Interferon (IFN)-c, IL-2, tumor-necrosis factor (TNF)-a, IL-4
and IL-13 concentrations in supernatants of T-cell cultures were
measured by ELISA according to the manufacturer’s protocol
(eBioscience, SanDiego,CA, USA).Cell surface marker express-
ionwasmeasuredviaflowcytometrywithfluorochrome-labeled
anti-mouse CD3 (clone eBio500A2), anti-mouse CD4 (clone
GK1.5), anti-mouse CD8 (clone eBioH35-17.2), anti-mouse
CD25 (clone PC61.5), anti-mouse CD69 (clone H1.2F3) and/
or anti-mouse CD40L (clone MR1) (eBioscience). All mAbs
were utilized at a concentration of 0.5 mg/mL. Cell viability
was measured via flow cytometry by labeling with Alexa Fluor
488 annexin V and propidium iodide. For all flow cytometry
experiments, the fluorescence intensity was measured with a
dual laser benchtop flow cytometer (FACSCalibur; Becton
Dickinson, Franklin Lakes, NJ, USA) with a minimum of
20 000 events being collected. Analysis was performed with
FlowJo software (Tree Star, Inc., Ashland, OR, USA).
อินเตอร์เฟียรอน (IFN) - c, IL-2 อัตราการตายเฉพาะส่วนเนื้องอก (TNF) - IL-4และความเข้มข้น IL 13 ใน supernatants ของวัฒนธรรม T เซลล์วัด โดย ELISA ตามโพรโทคอของผู้ผลิต(eBioscience, SanDiego, CA, USA) เครื่องหมายผิวเซลล์ด่วน-ชื่อ ionwasmeasuredviaflowcytometrywithfluorochromeป้องกันเมาส์ CD3 (โคลน eBio500A2), เมาส์ป้องกัน CD4 (โคลนGK1.5), ป้องกันเมาส์ CD8 (โคลนหา 17.2 eBioH35), เมาส์ต่อต้านCD25 ป้องกันเมาส์ (โคลน PC61.5), CD69 (โคลน H1.2F3) และ /หรือป้องกันเมาส์ CD40L (โคลน MR1) (eBioscience) ทั้งหมด mAbsถูกใช้ในความเข้มข้น 0.5 mg/mL ชีวิตเซลล์วัดผ่านเซลล์กระแส โดยติดฉลากกับ Alexa Fluor488 annexin V และ propidium ไอโอไดด์ สำหรับเซลล์กระแสทั้งหมดการทดลอง ความเข้ม fluorescence ถูกวัดด้วยการเลเซอร์คู่ benchtop กระแส cytometer (FACSCalibur Bectonดิกคินสัน แฟรงคลินทะเลสาบ NJ สหรัฐอเมริกา) มีน้อย20 000 กิจกรรมการเก็บรวบรวม ทำการวิเคราะห์ด้วยFlowJo ซอฟต์แวร์ (แผนภูมิดาว Inc., Ashland, OR สหรัฐอเมริกา)
การแปล กรุณารอสักครู่..

interferon (IFN) -c, IL-2, ปัจจัยเนื้องอกเนื้อร้าย (TNF) -a, IL-4
และ IL-13 มีความเข้มข้นใน supernatants วัฒนธรรม T-cell ถูก
วัดโดยวิธี ELISA ตามโปรโตคอลของผู้ผลิต
(eBioscience, SanDiego, CA, USA) เครื่องหมายพื้นผิวในขณะนี้ Cell Express-
ionwasmeasuredviaflowcytometrywithfluorochrome ที่มีข้อความ
ต่อต้านเมาส์ CD3 (โคลน eBio500A2) CD4 ต่อต้านเมาส์ (โคลน
GK1.5), การป้องกันเมาส์ CD8 (โคลน eBioH35-17.2), การป้องกันเมาส์
CD25 (โคลน PC61.5) Cd69 ต่อต้านเมาส์ (โคลน H1.2F3) และ /
หรือต่อต้านเมาส์ CD40L (โคลน MR1) (eBioscience) โคลนทั้งหมด
ถูกนำมาใช้ที่ความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร มีชีวิตเซลล์
วัดการไหลผ่านภูมิคุ้มกันโดยการติดฉลากกับ Alexa Fluor
488 annexin V และไอโอไดด์ propidium สำหรับการไหลของภูมิคุ้มกันทุก
การทดลองเรืองแสงความเข้มวัดด้วย
เลเซอร์ไหล benchtop คู่ cytometer (FACSCalibur; Becton
ดิกคินสัน, แฟรงคลินเลค, นิวเจอร์ซีย์สหรัฐอเมริกา) อย่างน้อย
20 000 เหตุการณ์ที่ถูกเก็บรวบรวม วิเคราะห์ได้ดำเนินการกับ
ซอฟแวร์ FlowJo (ดาวต้นไม้, Inc, แอชแลนด์, OR, USA)
การแปล กรุณารอสักครู่..

รอน ( IFN ) - C , IL-2 เนื้องอกเนื้อร้ายปัจจัย ( TNF ) - , il-4
il-13 และความเข้มข้นของแคดเมียม supernatants วัฒนธรรมถูก
วัดโดยวิธีตามขั้นตอนของผู้ผลิต
( ebioscience Sandiego , CA , USA ) เซลล์พื้นผิวเครื่องหมายบริการ -
ionwasmeasuredviaflowcytometrywithfluorochrome ติดป้ายทันทีป้องกันเมาส์ ( โคลน ebio500a2 ) ค่าป้องกันเมาส์ ( โคลน
gk1.5 )สำหรับป้องกันเมาส์ ( โคลน ebioh35-17.2 ) cd25 ป้องกันเมาส์
( โคลน pc61.5 ) , มีป้องกันเมาส์ ( โคลน h1.2f3 ) และ / หรือ cd40l
ป้องกันเมาส์ ( โคลน mr1 ) ( ebioscience ) ทั้งหมดที่ผลิต
ถูกใช้ที่ระดับความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร เซลล์
คือวัดผ่านเครื่องนับเซลล์โดยการติดฉลากกับ Alexa Fluor
ของเซลล์ 488 V และ propidium ไอโอไดด์ . สำหรับการทดลอง (
ไหลเรืองแสงเข้มเป็นวัดที่มีการใช้โมโนเลเซอร์
คู่ แบบตั้งโต๊ะ ( facscalibur ; เบคตอน
ดิกคินสัน Franklin Lakes , NJ , USA ) กับต่ำสุดของ
20 000 เหตุการณ์ถูกเก็บ วิเคราะห์ข้อมูลด้วยโปรแกรม flowjo
( ต้นไม้ดาว , อิงค์ , แอชแลนด์ , หรือ , USA )
การแปล กรุณารอสักครู่..
