considerably reduced, leading to hi

considerably reduced, leading to higher recovered yields at the elution
stage, and thus higher productivity. Information related to
these DoE optimisation studies will be reported subsequently.
The crude supernatants of all three monoclonal human IgGs were
diluted 5-fold with a higher ionic strength, pH 8.0, buffer to
achieve a final concentration of 25 mM Tris and 600 mM Na3citrate
as the loading and wash buffer. No evidence for ‘‘salting out’’ of the
humanised monoclonal antibodies was observed under the experimental
conditions with the 600 mM Na3citrate employed in these
studies. Gradient elution was achieved using a buffer of lower pH
and without salt present (Buffer B: 25 mM MES, pH 5.0). In order
to readily allow a comparison of the capture efficiency and elution
recoveries of the three different mAbs with the same adsorbent,
the same volume of sample was loaded onto columns of identical
dimensions packed with the same amount of the 40-TerPSEA adsorbent
at the same linear flow velocity in each case, with the volume
chosen to achieve overload conditions based on the previously
determined static binding capacities.
Although the overall protein mass balance for the different
humanised mAb isotypes in the combined breakthrough, wash
and eluted fractions in each case was high, i.e. >95%, it was evident
from the these results, e.g. Figs. 4–7 respectively, that whilst selectivity
between the monomeric mAb and other components present
in the loaded sample was achieved, breakthrough of the monomeric
mAb occurred at the load and wash stages of up to ca 15%,
depending of the mAb isotype examined. Fig. 4A shows the chromatographic
profile for the humanised IgG1 mAb supernatant
run on the 40-TerPSEA adsorbent. All fractions as well as the original
sample were analysed by SDS-PAGE (Fig. 4B), demonstrating
that this mAb was largely confined to the eluted peak fractions
with only a very limited extent of breakthrough under the loading
conditions employed. It can also be noted that the elution profiles

