Besides using native, unaltered pha

Besides using native, unaltered phage particles for bacterial detection, molecular cloning techniques makes it possible to engineer phage to carry a specific reporter gene. Upon infection of a target cell, the gene is expressed and allows detection of its product, e.g., by measuring bioluminescence, fluorescence, or enzymatic conversion of a chromogenic substrate. Table 1 summarizes reporter genes that have been used for construction of reporter phages, with their respective advantages and disadvantages. Reporter phage assays are fast and sensitive and, like the phage amplification assay using native phage, only detect active and viable cells. Another advantage is that the robustness of the assay and the high specificity of the phage eliminate the need for lengthy sample preparation or purification. There is a large body of literature on the many different reporter phages constructed and evaluated, and recent reviews of this topic are available.1,4,9,11 However, certain disadvantages associated with the construction and application of reporter phages should also be mentioned. First, their construction is labor-intensive and requires detailed genetic knowledge of the phage. Furthermore, the volume of the phage capsid sets a natural limit to the amount of genetic material that can be introduced into the phage genome. Common ways of introducing reporter genes include direct cloning (feasible only with a limited number of phages), transposition, and homologous recombination.66 Finally, the fact that reporter phages create genetically modified organisms (GMOs) by infecting their host cells poses potential hurdles with regard to consumer acceptance and regulatory approval of reporter phage products. As a consequence, despite the large amount of effort that has gone into developing reporter phages, there is, as yet, no commercially available product based on this technology. However, the US-based company Sample6 is currently implementing this technology in their Sample6 Detect portfolio for rapid diagnostics of bacteria in food industry environments (sample6.com).67 This approach uses synthetic biology tools such as yeast-based recombineering allowing rapid high-throughput engineering of environmentally isolated phages, thereby generating large synthetic phage libraries; optimization of reporter molecules by genetic engineering; and close integration of these reporters with suitable detectors. The Sample6 Bioillumination PlatformTM enables highly sensitive (single cell) in-plant detection of foodborne pathogens without enrichment and generates results within few hours.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นอกจากการใช้อนุภาค phage ดั้งเดิม unaltered สำหรับตรวจหาแบคทีเรีย เทคนิคการโคลนโมเลกุลทำให้วิศวกร phage สืบทอดยีนเฉพาะโปรแกรมรายงานการ เมื่อมีการติดเชื้อของเซลล์เป้าหมาย ยีนจะแสดง และช่วยให้ตรวจพบผลิตภัณฑ์ของ เช่น โดยวัด bioluminescence, fluorescence หรือพื้นผิว chromogenic แปลงเอนไซม์ในระบบ ตารางที่ 1 สรุปยีนโปรแกรมรายงานที่ใช้สำหรับสร้างโปรแกรมรายงาน phages กับผู้เกี่ยวข้องดีข้อเสีย โปรแกรมรายงาน phage assays อย่างรวดเร็ว และสำคัญ ก เช่น phage