2.4.1. Extraction and estimation of

2.4.1. Extraction and estimation of PHA
Extraction and estimation of PHA was performed based on the
procedure reported elsewhere (Venkata Mohan et al., 2010). The
biocatalyst was separated from the substrate by centrifugation
(3000g for 30 min at 10 C) and the resulting pellet was washed
with acetone and ethanol separately to remove unwanted materials.
The pellet was suspended in an equal volume of 4% sodium
hypochlorite and incubated at room temperature for 3 h. The
resulting mixture was centrifuged (3000g for 30 min at 10 C)
and the supernatant was discarded. The pellet with lysed cells after
washing simultaneously with acetone and ethanol was dissolved in
hot chloroform and passed through glass fiber filter (0.45 lm pore
size) to separate the polymer from cell debris. The chloroform filtrate
was used to estimate PHA colorimetrically. For the assay,
PHA polymer extracted in chloroform was subjected to evaporation
followed by addition of 10 ml of sulfuric acid (36 N) and
heated at 100 C on a water bath for 10 min. Addition of sulfuric
acid converts the polymer to crotonic acid. The cooled solution
was measured for the absorbance at 235 and 285 nm for determining
the poly (3-hydroxy) butyrate (PHB) and poly (3-hydroxy) valerate
(PHV) concentration, respectively against a sulfuric acid
blank. The standard curve was prepared using pure poly-3(hydroxy
butyrate-co-hydroxy valerate) [P3(HB-co-HV)] (co-ploymer; natural
origin, Aldrich). PHA in the extracted sample was confirmed
by FTIR and 1
H NMR spectroscopy.
2

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4.1 การสกัดและการประเมินของผาการสกัดและการประเมินของผาได้ดำเนินการตามกระบวนรายงานอื่น ๆ (Venkata โมฮาน et al. 2010) การbiocatalyst ถูกแยกออกจากพื้นผิว โดยการหมุนเหวี่ยง(3000g 30 นาทีที่ 10 C) และเม็ดได้ถูกล้างอะซีโตนและเอทานอลเพื่อแยกเอาวัสดุที่ไม่พึงประสงค์เม็ดที่ถูกระงับในปริมาณเท่ากับ 4% โซเดียมไฮโปคลอไรต์ และรับการกกที่อุณหภูมิห้องสำหรับ 3ส่วนผสมที่เป็นผลลัพธ์ถูก centrifuged (3000g 30 นาทีที่ 10 C)และ supernatant ถูกละทิ้ง เม็ด มีนาทีที่ 37uc เซลล์หลังซักพร้อมกัน ด้วยอะซีโตนและเอทานอลละลายในร้อนคลอโรฟอร์ม และผ่านตัวกรองใยแก้ว (0.45 lm รูขุมขนขนาด) เพื่อแยกลิเมอร์จากเศษเซลล์ การกรองคลอโรฟอร์มใช้ประเมินผา colorimetrically สำหรับทดสอบพอลิเมอร์ผาสกัดในคลอโรฟอร์มได้ภายใต้การระเหยตาม ด้วยเติม 10 มิลลิลิตรของกรดซัลฟิวริก (36 N) และความร้อนที่ 100 C บนอ่างน้ำสำหรับ 10 นาทีนอกจากนี้ของกำมะถันกรดแปลงลิเมอร์เป็นกรด crotonic การแก้ปัญหาการระบายความร้อนด้วยถูกวัดค่าที่ 235 และ 285 นิวตันเมตรการกำหนดโพลี (3-ไฮดร็อกซี่) บิวทิเรต (PHB) และโพลี valerate (3-ไฮดร็อกซี่)ความเข้มข้น (PHV) กับกรดกำมะถันตามลำดับว่างเปล่า จัดทำกราฟมาตรฐานใช้เพียวโพลี-3 (ไฮดร็อกซี่ไบคาร์บอเนต-co-ไฮดร็อกซี่ valerate) [P3(HB-co-HV)] (co-ploymer ธรรมชาติกำเนิด Aldrich) พระธาตุในตัวอย่างที่สกัดได้รับการยืนยันโดย FTIR และ 1H NMR สเปกโทรสโก2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4.1 การสกัดและการประมาณค่าของ PHA
การสกัดและการประมาณค่าของ PHA ได้ดำเนินการขึ้นอยู่กับ
ขั้นตอนการรายงานอื่น ๆ (Venkata โมฮัน et al., 2010)
biocatalyst ถูกแยกออกจากพื้นผิวโดยการหมุนเหวี่ยง
(3000G เป็นเวลา 30 นาทีที่ 10 C) และเม็ดส่งผลให้ถูกล้าง
ด้วยอะซิโตนและเอทานอลที่แยกจากกันเพื่อเอาวัสดุที่ไม่พึงประสงค์.