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ลดน้อยลงมาก นำไปสูงกู้คืนผลตอบแทนที่การชะขั้นตอน และประสิทธิภาพที่สูงกว่า ข้อมูลที่เกี่ยวข้องกับการศึกษาเหล่านี้ปรับ DoE จะรายงานในเวลาต่อมาSupernatants ดิบของทั้งสาม IgGs มนุษย์โมโนได้ปรับลด 5-fold ที่มีความแรงของไอออนสูงขึ้น ค่า pH 8.0 บัฟเฟอร์ให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายของทริสเรทติ้งขนาด 25 มม.และ 600 มม. Na3citrateเป็นการโหลดและการล้างบัฟเฟอร์ ไม่มีหลักฐานสำหรับ ''ขยำออก '' ของการแอนตี้ monoclonal humanised ถูกตรวจสอบภายใต้การทดลองเงื่อนไขกับ 600 มม. Na3citrate ลูกจ้างในเหล่านี้การศึกษา ไล่ระดับสีชะสำเร็จใช้บัฟเฟอร์ที่ค่า ph ต่ำและไม่ มีเกลืออยู่ (บัฟเฟอร์ b: 25 มม. MES ค่า pH 5.0) ในใบสั่งพร้อมให้การเปรียบเทียบประสิทธิภาพการจับและชะฟื้นตัวของ mAbs แตกสามกับ adsorbent เดียวไดรฟ์ข้อมูลเดียวกันอย่างถูกโหลดลงในคอลัมน์ที่เหมือนกันมิติด้วยกัน adsorbent 40-TerPSEAที่ความเร็วเชิงเส้นลำดับเดียวกันในแต่ละกรณี มีเสียงเลือกที่จะบรรลุสภาวะโหลดเกินตามก่อนหน้านี้กำหนดกำลังการผลิตคงที่รวมแม้ว่าโปรตีนโดยรวมมวลสมดุลที่แตกต่างกันมาบ humanised isotypes ในความก้าวหน้ารวม ล้างและเศษส่วน eluted ในแต่ละกรณีเช่นสูง > 95% มันเป็นที่ชัดเจนจากเหล่านี้ผล เช่นมะเดื่อ. 4 – 7 ลำดับที่ในขณะที่วิธีระหว่างมาบ monomeric และส่วนประกอบปัจจุบันในตัวอย่างที่โหลดสำเร็จ ความก้าวหน้าของการ monomericเกิดมาบที่โหลดและล้างขั้นตอนของถึง ca 15%ขึ้นกับ isotype มาบที่ตรวจสอบ รูปที่ 4A แสดงที่โครมาโปรไฟล์สำหรับมาบ IgG1 humanised supernatantรันบน adsorbent 40-TerPSEA เศษส่วนทั้งหมดรวมทั้งต้นฉบับตัวอย่างที่วิเคราะห์ โดย SDS-หน้า (รูปที่ 4B), สาธิตที่นี้มาบถูกจำกัดส่วนใหญ่ไปส่วนสูง elutedมีเพียงจำนวนจำกัดก้าวหน้าภายใต้การโหลดเงื่อนไขการว่าจ้าง มันยังสามารถระบุที่โพรไฟล์ชะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ลดลงอย่างมากนำไปสู่การกู้คืนอัตราผลตอบแทนที่สูงขึ้นในการชะ
เวทีและการผลิตจึงสูงขึ้น ข้อมูลที่เกี่ยวข้องกับการ
ศึกษาเหล่านี้การเพิ่มประสิทธิภาพ DoE จะมีการรายงานต่อมา.
supernatants น้ำมันดิบของทั้งสาม IgGs มนุษย์โมโนโคลนอลที่ถูก
ปรับลด 5 เท่ากับอิออนพลังสูงกว่าค่า pH 8.0 buffer เพื่อ
ให้บรรลุความเข้มข้นสุดท้ายของ 25 มมทริสและ 600 มิลลิ Na3citrate
เป็น โหลดและล้างบัฟเฟอร์ หลักฐาน '' เกลือออก '' ของไม่มี
โคลนอลแอนติบอดี humanised พบว่าภายใต้การทดลอง
เงื่อนไขกับ 600 มิลลิ Na3citrate ลูกจ้างเหล่านี้ใน
การศึกษา ชะไล่โทนสีก็ประสบความสำเร็จโดยใช้บัฟเฟอร์ค่า pH ต่ำกว่า
และไม่มีเกลือปัจจุบัน (บัฟเฟอร์ B: 25 มม MES ค่า pH 5.0) ในการสั่งซื้อ
ที่จะอนุญาตให้พร้อมการเปรียบเทียบประสิทธิภาพการจับและการชะ
กลับคืนในสามของโคลนที่แตกต่างกับตัวดูดซับเดียวกัน
ปริมาณเดียวกันของกลุ่มตัวอย่างถูกโหลดลงคอลัมน์ของเหมือน
มิติเต็มไปด้วยจำนวนเดียวกันของตัวดูดซับ 40 TerPSEA
ในเวลาเดียวกัน ความเร็วเชิงเส้นการไหลในแต่ละกรณีที่มีไดรฟ์
ได้รับการแต่งตั้งเพื่อให้บรรลุเงื่อนไขที่เกินขึ้นอยู่กับก่อนหน้านี้
ที่กำหนดความจุที่มีผลผูกพันคง.
