The assay for phenol hydroxylase (E

The assay for phenol hydroxylase (EC 1.14.13.7) was
conducted spectrophotometrically by monitoring absorbance
decrease at 340 nm, as described by Jones et al. [5]. Spectrophotometric
measurements were recorded every 15 s for
2 min at room temperature. Catechol 1,2-dioxygenase (EC
1.14.13.1) and catechol 2,3-dioxygenase (EC 1.13.11.2) activities
were measured spectrophotometrically by following
formation of ciscis-muconic acid at 260 nm [8] and of
2-hydroxymuconic semi-aldehyde at 375 nm [9], respectively.
Readings were taken at 30 s intervals for 5 min at
room temperature. Controls without substrate or extract were
prepared for each assay. One enzyme unit was defined as
the amount of enzyme that catalyzes the consumption of 1
mol co-substrate or formation of 1 mol product per min.
Protein concentration in the cell extract was determined by
the method of Bradford [10] using bovine serum albumin as
the standard. Specific activity was defined as Units mg per
protein.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ถูกทดสอบสำหรับวาง hydroxylase (EC 1.14.13.7)ดำเนินการตรวจสอบ absorbance spectrophotometricallyลดที่ 340 nm ตามที่อธิบายไว้โดย Jones et al. [5] Spectrophotometricบันทึกประเมินทุก 15 s สำหรับ2 นาทีที่อุณหภูมิห้อง Catechol 1, 2-dioxygenase (EC1.14.13.1) และ catechol 2,3-dioxygenase (EC 1.13.11.2) กิจกรรมมีวัด spectrophotometrically โดยต่อไปนี้ก่อตัวของกรด ciscis muconic ที่ 260 nm [8] และแอลดีไฮด์กึ่ง 2 hydroxymuconic ที่ 375 nm [9], ตามลำดับอ่านที่ถ่ายที่ 30 s ช่วง 5 นาทีที่ที่อุณหภูมิห้อง ถูกควบคุม โดยไม่มีพื้นผิวหรือสารสกัดจากเตรียมพร้อมสำหรับการทดสอบแต่ละ หน่วยเอนไซม์หนึ่งถูกกำหนดเป็นจำนวนเอนไซม์ที่ catalyzes ปริมาณ 1โมลร่วมพื้นผิวหรือการก่อตัวของผลิตภัณฑ์ระดับ 1 โมลต่อนาทีกำหนดโดยความเข้มข้นของโปรตีนในเซลล์สารสกัดจากวิธีการของแบรดฟอร์ด [10] โดยใช้วัว serum albumin เป็นมาตรฐาน กิจกรรมถูกกำหนดให้เป็นหน่วยมิลลิกรัมต่อโปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตรวจหา hydroxylase ฟีนอล (อีซี 1.14.13.7) ที่ได้รับการ
ดำเนินการ spectrophotometrically โดยการตรวจสอบการดูดกลืนแสง
ลดลงที่ 340 นาโนเมตรตามที่อธิบายไว้โดยโจนส์และคณะ [5] สเปก
วัดถูกบันทึกไว้ทุก 15 วินาทีสำหรับ
2 นาทีที่อุณหภูมิห้อง catechol 1,2-dioxygenase (อีซี
1.14.13.1) และ catechol 2,3-dioxygenase (อีซี 1.13.11.2) กิจกรรม
วัด spectrophotometrically โดยต่อไปนี้
การก่อตัวของกรด ciscis-muconic ที่ 260 นาโนเมตร [8] และ
2 hydroxymuconic กึ่ง ก้นที่ 375 นาโนเมตร [9] ตามลำดับ
อ่านถูกนำที่ 30 วินาทีช่วงเวลา 5 นาทีที่
อุณหภูมิห้อง การควบคุมโดยไม่ต้องตั้งต้นหรือสารสกัดที่ได้
จัดเตรียมไว้สำหรับการทดสอบแต่ละ หน่วยเอนไซม์หนึ่งถูกกำหนดเป็น
ปริมาณของเอนไซม์ที่กระตุ้นการบริโภค 1
? mol ร่วมตั้งต้นหรือการก่อตัวของ 1? ผลิตภัณฑ์โมลต่อนาที
ความเข้มข้นของโปรตีนในสารสกัดจากเซลล์ถูกกำหนดโดย
วิธีการของแบรด [10] โดยใช้วัวซีรั่ม โปรตีนชนิดหนึ่งที่เป็น
มาตรฐาน กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงได้รับการกำหนดให้เป็นหน่วยมิลลิกรัมต่อ
โปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( ฟีนอล hydroxylase ( EC 1.14.13.7 ) การตรวจสอบค่า

นี้ลดลง 340 nm , ตามที่อธิบายไว้โดย Jones et al . [ 5 ] การวัด i
ถูกบันทึกไว้ทุก 15 s
2 นาที ที่อุณหภูมิห้อง แคติคอล 1,2-dioxygenase ( EC
1.14.13.1 ) และแคติคอล 2,3-dioxygenase ( EC 1.13.11.2 ) กิจกรรม

วัดนี้ต่อไปการก่อตัวของ ciscis muconic กรดที่ 260 nm [ 8 ] และ
2-hydroxymuconic กึ่ง aldehydes ที่ 375 นาโนเมตร [ 9 ] ตามลำดับ
อ่านถ่ายที่ 30 s
ช่วงเวลาเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง การควบคุมโดยไม่ต้องสารอาหารหรือสารสกัด
เตรียมสำหรับแต่ละการทดสอบ หนึ่งหน่วยเอนไซม์ เช่น
ปริมาณของเอนไซม์ที่กระตุ้นการบริโภค 1
Co  โมลตั้งต้นหรือรูปแบบของผลิตภัณฑ์  โมลต่อนาที
1ความเข้มข้นของโปรตีนในเซลล์ สารสกัดถูกกำหนดโดย
วิธี Bradford [ 10 ] ใช้อัลบูมินเป็น
มาตรฐาน กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงถูกกำหนดเป็นหน่วยมิลลิกรัมต่อ
โปรตีน