Coagulant activity of B. asper veno

Coagulant activity of B. asper venom was determined as
described by Theakston and Reid (1983), as modified by
Gene´ et al. (1989). Various amounts of venom, dissolved in
100 ml PBS were added to 200 ml of citrated human plasma,
and the clotting time recorded. The minimum coagulant
dose (MCD) is the amount of venom which induces
coagulation in 60 s. In some experiments, the clotting
activity of venom was tested on fibrinogen (4 g/l; Sigma-
Aldrich, Missouri, USA) to detect the activity of a thrombinlike
serine proteinase present in this venom (Arago´n and
Gubensek, 1978). For inhibition studies, two protocols were
followed. (a) A constant amount of venom was incubated at
37 8C for 30 min with various concentrations of batimastat.
Then, the mixture was added to either plasma or fibrinogen
and the clotting time recorded. Controls included venom
alone, PBS–Tween alone and batimastat alone. (b) A
constant concentration of batimastat (100 mM) was incubated
with varying amounts of venom at 37 8C for 30 min
and then aliquots were added to citrated plasma or
fibrinogen, and the clotting time was recorded. In order to
dissect out the role of serine proteinases in the clotting
activity, venom was incubated in some experiments with
4 mM PMSF, prior to its addition to plasma or fibrinogen.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดเป็นกิจกรรมในการตกตะกอนของพิษ B. asperอธิบาย โดย Theakston และ Reid (1983), ที่แก้ไขตามGene´ et al. (1989) พิษ ละลายในจำนวนต่าง ๆ100 มิลลิลิตร PBS เพิ่ม 200 ml ของพลาสมามนุษย์ citratedและบันทึกเวลาแข็งตัว ตกตะกอนต่ำสุดปริมาณ (MCD) คือ ปริมาณของพิษซึ่งก่อให้เกิดแข็งตัวใน 60 วินาที ในบางการทดลอง การแข็งตัวกิจกรรมของพิษที่ได้รับการทดสอบบน fibrinogen (4 g/l ซิกมา-Aldrich มิสซูรี สหรัฐอเมริกา) เพื่อตรวจหากิจกรรมของการ thrombinlikeในพิษนี้ proteinase รอบเส้นใยประสาท (Arago´n และGubensek, 1978) ยับยั้งการศึกษา มีสองโปรโตคอลตาม (ก) เป็นจำนวนเงินคงที่ของพิษ incubated ที่37 8C 30 นาทีกับความเข้มข้นต่าง ๆ ของ batimastatแล้ว ส่วนผสมถูกพลาสม่าหรือ fibrinogenและบันทึกเวลาแข็งตัว ควบคุมรวมพิษคนเดียว PBS – แต่เพียงอย่างเดียวและ batimastat เพียงอย่างเดียว (b) Aความเข้มข้นคงที่ของ batimastat (100 mM) มี incubatedมีจำนวนแตกต่างกันของพิษที่ 8C 37 30 นาทีแล้ว เพิ่ม aliquots พลา citrated หรือบันทึก fibrinogen และเวลาแข็งตัว เพื่อเป็นการแบบออกบทบาทของ proteinases รอบเส้นใยประสาทในการแข็งตัวกิจกรรม พิษ incubated บางการทดลองด้วยมม. 4 PMSF ก่อนนอกเหนือจากพลาสมาหรือ fibrinogen

