. ExtractionFishes, hairtails, and

. Extraction
Fishes, hairtails, and squids were skinned while squillas were deshelled before being dissected carefully with a stainless steel scalpel. Only carcasses of the organisms were used in this work whereas the heads and internal organs were put away. For the big red snappers, the filet and belly were collected separately, while for the wild species, the whole body was used due to their small sizes.

Samples were freeze-dried, ground, and homogenized. About 4 g of each sample (2 g for the belly) was weighed into a 50-mL polytetrafluoroethylene centrifugal tube (Kimble, Vineland, NJ, USA) and spiked with internal standards BP-d10 and 4-MBC-d4 at 100 ng g−1 dw (dw). The sample was then added with 20 mL of methanol and shaken on a vortex mixer (XW-80A Mixer, Shanghai, China) for 2 min prior to being subjected to ultrasonic-assisted extraction on a YJ-5200D ultrasonic water bath (40 kHz, 300 W) for 15 min. The sample was then centrifuged at 4000 rpm for 10 min at 4 °C (Avanti™30 centrifuge, Beckman, CA, USA). The clear supernatant was collected in a glass tube. The above extraction procedure was repeated three times and the extracts were combined (about 60 mL in total). One tenth of the extract was split for lipid content measurement and the rest was concentrated on a Syncore® Polyvap R-12 evaporator (Buchi, Flawil, Switzerland) to just dryness.

2.2.3. Cleanup and fractionation
The extract was re-dissolved in 1 mL of ethyl acetate/cyclohexane (50/50, v/v) prior to being subjected to a glass GPC column (1 cm × 40 cm) packed with Biobeads S-X3 (200–400 mesh, Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA) for lipids removal. The analytes were eluted with ethyl acetate/cyclohexane (50/50, v/v). The first 15 mL of eluate was discarded and the following 16 mL were collected. The collected eluate was concentrated and the solvent was exchanged to hexane prior to further purification with silica gel column (0.7 cm × 15 cm) fractionation. The UV absorbents were eluted with 15 mL of dichlomethane/ethyl acetate (50/50, v/v) from the silica gel column. The sample was brought to dryness under a gentle stream of nitrogen and then reconstituted in 1 mL of methanol prior to UHPLC–MS/MS analysis.

The lipid content was determined by gravimetric analysis. One-tenth of the ultrasonication extract was transferred into a pre-weighed glass vial and was evaporated to complete dryness. The content of lipids was calculated by the difference of the weight of the vial before and after addition of the extract.

2.3. UHPLC–MS/MS identification and quantification
The analytes were determined on a Thermo ACCELA UHPLC system coupled with a TSQ Vantage triple quadrupole mass spectrometer (Thermo Scientific, San Jose, CA, USA) with atmospheric pressure chemical ionization (APCI) interface operated in positive mode.

Separation was achieved on a 2.1 mm × 50 mm ACQUITY BEH C18 column (1.7 μm of particle size, Waters, Milliford, MA, USA) pre-connected with a 4-mm guard column packed with the same material (Phenomenex, CA, USA). The mobile phase was comprised of ultrapure water with 0.2% formic acid and 5 mM ammonium acetate (mobile phase A) and methanol (mobile phase B). The flow gradient started with 60% B and linearly increased to 75% B in 6 min and hold for 6 min, then to 100% B and hold for 6 min, and finally back to 60% B. A post-time of 10 min was set after each run for column equilibration. The injection volume was 5 μL. The solvent flow rate was 0.40 mL min−1 and the column temperature was kept at 40 °C.

The capillary voltage was 4000 V and temperature was 350 °C. Nitrogen was used as both the sheath gas and aux gas at 13.3 and 10 L min−1, respectively. A precursor ion and two product ions were chosen for each analyte in full scan mode and product ion scan mode, respectively. S-lens and collision energy were optimized in selected ion reaction mode (SRM). The working parameters for each analyte are detailed in Table 2. Data acquisition was performed in SRM mode. Identification of the analytes in the environmental samples was achieved by comparing the retention time and the ratio of the two selected ion transitions with those of the standards. The relative standard deviations (RSDs) of the retention times and ion transition ratios should be within 2% and 20%, respectively.

