During cell proliferation, the abun

During cell proliferation, the abundance of the glycolysis-promoting enzyme, 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase, isoform 3 (PFKFB3), is controlled by the ubiquitin ligase APC/C-Cdh1 via a KEN box. We now demonstrate in synchronized HeLa cells that PFKFB3, which appears in mid-to-late G1, is essential for cell division because its silencing prevents progression into S phase. In cells arrested by glucose deprivation, progression into S phase after replacement of glucose occurs only when PFKFB3 is present or is substituted by the downstream glycolytic enzyme 6-phosphofructo-1-kinase. PFKFB3 ceases to be detectable during late G1/S despite the absence of Cdh1; this disappearance is prevented by proteasomal inhibition. PFKFB3 contains a DSG box and is therefore a potential substrate for SCF-β-TrCP, a ubiquitin ligase active during S phase. In synchronized HeLa cells transfected with PFKFB3 mutated in the KEN box, the DSG box, or both, we established the breakdown routes of the enzyme at different stages of the cell cycle and the point at which glycolysis is enhanced. Thus, the presence of PFKFB3 is tightly controlled to ensure the up-regulation of glycolysis at a specific point in G1. We suggest that this up-regulation of glycolysis and its associated events represent the nutrient-sensitive restriction point in mammalian cells.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในระหว่างการงอกของเซลล์ ความอุดมสมบูรณ์ของการส่งเสริมการ glycolysis เอนไซม์ 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase, isoform 3 (PFKFB3), ถูกควบคุม โดย ligase ubiquitin APC/C-Cdh1 ผ่านเคนเป็นกล่อง เราตอนนี้แสดงให้เห็นในเซลล์ HeLa งโค PFKFB3 ซึ่งปรากฏใน G1 กลางถึงปลาย ว่าจำเป็นต่อการแบ่งเซลล์เนื่องจากของ silencing ป้องกันไม่ให้ก้าวหน้าเป็นระยะ S ในเซลล์จับภาวะขาดกลูโคส ก้าวหน้าเป็นระยะ S หลังจากเปลี่ยนน้ำตาลกลูโคสเกิดขึ้นเฉพาะเมื่อ PFKFB3 อยู่ หรือแทน โดยเอนไซม์ glycolytic ปลายน้ำ 6-phosphofructo-1-kinase PFKFB3 ยุติจะตรวจในช่วง G1 ปลาย S แม้มีการขาดงานของ Cdh1 นี้หายตัวไปจะป้องกัน โดยการยับยั้ง proteasomal PFKFB3 ประกอบด้วยกล่องดีเอสจี และเป็นดังนั้นพื้นผิวที่อาจเกิดขึ้นสำหรับ SCF-β-TrCP, ligase ubiquitin ใช้ระยะ S ในการซิงโครไนส์ HeLa เซลล์ transfected กับ PFKFB3 กลาย ในกล่องเคน กล่องดีเอสจี ทั้ง เราสร้างเส้นแบ่งของเอนไซม์นี้ในระยะต่าง ๆ ของวงจรเซลล์และจุดที่ glycolysis เพิ่ม ดังนั้น สถานะของ PFKFB3 จะแน่นถูกควบคุมให้ข้อบังคับของ glycolysis ที่เฉพาะเจาะจงใน G1 เราขอแนะนำว่า นี้ขึ้นระเบียบของ glycolysis และเหตุการณ์เกี่ยวข้องแสดงถึงจุดจำกัดสารอาหารสำคัญใน mammalian เซลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในระหว่างการเพิ่มจำนวนเซลล์, ความอุดมสมบูรณ์ของเอนไซม์ glycolysis ส่งเสริม 6 phosphofructo-2-ไคเนส / ฟรุกโตส-2,6-bisphosphatase, ไอโซฟอร์ม 3 (PFKFB3) จะถูกควบคุมโดย ligase ubiquitin APC / C-CDH1 ผ่านทางกล่อง KEN . ตอนนี้เราแสดงให้เห็นในการทำข้อมูลให้ตรงกันเซลล์ HeLa ที่ PFKFB3 ที่ปรากฏในช่วงกลางถึงปลาย G1 เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการแบ่งเซลล์ของสมรเพราะป้องกันไม่ให้ก้าวหน้าในระยะ S ในเซลล์จับโดยกีดกันกลูโคสก้าวหน้าเข้าสู่ขั้นตอนหลังจากการเปลี่ยนน้ำตาลกลูโคสเกิดขึ้นเฉพาะเมื่อ PFKFB3 เป็นปัจจุบันหรือถูกแทนที่โดยเอนไซม์ glycolytic ล่อง 6 phosphofructo-1-kinase PFKFB3 สิ้นสุดสภาพการเป็นที่ตรวจพบในช่วงปลาย G1 / S แม้จะมีการขาดหายไปของ CDH1; การหายตัวไปนี้คือการป้องกันโดยการยับยั้ง proteasomal PFKFB3 ประกอบด้วยกล่องดีเอสจีและดังนั้นจึงเป็นสารตั้งต้นที่มีศักยภาพสำหรับ SCF-β-TrCP, ligase ubiquitin ระหว่างขั้นตอนการใช้งาน S ในการประสานเซลล์ HeLa transfected กับ PFKFB3 กลายพันธุ์ใน KEN กล่องกล่องดีเอสจีหรือทั้งสองอย่างเราจัดตั้งเส้นทางรายละเอียดของเอนไซม์ในแต่ละขั้นตอนของวงจรมือถือและจุดที่ glycolysis จะเพิ่มขึ้น ดังนั้นการปรากฏตัวของ PFKFB3 ถูกควบคุมอย่างเข้มงวดเพื่อให้แน่ใจว่าขึ้นระเบียบของ glycolysis ที่จุดที่เฉพาะเจาะจงใน G1 เราขอแนะนำให้นี้ขึ้นระเบียบของ glycolysis และเหตุการณ์ที่เกี่ยวข้องเป็นตัวแทนของจุดการ จำกัด สารอาหารที่มีความสำคัญในเซลล์เลี้ยงลูกด้วยนม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ระหว่างเซลล์การความอุดมสมบูรณ์ของไกลโคไลซิสส่งเสริมเอนไซม์ 6-phosphofructo-2-kinase / fructose-2,6-bisphosphatase ไอโซฟอร์ม 3 , ( pfkfb3 ) ถูกควบคุมโดยยูบิควิตินไลเกส APC / เคน c-cdh1 ผ่านกล่อง ตอนนี้เราแสดงให้เห็นในการแข่งล่าเซลล์ที่ pfkfb3 ซึ่งปรากฏในช่วงกลางถึงปลาย G1 เป็นจำเป็นสำหรับการแบ่งเซลล์ เพราะมันสามารถป้องกันการเข้ามาของเฟสในเซลล์ถูกจับโดยการสูญเสียกลูโคส , ความก้าวหน้าในขั้นตอนหลังจากเปลี่ยนเป็นกลูโคสเกิดขึ้นเมื่อ pfkfb3 เป็นปัจจุบันหรือใช้ประโยชน์ 6-phosphofructo-1-kinase เอนไซม์ glycolytic . pfkfb3 ไม่ได้ถูกตรวจพบในช่วงดึก G1 / S แม้จะขาดจากการหายตัวไป cdh1 ; นี้ป้องกันได้ โดย proteasomal การยับยั้งpfkfb3 ประกอบด้วยกล่อง DSG ซึ่งเป็นศักยภาพพื้นผิวสำหรับคอลัมน์ - บีตา - trcp , ยูบิควิตินไลเกสปราดเปรียวในช่วงของระยะ ในการแข่งล่าเซลล์ transfected กับ pfkfb3 กลายพันธุ์ในกล่องเคน , ดีเอสจี กล่อง หรือทั้งสองอย่าง เราสร้างรายละเอียดเส้นทางของเอนไซม์ในขั้นตอนต่างๆของวัฏจักรของเซลล์ และจุดที่ไกลโคไลซิสคือเพิ่ม ดังนั้นการปรากฏตัวของ pfkfb3 ถูกควบคุมอย่างเข้มงวดเพื่อให้แน่ใจว่าของของไกลโคลิซิสที่จุดที่เฉพาะเจาะจงใน G1 . เราแสดงให้เห็นว่านี้ขึ้นระเบียบของไกลโคไลซิสและเหตุการณ์ที่เกี่ยวข้องเป็นสารอาหารที่มีข้อ จำกัด ใน mammalian เซลล์