ขยายทดสอบใช้เป็น phage เพียงตรวจหาเซลล์ที่ใช้งานอยู่ และทำงานได้ ข้อดีอีกคือ ว่า เสถียรภาพของการทดสอบและ specificity สูงของ phage การกำจัดต้องการเตรียมสารตัวอย่างยาวหรือฟอก มีร่างกายขนาดใหญ่ของวรรณคดีบน phages โปรแกรมรายงานต่าง ๆ มากมายสร้างประเมิน และล่าสุดเห็นหัวข้อนี้ available.1,4,9,11 อย่างไรก็ตาม ยังควรจะกล่าวถึงข้อเสียบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับการก่อสร้างและการประยุกต์ใช้โปรแกรมรายงาน phages ครั้งแรก การก่อสร้างเป็น labor-intensive และต้องรู้รายละเอียดทางพันธุกรรมของ phage นอกจากนี้ ปริมาตรของ phage capsid ตั้งขีดจำกัดทางธรรมชาติจำนวนวัสดุทางพันธุกรรมที่สามารถนำมาใช้ในจีโนม phage ลักษณะทั่วไปของการแนะนำโปรแกรมรายงานยีนรวม ถึงตรงโคลน (ที่เป็นไปได้เท่ากับจำนวนจำกัด phages), transposition, homologous recombination.66 สุด ความจริงที่ว่า โปรแกรมรายงาน phages สร้างสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรม (ดัดแปลงพันธุกรรม) เล็ดเซลล์โฮสต์ซึ่งทำให้เกิดอุปสรรคที่อาจเกิดขึ้นเกี่ยวกับการยอมรับของผู้บริโภคและกำกับดูแลการอนุมัติโปรแกรมรายงานผลิตภัณฑ์ phage ผล แม้ มีจำนวนมากของสิ่งที่หายเข้าไปในการพัฒนาโปรแกรมรายงาน phages เป็นได้ ไม่มีใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ผลิตภัณฑ์ตามเทคโนโลยีนี้ อย่างไรก็ตาม สหรัฐอเมริกาบริษัท Sample6 เป็นปัจจุบันใช้เทคโนโลยีนี้ในผลงานของ Sample6 ตรวจสอบการวินิจฉัยอย่างรวดเร็วของแบคทีเรียในสภาพแวดล้อมอุตสาหกรรมอาหาร (sample6.com).67 ที่วิธีนี้ใช้เครื่องมือชีววิทยาสังเคราะห์เช่นใช้ยีสต์ recombineering ให้อย่างรวดเร็วสูงสูงวิศวกรรมของ phages แยกสิ่งแวดล้อม จึงสร้างไลบรารีของ phage สังเคราะห์ขนาดใหญ่ เพิ่มประสิทธิภาพของโมเลกุลในโปรแกรมรายงานโดยพันธุวิศวกรรม และปิดรวมนักข่าวเหล่านี้ มีเครื่องตรวจจับที่เหมาะสม Sample6 Bioillumination PlatformTM ให้ตรวจโรค foodborne ไม่โดดเด่นในพืชสำคัญ (เซลล์เดียว) สูง และสร้างผลลัพธ์ภายในไม่กี่ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นอกเหนือจากการใช้พื้นเมืองอนุภาคทำลายจุลินทรีย์ไม่เปลี่ยนแปลงสำหรับการตรวจหาแบคทีเรียเทคนิคการโคลนโมเลกุลทำให้มันเป็นไปได้ที่จะเป็นวิศวกรที่จะดำเนินการทำลายจุลินทรีย์ยีนนักข่าวที่เฉพาะเจาะจง เมื่อการติดเชื้อของเซลล์เป้าหมายยีนมีการแสดงออกและช่วยให้การตรวจสอบของผลิตภัณฑ์ของตนเช่นโดยการวัดชีวิตเรืองแสง, เรืองแสงหรือการแปลงเอนไซม์ของพื้นผิว chromogenic ตารางที่ 1 สรุปยีนนักข่าวที่มีการใช้สำหรับการก่อสร้าง phages นักข่าวที่มีประโยชน์ของตนและข้อเสีย ผู้สื่อข่าวตรวจทำลายจุลินทรีย์ได้อย่างรวดเร็วและมีความสำคัญและเช่นเดียวกับการทดสอบการขยายตัวทำลายจุลินทรีย์ที่ใช้ทำลายจุลินทรีย์พื้นเมืองเพียงตรวจหาเซลล์ที่ใช้งานและทำงานได้ ข้อดีก็คือว่าการทดสอบความทนทานของและความจำเพาะสูงของ phage ขจัดความจำเป็นในการเตรียมสารตัวอย่างที่มีความยาวหรือการทำให้บริสุทธิ์ มีร่างกายใหญ่ของหนังสือที่เกี่ยวกับผู้สื่อข่าวที่แตกต่างกัน phages สร้างและประเมินผลเป็นและความคิดเห็นล่าสุดของหัวข้อนี้ available.1,4,9,11 แต่ข้อเสียบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับการก่อสร้างและการประยุกต์ใช้ phages นักข่าวควรที่จะกล่าว . ครั้งแรกของพวกเขาคือการก่อสร้างที่ใช้แรงงานเข้มข้นและต้องมีความรู้ทางพันธุกรรมรายละเอียดของการทำลายจุลินทรีย์ นอกจากนี้ปริมาณของ capsid ทำลายจุลินทรีย์ที่กำหนดขีด จำกัด ของธรรมชาติกับปริมาณของสารพันธุกรรมที่สามารถนำเข้าสู่จีโนมที่ทำลายจุลินทรีย์ วิธีการทั่วไปของการแนะนำยีนนักข่าวรวมถึงการโคลนโดยตรง (เป็นไปได้เท่านั้นที่มีจำนวน จำกัด