แม้ว่าสมดุลโปรตีนโดยรวมสำหรับที่แตกต่างกัน
isotypes mAb humanised ในการพัฒนารวม, ล้าง
และชะเศษส่วนในแต่ละกรณีอยู่ในระดับสูง คือ> 95% มันก็เห็นได้ชัด
จากผลเหล่านี้เช่นมะเดื่อ 4-7 ตามลำดับในขณะที่การเลือก
ระหว่าง monomeric mAb และส่วนประกอบอื่น ๆ ปัจจุบัน
ในกลุ่มตัวอย่างโหลดก็ประสบความสำเร็จก้าวหน้าของ monomeric
mAb ที่เกิดขึ้นในการโหลดและล้างขั้นตอนของการขึ้นไป CA 15%
ขึ้นอยู่ของ isotype mAb ตรวจสอบ มะเดื่อ. 4A แสดงโครมา
รายละเอียดสำหรับ humanised IgG1 mAb ใส
ทำงานบนตัวดูดซับ 40 TerPSEA เศษส่วนทั้งหมดเช่นเดียวกับต้นฉบับ
ตัวอย่างที่ได้มาวิเคราะห์โดยวิธี SDS-PAGE (รูป. 4B) แสดงให้เห็น
ว่า mAb นี้ถูกกักตัวไว้ส่วนใหญ่จะเศษส่วนสูงสุดชะ
มีเพียงในขอบเขตที่ จำกัด มากของการพัฒนาภายใต้การโหลด
เงื่อนไขการจ้างงาน นอกจากนี้ยังสามารถตั้งข้อสังเกตว่าโปรไฟล์ชะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ลดลงอย่างมาก ส่งผลให้สูงกว่าผลผลิตที่ใช้หายเวที ซึ่งสูงกว่าผลผลิต ข้อมูลที่เกี่ยวข้องกับนี่ โดเพิ่มประสิทธิภาพการศึกษาจะมีการรายงานในภายหลังการ supernatants ดิบของมนุษย์โคลน iggs สามคือเจือจางกับผู้อื่นสูง ความแรงไอออน , pH 8.0 , บัฟเฟอร์เพื่อบรรลุความเข้มข้นสุดท้าย 25 มิลลิเมตร และ na3citrate บริษัท 600 มม.เมื่อโหลดและล้างบัฟเฟอร์ ไม่มีหลักฐาน "salting " ออก " " ของhumanised โมโนโคลนอลแอนติบอดีพบว่าภายใต้การทดลองเงื่อนไขกับ 600 มม. na3citrate ใช้ในเหล่านี้ศึกษา การไล่ระดับสีได้มาบรรลุใช้บัฟเฟอร์ pH ลดลงและไม่มีเกลือปัจจุบัน ( buffer b : 25 มม. นอกจากนี้ , pH 5.0 ) เพื่อพร้อมช่วยให้เปรียบเทียบประสิทธิภาพและใช้จับภาพเมื่อทั้งสามต่างจำเพาะกับสารดูดซับแบบเดียวกันปริมาตรของตัวอย่างที่โหลดลงในคอลัมน์ของเหมือนกันขนาดบรรจุ ด้วยปริมาณที่เท่ากันของ 40 terpsea ตัวดูดซับขณะ เดียวกัน ความเร็วเชิงเส้นการไหลในแต่ละกรณี มีปริมาณเลือกเพื่อให้บรรลุเงื่อนไขเกินพิกัดตามก่อนหน้านี้กำหนดคงที่ผูกความสามารถแม้ว่าโดยรวมโปรตีนมวลสมดุลต่าง ๆhumanised มาบ isotypes ในการพัฒนารวม ล้างตัวอย่างเศษส่วนและในแต่ละกรณีได้สูง ( > 95% มันเห็นได้ชัดจากผลเหล่านี้ เช่น มะเดื่อ . 4 และ 7 ตามลำดับ ในขณะที่การเลือกที่ระหว่างเกิด และส่วนประกอบอื่น ๆ ซึ่งปัจจุบันในตัวอย่างคือโหลดสำเร็จ วิธีการของซึ่งเกิดขึ้นที่โหลดและล้างขั้นตอนถึง CA 15 %ขึ้นอยู่กับของแอนติบอดีและการตรวจสอบ รูปที่ 4 แสดงโครมาโทกราฟีรายละเอียดสำหรับ humanised ( สูง )วิ่งบน 40 terpsea ตัวดูดซับ เศษส่วนทั้งหมดเช่นเดียวกับต้นฉบับตัวอย่างวิเคราะห์โดย SDS-PAGE แสดง ( รูปที่ 4B )ซึ่งแอนติบอดีนี้ส่วนใหญ่ถูกคุมขังในตัวอย่างสูงสุด เศษส่วนมีเพียงมาก จำกัด ขอบเขตของการพัฒนาภายใต้โหลดใช้เงื่อนไข มันยังสามารถใช้โปรไฟล์ที่ระบุว่า