Induction of Apoptosis by Rhinacant

Induction of Apoptosis by Rhinacanthone in HeLa
Cells In order to examine whether the inhibitory effect of
rhinacanthone on the growth of HeLa cells is due to apoptosis,
we confirmed the apoptotic characterizations in HeLa
cells by several approaches, e.g., morphological changes,
DNA fragmentation, cell cycle progression, TUNEL staining
assay detection, agarose gel electrophoresis, and FACScan
flow cytometry.
In the morphological change analysis, the cells treated
with 3, 6, and 10 mM rhinacanthone for 4 and 8 h were examined
by using a confocal laser scanning microscope after
staining the cells with in situ TUNEL assay. As shown in Fig.
3, marked morphological changes were observed such as becoming
round in shape, membrane blebbing and apoptotic
bodies; these were the characteristics of apoptotic cells.20—25)
The levels of apoptosis gradually increased in a dose-dependent
manner. Similar results were obtained with b-lapachone
under the same treatment conditions (data not shown).
Subsequently, we analyzed whether DNA fragmentation
was induced by rhinacanthone in HeLa cells using an agarose
gel electrophoresis. After the treatment of HeLa cells with
6 mM rhinacanthone for 4 and 8 h, a typical ladder pattern of
DNA internucleosomal fragmentation was apparently observed,
that is a hallmark of apoptotic cell death18) (Fig. 4).
b-Lapachone and adriamycin (6 mM) treatments also affected

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เหนี่ยวนำการตายโดย Rhinacanthone ใน HeLaเซลล์ในใบสั่งตรวจสอบว่าผลของ inhibitoryrhinacanthone การเจริญเติบโตของเซลล์ HeLa มีเนื่องจากการตายเรายืนยัน characterizations apoptotic ใน HeLaเซลล์ โดยวิธีการต่าง ๆ เช่น สัณฐานเปลี่ยนแปลงการกระจายตัวของดีเอ็นเอ ความก้าวหน้าของวงจรเซลล์ ย้อมสี TUNELตรวจสอบทดสอบ agarose เจอิ และ FACScanการตรวจวิเคราะห์เซลล์ในการวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงสัณฐาน เซลล์บำบัด3, 6 และ 10 มม. rhinacanthone สำหรับ h 4 และ 8 ได้ตรวจสอบโดยใช้เลเซอร์โฟคอกล้องจุลทรรศน์หลังจากการสแกนย้อมสีเซลล์ ด้วยทดสอบ TUNEL ในแหล่งกำเนิด ดังแสดงในรูป3 ข้อสังเกตเช่นเป็นเครื่องหมายการเปลี่ยนแปลงสัณฐานรอบในรูปร่าง blebbing เมมเบรน และ apoptoticร่างกาย เหล่านี้เป็นลักษณะของ apoptotic cells.20—25)ระดับของการค่อย ๆ เพิ่มปริมาณขึ้นอยู่กับการตายของเซลล์ลักษณะ รับผลลัพธ์ที่คล้ายคลึงกับบี-lapachoneภายใต้เงื่อนไขการรักษาเดียว (ไม่แสดงข้อมูล)ต่อมา เราวิเคราะห์ว่าการกระจายตัวของดีเอ็นเอถูกเหนี่ยวนำ โดย rhinacanthone ในเซลล์ HeLa ใช้ agarose มีเจอิ หลังการรักษาเซลล์ HeLa กับrhinacanthone 6 mM สำหรับ 4 และ 8 h บันไดทั่วไปรูปแบบของการกระจายตัวของดีเอ็นเอ internucleosomal ถูกสังเกตเห็นได้ชัดที่เป็นจุดเด่นของ apoptotic เซลล์ death18) (รูป 4)b Lapachone และ adriamycin (6 มิลลิเมตร) ยัง ได้รับผลการรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเหนี่ยวนำของ Apoptosis โดย Rhinacanthone ใน HeLa
เซลล์ในการสั่งซื้อเพื่อตรวจสอบว่ามีผลต่อการยับยั้งของ
rhinacanthone ต่อการเจริญเติบโตของเซลล์ HeLa เป็นเพราะการตายของเซลล์,
เราได้รับการยืนยัน characterizations apoptotic ใน HeLa
เซลล์โดยหลายวิธีเช่นการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยา
ดีเอ็นเอของเซลล์ ความก้าวหน้ารอบ TUNEL การย้อมสี
การตรวจสอบการทดสอบ, ข่าวคราว agarose และ FACScan
flow cytometry.
ในการวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาเซลล์ได้รับการรักษา
ด้วย 3, 6 และ 10 มิลลิ rhinacanthone 4 และ 8 ชั่วโมงมีการตรวจสอบ
โดยใช้ confocal เลเซอร์สแกนกล้องจุลทรรศน์หลัง
การย้อมสีเซลล์ที่มีอยู่ในแหล่งกำเนิด TUNEL ทดสอบ . ดังแสดงในรูป
ที่ 3, การทำเครื่องหมายการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาถูกตั้งข้อสังเกตเช่นกลายเป็น
รอบในรูปร่างเยื่อ blebbing และ apoptotic
ร่างกาย; เหล่านี้เป็นลักษณะของ cells.20-25 apoptotic) ใน
ระดับของการตายของเซลล์เพิ่มขึ้นเรื่อย ๆ ในปริมาณขึ้นอยู่กับ
ลักษณะ ผลที่คล้ายกันที่ได้รับกับ B-lapachone
ภายใต้เงื่อนไขเดียวกันการรักษา (ไม่ได้แสดงข้อมูล).
ต่อจากนั้นเราวิเคราะห์ว่าการกระจายตัวของดีเอ็นเอ
ถูกชักนำโดย rhinacanthone ในเซลล์ HeLa ใช้ agarose
ข่าวคราว หลังจากการรักษาของเซลล์ HeLa กับ
6 มิ rhinacanthone 4 และ 8 ชั่วโมงรูปแบบขั้นบันไดตามแบบฉบับของ
ดีเอ็นเอ internucleosomal เป็นที่สังเกตเห็นได้ชัด
ว่าเป็นจุดเด่นของ death18 เซลล์ที่เกิด apoptosis) (รูปที่. 4).
B-Lapachone และ Adriamycin (6 มิลลิเมตร) การรักษานอกจากนี้ยังได้รับผลกระทบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเหนี่ยวนำการตายแบบ apoptosis โดย rhinacanthone ในล่าเพื่อตรวจสอบว่าเซลล์ยับยั้งผลของrhinacanthone ในการเจริญเติบโตของเซลล์ เนื่องจากเซลล์ Hela ,เรายืนยันในถึงกลุ่มที่มีการศึกษาคุณสมบัติเซลล์โดยวิธีต่างๆ เช่น ลักษณะการเปลี่ยนแปลงการกระจายตัวของดีเอ็นเอ วัฏจักรเซลล์ความก้าวหน้า อุโมงค์ .การตรวจสอบโดยวิธีเจล และ facscan( อัตราการไหลในการวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงลักษณะทางสัณฐานวิทยา เซลล์รักษา3 , 6 , และ 10 มม. rhinacanthone 4 และ 8 ชั่วโมงตรวจสอบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์หลังด้วยเลเซอร์การย้อมเซลล์ด้วยวิธี TUNEL ตามลำดับ ดังแสดงในรูปที่3 , การทำเครื่องหมายการเปลี่ยนแปลงที่พบ เช่น เป็นลักษณะรอบในรูปร่าง และ กลุ่มที่มี blebbing เมมเบรนร่างกาย เหล่านี้เป็นลักษณะของเนื้อเยื่อ 20-25 ) .ระดับของการเพิ่มขึ้นในรายงานการตายลักษณะ ผลที่คล้ายกันได้รับกับ b-lapachoneภายใต้เงื่อนไขการทดลองเดียวกัน ( ข้อมูลไม่แสดง )ต่อมา เราวิเคราะห์ว่า การกระจายตัวของดีเอ็นเอนำโดยเซลล์ที่ใช้ใน rhinacanthone ล่า ,เจล หลังจากการล่าเซลล์กับ6 มม. rhinacanthone 4 และ 8 ชั่วโมง โดยทั่วไปรูปแบบของบันไดinternucleosomal DNA fragmentation ปรากฏว่าสังเกตที่เป็นจุดเด่นของมือถือในกลุ่มที่มี death18 ) ( รูปที่ 4 )b-lapachone ขาวโพลน ( 6 มม. ) และการรักษายังได้รับผลกระทบ