Voltage-gated potassium channels ar

Voltage-gated potassium channels are widespread among various cell types playing roles in numerous cellular functions by controlling the membrane potential. Pharmacological manipulation of these channels carries the potential of selective interference with such well-defined cellular functions if molecules that bind to them with high affinity and specificity are available. Scorpion venoms have long been known for containing small peptide toxins bearing these properties. We are particularly interested in peptides blocking T cell Kv1.3 channels whose normal operation is essential for T cell mediated immune responses.

We screened HPLC purified peptide fractions from Centruroides suffusus suffusus scorpion venom for Kv1.3 channel blocking potency. Screening resulted in one biologically active peptide component, which was purified to homogeneity and named Css20. The toxin's amino acid sequence was completed by Edman degradation and mass spectrometry analysis. It contains 38 amino acid residues with a molecular weight of 4,000.3 Da, tightly folded by three disulfide bridges.

We have found that Css20 preferentially blocked the currents of the voltage-gated K+ channels Kv1.2 and Kv1.3. Its blocking potency was tested on six other potassium channels and a cardiac sodium channel, but the toxin proved ineffective at 10 nM concentration. Dose-response curves of Css20 yielded an IC50 of 1.3 and 7.2 nM for Kv1.2 and Kv1.3 channels, respectively. Interestingly, despite the similar affinities for the two channels the association and dissociation rates of the toxin were much slower for Kv1.2, implying that different interactions may be involved in binding to the two channel types; an implication further supported by in silico docking analyses. Based on the primary structure of Css20, the systematic nomenclature proposed for this toxin is α-KTx 2.13.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ช่องโพแทสเซียม gated แรงแพร่หลายระหว่างเซลล์ชนิดต่าง ๆ ที่เล่นบทบาทในฟังก์ชันโทรศัพท์มือถือจำนวนมาก โดยการควบคุมเมมเบรนมีศักยภาพ จัดการ pharmacological ช่องเหล่านี้นำศักยภาพของฟังก์ชันโทรศัพท์มือถือดังกล่าวโดยใช้สัญญาณถ้าโมเลกุลที่ผูกไปยุ่งและ specificity แมงป่องดีได้รับการเรียกที่ประกอบด้วยสารพิษเพปไทด์ขนาดเล็กเรืองคุณสมบัติเหล่านี้ เรามีความสนใจโดยเฉพาะบล็อกช่อง Kv1.3 T เซลล์ซึ่งการดำเนินงานปกติเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการตอบสนองของภูมิคุ้มกันเซลล์ T mediated เปปไทด์เราฉายเศษเพปไทด์ HPLC บริสุทธิ์จาก Centruroides suffusus suffusus แมงป่องพิษสำหรับบล็อกรู้จักช่อง Kv1.3 ตรวจผลในหนึ่งเพปไทด์งานชิ้นส่วนประกอบ ที่บริสุทธิ์เพื่อ homogeneity และชื่อ Css20 ลำดับกรดอะมิโนของสารพิษเสร็จ โดย Edman ย่อยสลายและการวิเคราะห์สเปกโตรเมท ประกอบด้วยกรดอะมิโนตกค้างที่ 38 กับน้ำหนักโมเลกุลของดา 4,000.3 แน่นพับสามสะพานไดซัลไฟด์เราได้พบว่า Css20 โน้ตบล็อกกระแสแรงดันไฟฟ้า gated K + ช่อง Kv1.2 และ Kv1.3 ทดสอบสมรรถภาพของบล็อกหกช่องโพแทสเซียมอื่น ๆ และช่องโซเดียมหัวใจ แต่สารพิษที่พิสูจน์ผลที่เข้มข้น 10 nM เส้นโค้งตอบสนองยาของ Css20 เต็ม IC50 1.3 และ 7.2 nM สำหรับช่องสัญญาณ Kv1.2 และ Kv1.3 ตามลำดับ เป็นเรื่องน่าสนใจ แม้ มี affinities เหมือนกันสำหรับช่องสอง สมาคมและ dissociation อัตราของสารพิษถูกช้าสำหรับ Kv1.2 หน้าที่ว่า โต้ตอบต่าง ๆ อาจเกี่ยวข้องในการรวมชนิดสองช่อง ปริยายที่สนับสนุนเพิ่มเติม โดยใน silico เทียบวิเคราะห์ ตามโครงสร้างหลักของ Css20 ระบบการตั้งชื่อระบบที่นำเสนอสำหรับสารพิษนี้ได้ด้วยกองทัพปู 2.13