Instrument control and data acquisition were managed with Thermal XCalibur (Thermo Scientific, San Jose, CA, USA). Quantification was performed by internal standard method using deuterated compounds (BP-d10 and 4-MBC-d4) as the internal standards (Table 2). A 10-point calibration curve from 0.01 to 200 μg L−1 was established for each analyte.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

. สกัดปลา hairtails และปลาหมึกได้แม้ในขณะที่ squillas ได้ deshelled ก่อนถูก dissected อย่างระมัดระวังด้วย scalpel สแตนเลส ซากของสิ่งมีชีวิตที่ถูกใช้ในการทำงานนี้ในขณะที่หัวและอวัยวะภายในถูกเก็บ Snappers แดงใหญ่ เธช และท้องถูกรวบรวมไว้ต่างหาก ขณะสำหรับพันธุ์ป่า ร่างกายทั้งหมดถูกใช้เนื่องจากขนาดเล็กของพวกเขาตัวอย่างอบแห้ง พื้นดิน และ homogenized เป็นกลุ่ม แต่ละตัวอย่าง (2 g ในท้อง) ประมาณ 4 กรัมชั่งน้ำหนักเป็น 50 mL polytetrafluoroethylene แรงเหวี่ยงหลอด (Kimble, Vineland, NJ สหรัฐอเมริกา) และ spiked มาตรฐานภายใน BP d10 และ 4-ช่อง MBC-d4 ที่ 100 ng g−1 dw (dw) ตัวอย่างแล้วเพิ่ม มีปริมาณของเมทานอล 20 mL และเขย่าบนเครื่องผสม vortex (ผสม XW 80A เซี่ยงไฮ้ จีน) สำหรับ 2 นาทีก่อนที่จะต้องอัลตราโซนิกช่วยสกัดในน้ำน้ำอัลตราโซนิค YJ - 5200 D (40 kHz, 300 W) สำหรับ 15 นาที ตัวอย่างแล้ว centrifuged ที่ 4000 รอบต่อนาทีใน 10 นาทีที่ 4 ° C (เรียนโรส™ 30 เครื่องหมุนเหวี่ยง Beckman, CA, USA) Supernatant ใสรวบรวมไว้ในหลอดแก้ว กระบวนการสกัดข้างทำซ้ำสามครั้ง และสารสกัดได้รวม (ประมาณ 60 mL รวม) หนึ่งส่วนสิบของสารสกัดถูกแบ่งสำหรับกระบวนการประเมินและส่วนเหลือได้เข้มข้นใน evaporator ที่ Syncore ® Polyvap R-12 (Buchi, Flawil สวิตเซอร์แลนด์) ได้ให้ความแห้งกร้านเพียงเนื้อหา2.2.3 การล้างและแยกส่วนสารสกัดที่ละลายใน 1 mL ของเอทิล acetate/cyclohexane (แบบ v/v) ก่อนแก้ว GPC คอลัมน์ (1 cm × 40 ซม.) บรรจุด้วย Biobeads S - 3 X (200-400 ตาข่าย ห้องปฏิบัติการชีวภาพ Rad เฮอร์คิวลิส CA, USA) ถูกต้องสำหรับโครงการใหม่ได้ Analytes ถูก eluted กับ cyclohexane เอทิล acetate (แบบ v/v) ML 15 แรกของ eluate ได้ถูกยกเลิก และมล 16 ต่อไปนี้ถูกเก็บรวบรวม Eluate รวบรวมเข้มข้น และตัวทำละลายถูกแลกเปลี่ยนกับเฮกเซนก่อนฟอกเพิ่มเติมกับซิลิก้าเจลแยกส่วนคอลัมน์ (0.7 cm × 15 cm) UV absorbents ได้ eluted กับ 15 mL ของ dichlomethane/เอทิล acetate (แบบ v/v) จากคอลัมน์ซิลิก้าเจล