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมการตกตะกอนของ B. asper พิษถูกกำหนดเป็น
อธิบายโดย Theakston และเรด (1983) ในขณะที่การแก้ไขโดย
Gene' et al, (1989) ปริมาณต่างๆของพิษที่ละลายใน
100 มล. พีบีเอสถูกเพิ่มเข้าไปใน 200 มล. ของพลาสม่าของมนุษย์ citrated,
และเวลาที่บันทึกการแข็งตัว สารสร้างตะกอนขั้นต่ำ
ยา (MCD) คือปริมาณของพิษที่ก่อให้เกิดการ
แข็งตัวใน 60 วินาที ในการทดลองบางแข็งตัว
กิจกรรมพิษได้รับการทดสอบ fibrinogen (4 g / l; Sigma-
ดิช, Missouri, USA) ในการตรวจสอบกิจกรรมของ thrombinlike
โปรซีรีนในปัจจุบันพิษนี้ (Arago'n และ
Gubensek, 1978) สำหรับการศึกษาการยับยั้ง, สองโปรโตคอลที่ถูก
ใช้ (ก) จำนวนเงินที่คงที่ของพิษถูกบ่มที่
37 8C เป็นเวลา 30 นาทีที่มีความเข้มข้นต่างๆของ batimastat.
จากนั้นส่วนผสมที่ถูกเพิ่มเข้ามาอย่างใดอย่างหนึ่งหรือพลาสม่า fibrinogen
และเวลาที่บันทึกการแข็งตัว การควบคุมรวมถึงพิษ
คนเดียวพีบีเอส-Tween คนเดียวและคนเดียว batimastat (ข)
ความเข้มข้นอย่างต่อเนื่องของ batimastat (100 มิลลิเมตร) ถูกบ่ม
ด้วยจำนวนเงินที่แตกต่างกันของพิษที่ 37 8C เป็นเวลา 30 นาที
แล้ว aliquots ถูกเพิ่มเข้าไปในพลาสม่า citrated หรือ
fibrinogen และเวลาการแข็งตัวได้รับการบันทึก เพื่อที่จะ
ผ่าออกบทบาทของเอนไซม์ซีรีนในการแข็งตัว
กิจกรรมพิษถูกบ่มในการทดลองบางอย่างกับ
4 มิ PMSF ก่อนที่จะนอกจากนี้ในการพลาสม่าหรือ fibrinogen

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมของ โดยใช้สารพิษถูกกำหนดเป็นบรรยายโดย ธีคสตัน รี้ด ( 1983 ) , แก้ไขโดยยีนใหม่ et al . ( 1989 ) ปริมาณต่างๆของพิษละลายใน100 ml PBS เพิ่ม 200 มิลลิลิตร citrated พลาสมาของมนุษย์และการแข็งตัวของเลือดเวลาบันทึก การตกตะกอนต่ำสุดปริมาณ ( MCD ) คือปริมาณของพิษที่ทำให้การตกตะกอนใน 60 วินาทีในบางการทดลอง , การแข็งตัวของเลือดกิจกรรมของพิษถูกทดสอบบนฟาม ( 4 g / l ; Sigma -อัลดริช , Missouri , USA ) เพื่อตรวจสอบกิจกรรมของ thrombinlikeเอนไซม์โปรตีนที่มีอยู่ในนี้ใหม่ และเกสรพิษgubensek , 1978 ) ยับยั้งการศึกษา สองระบบคือตาม ( ) เป็นจำนวนเงินคงที่ของพิษมันบ่มที่37 8C 30 นาทีที่มีความเข้มข้นต่าง ๆ ของ batimastat .แล้วส่วนผสมจะถูกเพิ่มให้พลาสมา หรือไฟบริโนเจนและการแข็งตัวของเลือดเวลาบันทึก การควบคุมรวมพิษคนเดียว , PBS ) batimastat นเพียงลำพัง คนเดียว ( ข )ปริมาณคงที่ของ batimastat ( 100 มม. ) คือ )กับการเปลี่ยนแปลงปริมาณของพิษที่ 37 8 ซี ประมาณ 30 นาทีแล้วเฉยๆก็เพิ่ม citrated Plasma หรือไฟบริโนเจน และการแข็งตัวของเลือดเวลาจะถูกบันทึก เพื่อวิเคราะห์จากบทบาทของเซรีน proteinases ในการแข็งตัวของเลือดกิจกรรม , พิษถูกบ่มในการทดลองกับPMSF 4 มม. ก่อนของมันนอกจากพลาสมา หรือแพทเทิร์น .