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แรงดันไฟฟ้ารั้วรอบขอบชิดช่องโพแทสเซียมเป็นที่แพร่หลายในหมู่เซลล์ชนิดต่างๆเล่นบทบาทในฟังก์ชั่นโทรศัพท์มือถือจำนวนมากโดยการควบคุมที่มีศักยภาพเมมเบรน การจัดการทางเภสัชวิทยาของช่องทางเหล่านี้ดำเนินการที่มีศักยภาพของการรบกวนด้วยเช่นเลือกที่ดีที่กำหนดฟังก์ชั่นโทรศัพท์มือถือถ้าโมเลกุลที่ผูกไว้กับพวกเขาด้วยความสัมพันธ์ที่ใกล้ชิดและความจำเพาะสูงที่มีอยู่ แมงป่องพิษมีมานานแล้วที่รู้จักกันสำหรับสารพิษที่มีเปปไทด์ขนาดเล็กแบกคุณสมบัติเหล่านี้ เรามีความสนใจโดยเฉพาะอย่างยิ่งในการปิดกั้นเปปไทด์เซลล์ T ช่อง Kv1.3 ที่มีการดำเนินงานปกติเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับมือถือ T พึ่งการตอบสนองภูมิคุ้มกัน. เราคัดเลือก HPLC บริสุทธิ์เศษส่วนเปปไทด์จากพิษแมงป่อง Centruroides suffusus suffusus ช่อง Kv1.3 การปิดกั้นความแรง การคัดกรองผลในส่วนหนึ่งเปปไทด์ชีวภาพซึ่งบริสุทธิ์จะเป็นเนื้อเดียวกันและตั้งชื่อ Css20 ลำดับกรดอะมิโนสารพิษที่ถูกย่อยสลายแล้วเสร็จโดย Edman และการวิเคราะห์มวลสาร มันมี 38 กรดอะมิโนที่มีน้ำหนักโมเลกุล 4,000.3 ดาพับแน่นโดยสามสะพานซัลไฟด์. เราพบว่า Css20 พิเศษปิดกั้นกระแสของแรงดันรั้วรอบขอบชิด k + ช่อง Kv1.2 และ Kv1.3 การปิดกั้นความแรงของมันได้รับการทดสอบในหกโพแทสเซียมช่องทางอื่น ๆ และช่องโซเดียมหัวใจ แต่สารพิษที่ได้รับการพิสูจน์ไม่ได้ผลที่มีความเข้มข้น 10 นาโนเมตร เส้นโค้งปริมาณการตอบสนองของ Css20 ผล IC50 1.3 และ 7.2 นาโนเมตรสำหรับช่องทางและ Kv1.2 Kv1.3 ตามลำดับ ที่น่าสนใจแม้จะมีความพอใจที่คล้ายกันสำหรับทั้งสองช่องทางในการเชื่อมโยงและอัตราการแยกตัวของสารพิษได้ช้ามากสำหรับ Kv1.2 หมายความว่าการมีปฏิสัมพันธ์ที่แตกต่างกันอาจจะมีส่วนร่วมในการที่จะมีผลผูกพันทั้งสองประเภทช่อง; นัยได้รับการสนับสนุนต่อไปโดยในการวิเคราะห์ silico เชื่อมต่อ ขึ้นอยู่กับโครงสร้างหลักของ Css20 ที่เรียกชื่ออย่างเป็นระบบที่นำเสนอสำหรับสารพิษนี้α-KTX 2.13

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แรงดัน gated ช่องโพแทสเซียมอย่างกว้างขวางในหมู่ต่างๆเซลล์ประเภทเล่นบทบาทหน้าที่ของเซลล์มากมาย โดยการควบคุมด้วยศักยภาพ การจัดการการใช้ช่องทางเหล่านี้มีศักยภาพของเลือกรบกวนด้วยเช่นฟังก์ชันมือถือต่อ ถ้าโมเลกุลที่ให้พวกเขามี affinity สูงและความจำเพาะ เป็นใช้ได้แมงป่องพิษมานานรู้จักสารพิษที่มีขนาดเล็กที่มีคุณสมบัติเหล่านี้ เราสนใจโดยเฉพาะอย่างยิ่งในเปปบล็อกทีเซลล์ kv1.3 ช่องทางที่ปกติ การผ่าตัดเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการตอบสนองของภูมิคุ้มกันเซลล์ t )

เราคัดหาเศษส่วนจากเปปไทด์บริสุทธิ์ centruroides suffusus suffusus แมงป่องพิษเพื่อ kv1.3 ช่องกั้นความแรงการคัดกรองผลในหนึ่งองค์ประกอบที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพ เปปไทด์ ซึ่งเป็นวิธีการที่บริสุทธิ์ และตั้งชื่อ css20 . ของสารพิษลำดับกรดอะมิโน แล้วเสร็จ โดยงูหัวกระโหลกและการวิเคราะห์มวลสาร . มันมี 38 กรดอะมิโนตกค้าง มีน้ำหนักโมเลกุล 4000.3 ดาแน่นพับได

สะพานสามเราได้พบว่า css20 preferentially กั้นกระแสของ voltage-gated K และช่องทาง kv1.2 kv1.3 . ของบล็อกซึ่งได้รับการทดสอบในหกช่องอื่นๆ และช่องโพแทสเซียมโซเดียมหัวใจ แต่พิษพิสูจน์ไม่ได้ผลที่ 10 นาโนเมตรความเข้มข้น การตอบสนองของยาโค้ง css20 ให้ผลการ ic50 ของ 1.3 และ 7.2 nm สำหรับ kv1.2 และสถานี kv1.3 ตามลำดับ น่าสนใจแม้จะมี affinities เหมือนกันสำหรับสองช่องสมาคมหัวใจอัตราของสารพิษได้ช้ามาก สำหรับ kv1.2 , implying ที่ปฏิสัมพันธ์ที่แตกต่างกันอาจจะเกี่ยวข้องผูกพันกับช่องสองประเภทคือความนัยการสนับสนุนเพิ่มเติมโดย Docking สำหรับวิเคราะห์ข้อมูล ตามโครงสร้างหลักของ css20 , ระบบการเรียกชื่อเสนอสารพิษตัวนี้คือแอลฟา KTX 2.13 .