ตัวอย่างนำความแห้งกร้านภายใต้กระแสความอ่อนโยนของไนโตรเจน และ reconstituted แล้ว ใน 1 mL ของเมทานอลก่อนวิเคราะห์ UHPLC – MS/MSเนื้อหากระบวนการที่ถูกกำหนด โดยต้องวิเคราะห์ หนึ่งส่วนสิบของสารสกัด ultrasonication ถูกถ่ายโอนในคอนแทคแก้วชั่งน้ำหนักก่อน และได้หายไปกับความแห้งกร้านสมบูรณ์ เนื้อหาของโครงการถูกคำนวณ โดยความแตกต่างของน้ำหนักของคอนแทคที่ก่อน และ หลังเพิ่มการดึงข้อมูล2.3. รหัส UHPLC – MS/MS และนับAnalytes ถูกกำหนดในระบบเทอร์โม ACCELA UHPLC ควบคู่กับการ TSQ Vantage quadrupole สามโดยรวมสเปกโตรมิเตอร์ (วิทยาศาสตร์เทอร์โม San Jose, CA, USA) ด้วยอินเทอร์เฟซการ ionization เคมี (APCI) ความดันบรรยากาศที่ดำเนินการในโหมดบวกแยกสำเร็จ 2.1 มม. × 50 มม. ACQUITY กลาง C18 คอลัมน์ (μm 1.7 ขนาดอนุภาค น้ำ Milliford, MA สหรัฐอเมริกา) ก่อนเชื่อมต่อกับคอลัมน์ยาม 4 มม.บรรจุ ด้วยวัสดุเดียวกัน (Phenomenex, CA, USA) เฟสเคลื่อนประกอบด้วยน้ำ ultrapure 0.2% กรดและ 5 มม.แอมโมเนีย acetate (โมบายระยะ A) และเมทานอล (โมบายระยะ B) ไล่ระดับกระแสเริ่มต้น 60% B และเชิงเส้นเพิ่มขึ้น 75% B ใน 6 นาที และค้างไว้ต่ำสุด 6 แล้วไปที่ 100% B ค้างไว้ 6 นาที และสุดท้าย ไป 60% เกิด เวลา 10 นาทีหลังถูกตั้งค่าหลังจากการรันแต่ละสำหรับคอลัมน์ equilibration ปริมาณฉีดได้ 5 μL อัตราการไหลที่เป็นตัวทำละลายถูก 0.40 มล min−1 และอุณหภูมิคอลัมน์ถูกเก็บไว้ที่ 40 องศาเซลเซียสแรงดันในเส้นเลือดฝอยได้ 4000 V และอุณหภูมิ 350 องศาเซลเซียส ไนโตรเจนถูกใช้ sheath ก๊าซและก๊าซนุเคราะห์ที่ 13.3 และ 10 min−1, L ตามลำดับ ไอออนสารตั้งต้นและผลิตภัณฑ์สองประจุที่ถูกเลือกสำหรับแต่ละ analyte ในโหมดการสแกนแบบเต็มและผลิตภัณฑ์ไอออนโหมดการสแกน ตามลำดับ พลังงาน S เลนส์และชนถูกปรับในโหมดเลือกไอออนปฏิกิริยา (SRM) พารามิเตอร์ทำงานสำหรับแต่ละ analyte มีรายละเอียดในตารางที่ 2 ข้อมูลการทำในโหมด SRM รหัสของ analytes ในตัวอย่างสิ่งแวดล้อมสำเร็จ โดยเปรียบเทียบเวลาเก็บข้อมูลและอัตราส่วนของไอออนเลือกช่วงสองกับมาตรฐาน การสัมพันธ์มาตรฐานส่วนเบี่ยงเบน (RSDs) ของเวลาเก็บข้อมูลและอัตราส่วนเปลี่ยนไอออนควรจะภายใน 2% และ 20% ตามลำดับซื้อเครื่องมือตัวควบคุมและข้อมูลถูกจัดการ ด้วย XCalibur ร้อน (วิทยาศาสตร์เทอร์โม San Jose, CA, USA) นับที่ดำเนินการ โดยวิธีมาตรฐานภายในที่ใช้สาร deuterated (BP d10 และ 4 ช่อง MBC d4) เป็นมาตรฐานภายใน (ตารางที่ 2) เส้นโค้ง 10 จุดเทียบจาก 0.01 ถึง 200 μg L−1 ก่อตั้งขึ้นสำหรับแต่ละ analyte