phages) การขนย้ายและคล้ายคลึงกัน recombination.66 ในที่สุดความจริงที่ว่านักข่าว phages สร้างชีวิตดัดแปลงพันธุกรรม (GMOs) โดยการติดเชื้อเซลล์โฮสต์ของพวกเขาโพสท่าอุปสรรคที่อาจเกิดขึ้นกับ เกี่ยวกับการยอมรับของผู้บริโภคและการอนุมัติกฎระเบียบของนักข่าวผลิตภัณฑ์ฟาจ เป็นผลให้แม้จะมีจำนวนมากของความพยายามที่ได้ไปในการพัฒนา phages นักข่าวมีเป็นยังไม่มีสินค้าในเชิงพาณิชย์บนพื้นฐานของเทคโนโลยีนี้ อย่างไรก็ตาม บริษัท US-based Sample6 ในปัจจุบันคือการใช้เทคโนโลยีนี้ในการตรวจสอบของพวกเขา Sample6 ผลงานสำหรับการวินิจฉัยอย่างรวดเร็วของแบคทีเรียในสภาพแวดล้อมอุตสาหกรรมอาหาร (sample6.com) 0.67 วิธีการนี​​้จะใช้เครื่องมือทางชีววิทยาสังเคราะห์เช่น recombineering ยีสต์ที่ช่วยให้สูงอย่างรวดเร็ว วิศวกรรมผ่านของ phages ที่แยกกับสิ่งแวดล้อมจึงสร้างห้องสมุดทำลายจุลินทรีย์สังเคราะห์ขนาดใหญ่ การเพิ่มประสิทธิภาพของโมเลกุลนักข่าวโดยพันธุวิศวกรรม; และบูรณาการอย่างใกล้ชิดของผู้สื่อข่าวเหล่านี้ด้วยการตรวจจับที่เหมาะสม Sample6 Bioillumination PlatformTM ช่วยให้มีความไวสูง (เซลล์เดียว) การตรวจสอบในโรงงานของเชื้อโรคที่เกิดจากอาหารโดยไม่ต้องเพิ่มคุณค่าและสร้างผลภายในไม่กี่ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นอกเหนือจากการใช้พื้นเมือง , อนุภาคฟาไม่เปลี่ยนแปลงสำหรับแบคทีเรียในการตรวจจับ เทคนิคการโคลนทำให้มันเป็นไปได้ที่จะวิศวกรว่าแบกยีนนักข่าวที่เฉพาะเจาะจง เมื่อการติดเชื้อของเป้าหมายเซลล์ยีนที่แสดงออกและช่วยให้การตรวจสอบสินค้าของ เช่น วัดไบโอลูมิเนสเซนเรืองแสงหรือเอนไซม์ การเปลี่ยนแปลงของพื้นผิวการสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันที .ตารางที่ 1 สรุปยีนนักข่าวที่ถูกใช้สำหรับการก่อสร้างของนักข่าวจ กับข้อดีของตนและข้อเสีย ผู้สื่อข่าวฟา ) เร็วและไว และ เหมือนกับว่า การทดสอบโดยใช้แบบพื้นเมืองว่า เพียงตรวจสอบการใช้งานและใช้เซลล์ข้อดีอีกคือ ว่า ความแกร่งของ การทดสอบ และความจำเพาะสูงของฟาจขจัดความต้องการสำหรับการเตรียมสารตัวอย่างที่ยาวหรือบริสุทธิ์ มีร่างกายขนาดใหญ่ของวรรณกรรมบนหลายนักข่าวจสร้างและประเมิน และล่าสุดรีวิวในกระทู้นี้มี 1,4,9,11 อย่างไรก็ตามข้อเสียบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับการสร้างนักข่าวจยังควรกล่าวถึง ก่อนการก่อสร้างของพวกเขา คือ ที่ใช้แรงงาน และต้องใช้ความรู้ด้านพันธุกรรมของว่า . นอกจากนี้ ปริมาณของเปลือกชุดฟาจำกัดธรรมชาติปริมาณสารพันธุกรรมที่สามารถแนะนำในเฟจจีโนม .วิธีการทั่วไปของการโคลนยีน รวมถึงนักข่าวโดยตรง ( โดยเฉพาะกับจำนวน จำกัด ของฟาจ ) , การขนย้าย , รวมทั้ง recombination.66 ในที่สุด ความจริงที่นักข่าวจสร้างสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรม ( GMOs ) โดยการติดเซลล์โฮสต์ของพวกเขา ท่าทางอุปสรรคศักยภาพเกี่ยวกับการยอมรับของผู้บริโภคและกฎระเบียบการอนุมัติของผลิตภัณฑ์ว่านักข่าวอย่างไรก็ดี แม้จะมีจำนวนมากของความพยายามที่ได้หายไปในการพัฒนานักข่าวจ มี ยัง ไม่ เชิงพาณิชย์ของผลิตภัณฑ์ที่ใช้เทคโนโลยีนี้ แต่เราใช้ sample6 บริษัทใช้เทคโนโลยีนี้ในการตรวจหา sample6 ผลงานเพื่อการวินิจฉัยอย่างรวดเร็วของแบคทีเรียในอุตสาหกรรมอาหาร สภาพแวดล้อม ( sample6 . com )67 วิธีนี้ใช้เครื่องมือสังเคราะห์ชีววิทยา เช่น ยีสต์ที่ใช้ recombineering วิศวกรรมสิ่งแวดล้อมช่วยให้แยกฟาจอย่างรวดเร็ว จึงสร้างห้องสมุดเฟจสังเคราะห์โมเลกุลขนาดใหญ่ การเพิ่มประสิทธิภาพของนักข่าวโดยพันธุวิศวกรรม และบูรณาการปิดของนักข่าวเหล่านี้กับที่เหมาะสมการ sample6 bioillumination platformtm ช่วยให้ความไวสูง ( เซลล์เดียว ) ในพืชการตรวจหาเชื้อโรคอาหารเป็นพิษได้โดยไม่ต้องเสริม และสร้างผลลัพธ์
ภายในไม่กี่ชั่วโมง