เม็ดถูกระงับในปริมาตรที่เท่ากันของโซเดียม 4%
ไฮโปคลอไรต์และบ่มที่ อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 ชั่วโมง
ผสมทำให้ได้รับการหมุนเหวี่ยง (3000G เป็นเวลา 30 นาทีที่ 10 C)
และสารละลายที่ถูกทิ้ง เม็ดกับเซลล์ lysed หลังจาก
ล้างพร้อมกันด้วยอะซิโตนและเอทานอลถูกละลายใน
คลอโรฟอร์มร้อนและผ่านตัวกรองใยแก้ว (0.45 LM รูขุมขน
ขนาด) เพื่อแยกลิเมอร์จากเศษเซลล์ กรองคลอโรฟอร์ม
ถูกใช้ในการประเมิน colorimetrically PHA สำหรับการทดสอบที่
PHA พอลิเมอสกัดคลอโรฟอร์มได้ภายใต้การระเหย
ตามด้วยนอกเหนือจาก 10 มล. ของกรดซัลฟูริก (36 N) และ
ความร้อนที่ 100 องศาเซลเซียสในอ่างน้ำเป็นเวลา 10 นาที นอกเหนือจากซัลฟูริก
กรดพอลิเมอแปลงให้เป็นกรด crotonic การแก้ปัญหาการระบายความร้อน
ได้รับการวัดการดูดกลืนแสงที่ 235 นาโนเมตรและ 285 สำหรับการกำหนด
โพลี (3 ไฮดรอกซี) butyrate (PHB) และโพลี (3 ไฮดรอกซี) วา
(PHV) ความเข้มข้นตามลำดับกับกรดกำมะถัน
ว่างเปล่า เส้นโค้งมาตรฐานถูกจัดทำขึ้นโดยใช้โพลีบริสุทธิ์ 3 (ไฮดรอกซี
butyrate ร่วมไฮดรอกซีวา) [P3 (HB-ร่วม HV)] (ร่วม Ploymer; ธรรมชาติ
กำเนิดดิช) PHA ในกลุ่มตัวอย่างที่สกัดได้รับการยืนยัน
โดย FTIR และ 1
H NMR สเปกโทรสโก.
2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . การสกัดและการประมาณค่าของผาการสกัดและการกระทำตามผาขั้นตอนการรายงานอื่น ๆ ( เวงคาต้า Mohan et al . , 2010 ) ที่ตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพแยกจากพื้นผิวโดยการปั่นเหวี่ยง( 3000g สำหรับ 30 นาทีที่ 10 C ) และส่งผลให้เม็ดล้างด้วยอะซิโตนและเอทานอลแยกเอาวัสดุที่ไม่พึงประสงค์เม็ดถูกระงับในปริมาณเท่ากับ 4 % โซเดียมไฮโป และ บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 ชั่วโมงซึ่งส่วนผสมระดับ ( 3000g 30 นาทีที่ 10 องศาเซลเซียสและนำมันทิ้ง เม็ดกับ lysed เซลล์หลังจากซักผ้าพร้อมกันด้วยอะซิโตนและละลายในเอทานอลคลอโรฟอร์ม และผ่านร้อนผ่านตัวกรองใยแก้ว ( 0.45 ไมโครเมตร กระชับรูขุมขนขนาด ) เพื่อแยกพอลิเมอร์จากเศษเซลล์ คลอโรฟอร์มที่กรองใช้ประเมินผา colorimetrically . สำหรับการตรวจสอบผาโพลิเมอร์ที่สกัดในคลอโรฟอร์ม ถูกกระทำ การระเหยตามด้วยเพิ่ม 10 มล. กรดซัลฟูริค ( 36 ) และอุณหภูมิ 100 C อาบน้ำ 10 นาทีเติมกรดซัลฟูริกกรดแปลงพอลิเมอร์ crotonic กรด เย็น โซลูชั่นวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 235 สำหรับ 285 นาโนเมตรและการโพลิ ( 3-hydroxy ) บิวทิเรต ( PHB ) และพอลิ ( 3-hydroxy ) valerate( พีเอชวี ) ความเข้มข้นตามลำดับกับกรดกำมะถันว่างเปล่า เส้นโค้งมาตรฐานพร้อมใช้ poly-3 ( ไฮดรอกซีบริสุทธิ์บริษัทไฮดรอกซีบิว valerate ( HB ) [ P3 ] ( Co Co HV ) ระดับ ธรรมชาติที่มา อัลดริช ) ผาสกัดตัวอย่างได้รับการยืนยันโดย FTIR และ 1H NMR สเปกโทรสโกปี2