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

. สกัด
ปลา hairtails และปลาหมึกที่ถูกถลกหนังในขณะที่ squillas ถูก deshelled ก่อนที่จะถูกชำแหละอย่างระมัดระวังด้วยมีดผ่าตัดสแตนเลส เพียงซากของสิ่งมีชีวิตถูกนำมาใช้ในงานนี้ในขณะที่หัวและอวัยวะภายในถูกนำไป สำหรับปลากระพงแดงใหญ่, เสต็กเนื้อหน้าท้องและถูกเก็บแยกต่างหากในขณะที่สายพันธุ์ป่าร่างกายถูกนำมาใช้เนื่องจากขนาดที่เล็กของพวกเขา. กลุ่มตัวอย่างเป็นแห้งพื้นและปั่น ประมาณ 4 กรัมของแต่ละตัวอย่าง (2 กรัมสำหรับท้อง) ได้รับการชั่งน้ำหนักเป็น polytetrafluoroethylene 50 มิลลิลิตรหลอดแรงเหวี่ยง (คิมเบิล, ไวน์แลนด์, นิวเจอร์ซีย์สหรัฐอเมริกา) และถูกแทงที่มีมาตรฐานภายใน BP-D10 และ 4 ช่อง MBC-d4 ที่ 100 นาโนกรัม -1 DW (DW) ตัวอย่างถูกเพิ่มเข้ามาแล้วกับ 20 มลเมทานอลและเขย่าผสมในน้ำวน (XW-80A ผสม, เซี่ยงไฮ้, จีน) เป็นเวลา 2 นาทีก่อนที่จะถูกยัดเยียดให้สกัดล้ำช่วยในอ่างน้ำ YJ-5200D อัลตราโซนิก (40 เฮิร์ทซ์ 300 W) เป็นเวลา 15 นาที ตัวอย่างที่ได้รับการปั่นแล้วที่ 4000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส (Avanti ™ 30 centrifuge เบคค์, CA, USA) ใสชัดเจนถูกเก็บรวบรวมไว้ในหลอดแก้ว ขั้นตอนการสกัดดังกล่าวข้างต้นซ้ำสามครั้งและสารสกัดมารวมกัน (ประมาณ 60 มิลลิลิตรทั้งหมด) หนึ่งในสิบของสารสกัดถูกแบ่งออกสำหรับการตรวจวัดไขมันและส่วนที่เหลือได้รับการจดจ่ออยู่กับSyncore® Polyvap ระเหย R-12 (Buchi, Flawil วิตเซอร์แลนด์) เพียงแค่ความแห้งกร้าน. 2.2.3 การทำความสะอาดและการแยกสารสกัดเป็นอีกครั้งที่ละลายใน 1 มิลลิลิตรเอทิลอะซิเต / cyclohexane (50/50, v / v) ก่อนที่จะถูกยัดเยียดให้คอลัมน์แก้ว GPC (1 ซม. × 40 ซม.) เต็มไปด้วย Biobeads S-X3 (200 -400 ตาข่ายห้องปฏิบัติการ Bio-Rad ดาว, CA, USA) สำหรับการกำจัดไขมัน วิเคราะห์ถูกชะด้วยเอทิลอะซิเต / cyclohexane (50/50, v / v) ครั้งแรก 15 มิลลิลิตร eluate ทิ้งและต่อไปนี้ 16 มิลลิลิตรที่ถูกเก็บรวบรวม eluate เก็บรวบรวมสมาธิและตัวทำละลายที่ถูกแลกเปลี่ยนเป็นเฮกเซนก่อนที่จะมีการทำให้บริสุทธิ์อีกด้วยคอลัมน์ซิลิกาเจล (0.7 ซม. × 15 ซม.) แยก ดูดซับรังสียูวีถูกชะกับ 15 มิลลิลิตร dichlomethane / เอทิลอะซิเตท (50/50, v / v) จากคอลัมน์ซิลิกาเจล ตัวอย่างที่ถูกนำไปแห้งภายใต้กระแสอ่อนโยนของไนโตรเจนและสร้างขึ้นแล้วใน 1 มิลลิลิตรของเมทานอลก่อนที่จะ UHPLC-MS / MS วิเคราะห์. ไขมันถูกกำหนดโดยการวิเคราะห์ gravimetric หนึ่งในสิบของสารสกัดจาก ultrasonication ถูกย้ายเข้าไปในขวดแก้วก่อนชั่งน้ำหนักและได้รับการระเหยแห้งกร้านให้เสร็จสมบูรณ์ เนื้อหาของไขมันที่คำนวณได้จากความแตกต่างของน้ำหนักของขวดก่อนและหลังการเพิ่มขึ้นของสารสกัดจาก. 