจาก
ซิลเวอร์ไนเทรตได้ผลกระทบเชิงลบในการยิง a
ปฏิสัมพันธ์ระหว่าง ) และเงินไนเตรท
ในเบญจมาศได้รับรายงาน [ 15 ] อีกวิธีหนึ่ง คือ ข้อสังเกตเหล่านี้
อาจจะเกิดจากความแตกต่างในระดับเอทธิลีนภายในระหว่างพันธุ์ต่าง ๆ โช และ คาชา [ 16 ]
รายงานก่อนหน้านี้ว่า เงินไนเตรท
รวมทั้งอื่น ๆสารยับยั้งเอทิลีนอาจกระตุ้นขดงอในชนิดที่มีสูงในระดับ
แต่ยับยั้งเอทิลีนของชนิดในระดับราคาเอทิลีน
.
จนถึงขณะนี้ไม่มีรายงานได้ศึกษาผลของ
gelling ตัวแทนในการเจริญเติบโตของพืชในหลอดทดลองค่า
ดอกเบญจมาศ ในการศึกษาของเรา gelrite เป็นเหมาะที่สุดสำหรับ
การยิงและสามารถส่งเสริมการเจริญเติบโตของพืช
พารามิเตอร์ที่เหนือกว่าของดอกเบญจมาศ การสังเกตนี้
อาจจะอธิบายความจริงที่ว่า gelrite ดูเหมือน
รังกระจายช่วยในการขจัด และการเจริญเติบโตของพืช
เมื่อเร็วๆ นี้ gelrite ถูกใช้มากขึ้นเป็น
gelling เจ้าหน้าที่เนื่องจากข้อดีของมัน ทางพันธุกรรม พบในดอกเบญจมาศ
[ มีรายงาน 17,18 ]ในการศึกษาการไหล (
) ความมั่นคงทางพันธุกรรมระหว่างโรงงานแม่
( ควบคุม ) เช่นเดียวกับการเพาะต้นข้าวของ
ดอกเบญจมาศพันธุ์ สดใสของ Scarlet มิน˜เอ้อ et al . [ 19 ] นอกจากนี้พบว่า พันธุ์เบญจมาศที่สุด
แสดงความมั่นคงทางพันธุกรรมสูงเมื่อเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อใช้สำหรับยิง
การคูณ มาร์ทı´ n et al . [ 20 ] กล่าวว่าพันธุกรรม
เป็นหนึ่งในปัจจัยที่สำคัญที่สุดที่มีผลต่อการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรม
ผลของดอกเบญจมาศ กับความจำเพาะในยิงแกโนเจเนซีสของเบญจมาศได้รับรายงาน [ 5,21,22 ] .
เมื่อเร็ว ๆนี้ลิ้ม et al . [ 5 ] 8
การยิงจากใบการเจริญเติบโตของดอกเบญจมาศสูงขึ้น
ในพันธุ์ ในขณะที่เพียงหนึ่งในสิบเอ็ดพันธุ์
มีเหนี่ยวยิง อย่างไรก็ตามการ pgr รวมกัน
ใช้ในการทดลองนี้ใช้ถึงสี่จากหก
2 พันธุ์ ดังนั้นเราจึงขอแนะนำการรวมกันของเราจะเป็นประโยชน์สำหรับการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมของพันธุ์
.
5 การเพาะเลี้ยงจากใบสรุป
ยิงดอกเบญจมาศพันธุ์ สดใสสีแดงเข้มก็ปรับโดยการตรวจสอบผลของระยะเวลาการบ่ม gelling ของมืด , ตัวแทน , และ
ไนเตรตสีเงินอิทธิพลของความเข้มข้นที่เฉพาะเจาะจงของ
มืด , ฟักตัว และ gelling ตัวแทนในการยิง
มีประสิทธิภาพในหลอดทดลองพบว่า นอกจากนี้ผลกระทบ
ซิลเวอร์ไนเทรตก็เปิดเผย นอกจากนี้ ตัวแทนที่เหมาะสมที่สุด gelling
การเจริญเติบโตของพืชรากและตัดสินใจว่า gelrite . ในการศึกษานี้ ได้ก่อตั้ง
โปรโตคอลที่ใช้ยิงสร้างพันธุ์อื่น
การแปล กรุณารอสักครู่..