The determination of activity of th

The determination of activity of the phenylalanine ammonia-lyase (FAL) was conducted by colorimetric quantification of the transcinnamic acid released from the substrate phenylalanine,according to the methodology described by KUHN
(2007), where we used a sample of the leaves of each experimental unit, placed it in a porcelain pot and macerated with more 3.0 mL of buffer TRIS – HCl pH 8.0. This extract was conditioned in eppendorf tubes,properly marked and taken to the centrifuge for 10 minutes, at 4ºC and 6000 rpm. After, we transferred an aliquot of 200 μL to an identified test tube, adding more 3.0 mL of extraction buffer. The solution was stirred, obtaining, thus, the enzymatic extract. Of this extract, 1.5 mL was transferred to another test tube, with more 1.0 mL of extraction buffer and 0.5 mL of phenylalanine. Again, this solution was stirred for the homogenization. And after, the tubes were incubated in Bain Marie for 45 minutes at 40ºC. After removing from the Bain Marie, the tubes were placed in ice bath for 5 minutes in order to interrupt the reaction and thus be able to conduct the reading through the spectrophotometer at 290 nm.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดกิจกรรมของ phenylalanine แอมโมเนีย-lyase (FAL) ดำเนินการ โดยการนับสีกรด transcinnamic ที่เผยแพร่จาก phenylalanine พื้นผิว ตามวิธีการอธิบาย โดย KUHN(2007), ซึ่งเราใช้ตัวอย่างของใบของแต่ละหน่วยทดลอง อยู่ในหม้อพอร์ซเลน และ macerated ด้วยเพิ่มเติม 3.0 mL ของ บัฟเฟอร์ทริสเรทติ้ง – HCl pH 8.0 สารสกัดนี้ปรับใน eppendorf ท่อ ถูกทำเครื่องหมาย และนำไปเหวี่ยงแยก 10 นาที 4ºC และ 6000 rpm หลัง เราโอนส่วนลงตัวของ 200 μL ไปทดสอบการระบุหลอด เพิ่มเติม 3.0 mL ของบัฟเฟอร์สกัด การแก้ปัญหากวน ได้รับ ดังนั้น สารสกัดเอนไซม์ ของสารสกัดนี้ 1.5 mL ถูกถ่ายโอนไปอีกหลอด 1.0 mL ของบัฟเฟอร์สกัดและ 0.5 mL ของ phenylalanine อีกครั้ง นี้โซลูชันที่กวนสำหรับ homogenization และหลังจาก หลอดได้รับการกกใน Bain Marie 45 นาทีที่ 40 ºc หลังจากถอดจากของ Bain Marie หลอดถูกวางในอ่างน้ำแข็ง 5 นาทีเพื่อหยุดปฏิกิริยา และจึง จะสามารถทำการอ่านผ่านสเปคที่ 290 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การกำหนดกิจกรรมของ phenylalanine แอมโมเนียไอเลส (FAL) ได้ดำเนินการโดยปริมาณสีของกรด transcinnamic การปล่อยตัวจาก phenylalanine พื้นผิวที่เป็นไปตามวิธีการที่อธิบายโดย KUHN
(2007) ที่เราใช้ตัวอย่างของใบของแต่ละการทดลองที่ หน่วยวางมันลงในหม้อเคลือบและหมักที่มีมากขึ้น 3.0 มลของบัฟเฟอร์ทริส - HCl ค่า pH 8.0 สารสกัดนี้ได้รับการปรับอากาศในหลอด Eppendorf ไว้อย่างถูกต้องและถูกนำตัวไปแปะเป็นเวลา 10 นาทีที่4ºCและ 6000 รอบต่อนาที หลังจากที่เราโอนหาร 200 ไมโครลิตรไปยังหลอดทดลองระบุเพิ่มมากขึ้น 3.0 มลของบัฟเฟอร์สกัด วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกกวนได้รับดังนั้นสารสกัดเอนไซม์ ของสารสกัดนี้ 1.5 มลถูกย้ายไปยังหลอดทดสอบอื่นที่มีมากขึ้น 1.0 มลของบัฟเฟอร์สกัดและ 0.5 มิลลิลิตร phenylalanine อีกครั้งการแก้ปัญหานี้ถูกกวนสำหรับเนื้อเดียวกัน และหลังหลอดถูกบ่มใน Bain Marie เป็นเวลา 45 นาทีที่40ºC หลังจากออกจาก Bain Marie, หลอดถูกวางไว้ในห้องอาบน้ำน้ำแข็งเป็นเวลา 5 นาทีเพื่อที่จะหยุดยั้งการเกิดปฏิกิริยาและทำให้สามารถที่จะดำเนินการอ่านผ่าน spectrophotometer ที่ 290 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การกำหนดกิจกรรมของฟีนิลอะลานีนแอมโมเนีย lyase ( ค ) ดำเนินการโดยปริมาณ 7.4 ของ transcinnamic กรดออกจากสารฟีนิลอะลานีน ตามวิธีการที่อธิบายโดยคูน( 2007 ) ที่เราใช้ตัวอย่างของใบของแต่ละหน่วยทดลองที่ได้วางไว้ในหม้อเคลือบหรือ macerated กับ 3.0 มิลลิลิตร หรือบัฟเฟอร์ pH 8.0 และ HCL . แยกนี้เป็นเว็บไซด์ในเพนดอร์ฟ หลอด ถูกทำเครื่องหมายและนำไป centrifuge เป็นเวลา 10 นาที ที่ 4 º C 6000 รอบต่อนาที หลังจากที่เราโอนเป็นส่วนลงตัวของ 200 μ L ระบุทดสอบหลอดเพิ่ม 3.0 มิลลิลิตร สารสกัด โซลูชั่นที่ถูกกวน ได้รับ ดังนั้น สารสกัดเอนไซม์ . สารสกัดนี้ 1.5 ml ถูกย้ายไปที่หลอดทดลองอื่น มากกว่า 1.0 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์การสกัดและ 0.5 ml ของเบส อีก วิธีนี้ถูกกวนสำหรับการ . และหลังจาก หลอดถูกบ่มใน Bain Marie สำหรับ 45 นาทีที่ 40 º C หลังจากเอาออกจาก Bain Marie , หลอดอยู่ในน้ำแข็งอาบน้ำ 5 นาที เพื่อหยุดยั้งปฏิกิริยาและดังนั้นจึงสามารถทำการอ่านผ่านวัสดุที่ 290 nm .