2.3 UHPLC-MS / MS ประจำตัวประชาชนและการหาปริมาณวิเคราะห์ได้รับการพิจารณาในระบบเทอร์โม Accela UHPLC ควบคู่ไปกับการวิเคราะห์มวล quadrupole TSQ Vantage สาม (เทอร์โมวิทยาศาสตร์, San Jose, CA, USA) ไอออนไนซ์กับสารเคมีที่ความดันบรรยากาศ (APCI) อินเตอร์เฟซที่ดำเนินการในเชิงบวก โหมด. แยกก็ประสบความสำเร็จใน 2.1 มิลลิเมตร× 50 มมคอลัมน์ Acquity BEH C18 (1.7 ไมครอนมีขนาดอนุภาคน้ำ Milliford, MA, USA) ก่อนการเชื่อมต่อกับคอลัมน์ยาม 4 มมเต็มไปด้วยวัสดุเดียวกัน (Phenomenex, CA สหรัฐอเมริกา) เฟสเคลื่อนที่แบ่งเป็นน้ำบริสุทธิ์ที่มี 0.2% และกรดอะซิเตท 5 มิลลิแอมโมเนียม (เฟสเคลื่อนที่) และเมทานอล (เฟสเคลื่อนที่ B) ลาดไหลเริ่มต้นด้วย B 60% และเพิ่มขึ้นเป็นเส้นตรงถึง 75% B 6 นาทีและถือเป็นเวลา 6 นาทีแล้วถึง 100% B ค้างไว้เป็นเวลา 6 นาทีและในที่สุดก็กลับไปที่ 60% บีโพสต์เวลา 10 นาที ถูกกำหนดหลังจากที่วิ่งสมดุลสำหรับแต่ละคอลัมน์ ปริมาณการฉีด 5 ไมโครลิตร อัตราการไหลของตัวทำละลายเป็น 0.40 มิลลิลิตร 1 นาทีและอุณหภูมิคอลัมน์ถูกเก็บไว้ที่ 40 ° C. แรงดันของเส้นเลือดฝอยเป็น 4000 V และอุณหภูมิ 350 องศาเซลเซียส ไนโตรเจนที่ใช้เป็นก๊าซทั้งเปลือกและก๊าซ aux ที่ 13.3 และ 10 นาที L-1 ตามลำดับ ไอออนสารตั้งต้นและสองไอออนสินค้าที่ได้รับการแต่งตั้งในแต่ละวิเคราะห์ในโหมดการสแกนเต็มรูปแบบและโหมดการสแกนไอออนสินค้าตามลำดับ S-เลนส์และพลังงานถูกชนที่ดีที่สุดในโหมดปฏิกิริยาไอออนเลือก (SRM) พารามิเตอร์การทำงานสำหรับแต่ละวิเคราะห์มีรายละเอียดในตารางที่ 2 เก็บข้อมูลที่ได้ดำเนินการในโหมด SRM บัตรประจำตัวของสารในตัวอย่างด้านสิ่งแวดล้อมก็ประสบความสำเร็จโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาและอัตราส่วนของทั้งสองเปลี่ยนไอออนที่เลือกกับผู้ที่มาตรฐาน ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (RSDs) ในครั้งที่การเก็บรักษาและการเปลี่ยนแปลงอัตราส่วนไอออนควรจะอยู่ใน 2% และ 20% ตามลำดับ. ควบคุมเครื่องและเก็บข้อมูลได้รับการจัดการกับความร้อน XCalibur (เทอร์โมวิทยาศาสตร์, San Jose, CA, USA) ปริมาณได้ดำเนินการโดยวิธีการมาตรฐานภายในใช้สาร deuterated (BP-D10 และ 4 ช่อง MBC-d4) เป็นมาตรฐานภายใน (ตารางที่ 2) กราฟมาตรฐาน 10 จุด 0.01-200 ไมโครกรัม L-1 ก่อตั้งขึ้นสำหรับแต่ละวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. การสกัด
ปลา hairtails , และปลาหมึกเป็นผิวในขณะที่ squillas เป็น deshelled ก่อนที่จะถูกชำแหละด้วยมีดสแตนเลส เพียงแต่ซากของสิ่งมีชีวิตถูกใช้ในงานนี้ ส่วนหัวและอวัยวะภายในถูกวางทิ้ง สำหรับใหญ่สีแดง snappers , ฟิ ท้องถูกเก็บแยกจากกัน ในขณะที่สายพันธุ์ป่าร่างกายถูกใช้จากของเล็ก ๆขนาด ตัวอย่าง

ถูกแช่แข็งแห้ง , ดินและบด . ประมาณ 4 กรัมของแต่ละตัวอย่าง ( 2 กรัม ต่อท้อง ) คือ 1 ใน 50 ท่อหอยโข่ง polytetrafluoroethylene ml ( คิมเบิล Vineland , NJ , USA ) และถูกแทงด้วย bp-d10 มาตรฐานภายในและ 4-mbc-d4 100 ng G − 1 DW ( DW )ตัวอย่างแล้วเพิ่ม 20 ml ของเมทานอลและหวั่นไหวใน Vortex Mixer ( xw-80a ผสม , เซี่ยงไฮ้ , จีน ) สำหรับ 2 นาทีก่อนที่จะถูกภายใต้การช่วยสกัดบน yj-5200d ด้วยน้ำร้อน ( 40 kHz , 300 w ) เป็นเวลา 15 นาที ตัวอย่าง แล้วไฟฟ้าที่ 4000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 ° C ( ลุกขึ้น™ 30 centrifuge , Beckman , CA , USA )ที่ชัดเจนคือนำเก็บในหลอดแก้ว ขั้นตอนการสกัดด้านบนทำซ้ำสามครั้งและสารสกัดจากจำนวนรวมประมาณ 60 ml ในทั้งหมด ) หนึ่งในสิบของแยกถูกแยกการวัดไขมันที่เหลือก็เข้มข้นใน syncore ® polyvap องศาเซลเซียส ( บูชิ flawil ระเหย , สวิตเซอร์แลนด์ ) จะตาย

2.2.3 . การทำความสะอาดและการแยก
สารสกัดที่เป็นอีกครั้งที่ละลายใน 1 มิลลิลิตร เอทิลอะซิเตท / ไซโคลเฮกเซน ( 50 / 50 V / V ) ก่อนที่จะถูกยัดเยียดให้ GPC คอลัมน์แก้ว ( 1 ) × 40 ซม. ) บรรจุด้วย biobeads s-x3 ( 200 – 400 ตาข่าย ไบโอ ราดห้องปฏิบัติการ , Hercules , CA , USA ) สำหรับไขมันกำจัด ส่วนกรณีมีตัวอย่างด้วย ethyl acetate / ไซโคลเฮกเซน ( 50 / 50 V / V ) ครั้งแรก 15 มิลลิลิตรของสารละลาย ( eluate ) ถูกทิ้งและต่อไปนี้จำนวน 16 ml .เก็บสารละลาย ( eluate ) กำลังเข้มข้น และตัวทำละลายเฮกเซนก่อนแลกเปลี่ยน เพื่อบำบัดน้ำเสีย เติมกับซิลิกาเจลคอลัมน์ ( 0.7 cm × 15 ซม. ) ( . ยูวีเป็นภาษาอังกฤษตัวอย่าง 15 มิลลิลิตร / ไดคล รมีเทนเอทิลอะซิเตต ( 50 / 50 V / V ) จากซิลิกาเจลคอลัมน์ตัวอย่างที่ทำให้แห้งภายใต้กระแสอ่อนโยนของไนโตรเจน และสร้างใหม่ใน 1 มิลลิลิตรเมธาก่อน uhplc –การวิเคราะห์ MS / MS .

ไขมันถูกกำหนดโดยการวิเคราะห์ด้วย . หนึ่งในสิบของ ultrasonication สกัดถูกถ่ายโอนลงในขวดแก้วก่อนชั่ง และระเหยให้แห้งกร้านเนื้อหาของไขมันคำนวณได้จากความแตกต่างของน้ำหนักของขวด ก่อนและหลังเติมสารสกัด .

2.3 uhplc – MS / MS การจำแนกชนิดและปริมาณสารวิเคราะห์
ในเทอร์โม accela uhplc ระบบควบคู่กับ tsq Vantage สามคำแมสสเปกโตรมิเตอร์ ( เทอร์โมวิทยาศาสตร์ , San Jose , CA ,สหรัฐอเมริกา ) กับไอสารเคมีที่ความดันบรรยากาศ ( ACPI ) ติดต่อดำเนินการในโหมดบวก

แยกสําเร็จบน 2.1 มม. × 50 mm acquity beh คอลัมน์ C18 1.7 μ M ของขนาดอนุภาค , น้ำ , milliford , MA , USA ) ก่อนเชื่อมต่อกับ 4-mm ยามคอลัมน์บรรจุด้วยวัสดุเดียวกัน ( phenomenex , แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยน้ำบริสุทธิ์มากด้วย 02 % กรดอะซิเตท และแอมโมเนีย 5 มม. ( เฟสเคลื่อนที่ ( มือถือ ) และเมทานอล ( B ) การไล่ระดับเริ่มต้นที่ 60% B และน้ำหนักเพิ่มขึ้น 75 % B ใน 6 นาที และค้างไว้ 6 นาที แล้ว 100 % B ค้างไว้ 6 นาที และก็กลับมาถึง 60% บีโพสต์เวลา 10 นาทีในแต่ละชุด หลังจากวิ่ง equilibration คอลัมน์ ปริมาณการฉีด 5 μล. ตัวทำละลายอัตราการไหลเท่ากับ 040 มิลลิลิตรต่อนาที− 1 และคอลัมน์ที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 40 องศา C

C แรงดันไฟฟ้าเป็น 4000 V และอุณหภูมิ 350 องศา ไนโตรเจนที่ใช้เป็นทั้งปลอกแก๊สและก๊าซและ AUX จำนวน 10 ลิตร มิน− 1 ตามลำดับ เป็นสารตั้งต้นและสองไอออนไอออนผลิตภัณฑ์ถูกเลือกสำหรับแต่ละครูเต็มสแกนโหมด และโหมดการสแกนไอออนผลิตภัณฑ์ ตามลำดับs-lens และพลังงานที่เหมาะสมในการเลือกไอออนปฏิกิริยาการชนโหมด ( SRM ) พารามิเตอร์การทำงานของแต่ละครูมีรายละเอียดในตารางที่ 2 ข้อมูลเพิ่มเติมแสดงในโหมดสำหรับ . รหัสของสารที่วิเคราะห์ในตัวอย่างสิ่งแวดล้อมทำโดยเปรียบเทียบความคงทนในการจำ เวลา และอัตราส่วนของทั้งสองการเลือกไอออนที่มีมาตรฐานเทียบกับส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานเทคโนโลยีของการเก็บรักษาและการเปลี่ยนไอออนต่อครั้งควรภายใน 2 % และ 20% ตามลำดับ

ที่ใช้ในการควบคุมข้อมูลและการจัดการกับความร้อน xcalibur ( เทอร์โมวิทยาศาสตร์ , San Jose , CA , USA ) ปริมาณการใช้สารโดยวิธีมาตรฐานภายใน deuterated ( bp-d10 และ 4-mbc-d4 ) เป็นมาตรฐานภายใน ( ตารางที่ 2 )10 จุดรูปโค้งจาก 0.01 200 μ G L − 1 ก่อตั้งขึ้นสำหรับแต่ละครู .